天然药物化学研究的经典方法课件

1、 天然药物化学研究的经典方法有效成分研究的一般途径确定研究对象调 查 研 究成 分 预 试成分提取分离活性成分筛选结 构 测 定临床试验（期） 类 新 药临床调查药材调查文献查阅活性部位活性成分结构改造人工合成期临床药效学研究毒理学研究药代动力学研究类新药提取方法 1 溶剂提取法2水蒸汽蒸馏法3其他方法：升华法，压榨法，吸收法，酶提取法分离方法一、溶剂法1固-液溶剂分离法：部位分离2. 两相溶剂萃取法（1）简单萃取法被萃取液的准备：水悬浊液密度为1.1-1.2之间萃取剂的选择及其用量，次数乳化及其破坏方法（2）逆流连续萃取法萃取效率高，溶剂用量少，不乳化，可工业化。（3）液滴逆流分配法适用于分

2、离同分异构体或同系物及多肽，蛋白质等高分子化合物，热不稳定化合物。三、分馏法 利用液体混合物中各成分的沸点的不同而分离的方法。四、结晶与重结晶法 （1）结晶的条件（2）重结晶溶剂的选择 （3）重结晶过程和析晶方法 （4）微量重结晶（5）结晶纯度的判断六、色谱分离法一、分类按分离过程原理不同可分为：吸附色谱法分配色谱法凝胶渗透色谱法离子交换色谱法亲和色谱法按流动相类型来分: 气相色谱(GC); 流相色谱(LC)按操作方式来分:1、薄层色谱（TLC）薄层色谱：操作、展开方式及注意事项制备型薄层色谱（PTLC）：特点、操作过程离心薄层色谱法（CTLC）高效薄层色谱（HPTLC）：吸附剂粒度范围更窄（

3、57微米）。并采用特殊的粘合剂，分离能力较普通TLC高，展矩短，斑点集中，分离效果好，高效微量快速。2、柱色谱高效液相色谱（HPLC）制备型中压柱色谱（MPLC）制备型低压柱色谱（LPLC）制备型快速柱色谱（闪柱色谱 FC）常压柱色谱（LC）柱色谱操作：梯度洗脱及溶剂解混、等度洗脱干柱色谱的操作减压柱色谱（VLC）干柱色谱3.纸色谱(PC)4.毛细管色谱(CTC)检识方法和结构研究 1理化检识初步确定化合物类型和简单的取代情况2色谱检识TLC，PC，GC或 HPLC标品对照法，文献对照法，多谱联用法3波谱分析UV，IR，NMR，MS，CD，X-ray本节结束吸附色谱法（Adsorption C

4、hromatography）分类：物理吸附：（物理）吸附色谱法化学吸附半化学吸附：聚酰胺色谱法（氢键吸附） 大孔吸附或小孔树脂色谱法（吸附性和分子筛原理相结合）过程三要素：吸附剂（固定相） 洗脱剂/展开剂（流动相） 化学成分吸附剂 1、极性吸附剂 2、非极性吸附剂 洗脱剂或展开剂的选择洗脱规律操作方式和操作技术适用范围ABCD洗脱剂或展开剂的选择分类：正相色谱：固定相为强极性溶剂如水、甲酰胺（HPLC中常用氰基与氨基键合相），流动相为弱极性溶剂如氯仿、正丁醇等。分离极性较大的成分。洗脱时极性小的成分先下。 反相色谱：固定相为弱极性溶剂如石蜡油（HPLC中常用ODS与C8键合相） ，流动相为强极性溶剂如水、甲醇。分离脂溶性成分，洗脱时极性大的成分先下。操作方式：分配柱色谱(特点)、TLC、纸色谱（PC）高速逆流色谱法（HSCCC）：依靠聚四氟乙烯的蛇形分离管的方向性和高速行星式旋转所产生的离心场作用，使无载体支持的固定相（液体）稳定地保留在分离管中，并使样品和流动相单向低速通过固定相，实现混合，分配和分离。优点：无需载体，克服不可逆吸附消耗，样品变性污染吸收峰拖尾等缺点，可定量回收样品，重现性好，分离纯度高，速度快。离子交换色谱法（Ion Exchange Chromatography）原理：利用各种离子性成分对离子交