执业药师《药物分析》章节复习第六章

1、2017执业药师药物剖析章节复习:第六章第六章色谱法色谱法是一种物理或物理化学分别剖析方法。先将混淆物中各组分分别尔后逐一剖析，是剖析化合物有力手段。拥有高敏捷度、高选择性、高效能、剖析速度快、应用范围广等长处。第一节概论一、基来源理色谱过程是物质分子在相对运动的两相(固定相和流动相)间分派均衡的过程，可用分派系数K和容量因子k描绘。分派系数K=Cs/Cm，与组分、固定相和流动相性质和温度相关。容量因子k=Ws/Wm，不单与组分、固定相和流动相性质和温度相关，还与两相体积相关。容量因子不等是色谱分别的先决条件。色谱过程方程：保存时间与分派系数关系tR=t0(1+k)二、分类按分别原理吸附色谱法

2、：固定相为固体分派色谱法：固定相为液体离子互换色谱法：固定相为离子互换树脂分子排阻色谱法：固定相为多孔填料按操作形式：平面色谱、柱色谱、电泳法按两相物态：气相色谱、液相色谱第二节薄层色谱法一、基来源理吸附剂对不一样组分A和B拥有不一样吸附能力，睁开剂也对A和B有不一样溶解、解吸能力，当睁开剂不停睁开，A、B在吸附剂和睁开剂之间连续不停吸附解吸，产生差速迁徙获得分别。二、固定相硅胶：含水量越高，活性越低，吸附力越弱。在105110加热30min，使其活化。硅胶G、硅胶H、硅胶GF254、硅胶HF254的含义氧化铝：碱性、中性和酸性三种。活性与含水量相关聚酰胺：可与酚羟基、羧基、氨基酸形成氢键，选

3、择性高三、操作方法制备：1份固定相与3份水混和涂布，110烘30分钟点样与睁开：点样一般为直径24mm圆点，距底2.0cm;睁开距离一般为1015cm。检视：荧光板在紫外光下检视;一般薄层板用物理方法或显色剂显色。系统合用性试验比移值：Rf=l/l0，为组分迁徙距离与睁开剂迁徙距离之比比移值的范围是0.30.5，可用范围是0.20.8。影响比移值要素：被分别物质的结构和性质。极性较强的组分Rf较小。薄层板性质。吸附剂活性越强，Rf较小。睁开剂性质。极性越强睁开剂Rf值增大睁开剂蒸气饱和程度。分别度：R=2d/(W1+W2)，两相邻斑点中心距离与两斑点均匀宽度的比值四、应用鉴识：比较供试品与比较

4、品溶液的比移值杂质检查：杂质比较品比较法;自己稀释比较法第三节高效液相色谱法一、基来源理基本观点色谱峰参数：峰高或峰面积(用于定量)，峰位(保存值表示，用于定性)，峰宽(用于权衡柱效)保存值：保存时间、死时间、调整保存时间峰宽：标准差、半峰宽、峰宽塔板理论：把组分在两相间的连续转移过程，分解为间歇的在单个塔板中的分派均衡过程理论塔板数n=5.54(tR/Wh/2)2色谱柱的理论塔板数越多，柱效越高;相同长度中塔板高度越小，柱效越高。速率理论：主要说明使色谱峰扩充而降低柱效的要素范氏方程H=A+B/+C为涡流扩散项。采纳合适粒度、均匀的填料并填补均匀可减小涡流扩散为纵向扩散系数。流动相为液体，柱

5、温为室温，B/可忽视不计C为传质阻抗系数。在能完整覆盖载体表面的前提下，应合适减少固定液用量。二、高效液相色谱仪高压输液泵色谱柱：剖析型和制备型进样阀检测器选择性检测器：与待测物浓度、结构相关紫外检测器：敏捷度、重复性及线性范围较好，合用于拥有共轭结构的化合物的检测光二极管阵列检测器：检测原理相同，可同时记录待测物汲取光谱，用于光谱判定和纯度检查荧光检测器：敏捷，用于在流动相条件下拥有荧光或经衍生转变为拥有荧光的化合物的检测电化学检测器：敏捷度高，仅用于在流动相条件下发生氧化-复原反响的化合物质谱检测器：高敏捷度、高选择性、剖析范围广;不合用于小分子化合物，主要用于大分子物质如蛋白质、多肽的检

6、测通用性检测器：质量型检测器示差折光检测器：仅对少量物质如糖类敏捷度较高，受环境温度影响大，实质应用少蒸发光散射检测器：合用于UV检测困难的物质的剖析，响应值与浓度往常不呈线性关系。三、吸附色谱法原理：被分别组分与流动相对吸附剂吸附能力的差别常用固定相和流动相固定相：硅胶、氧化铝、高分子多孔微流动相：烷烃加极性调理剂;极性越强，洗脱能力越强四、分派色谱法原理：被分别组分溶入互不相溶的固定相与流动相，达到均衡后浓度之比(分派系数)的差别正相分派色谱：流动相极性小于固定相极性。极性小的组分先流出，极性大的组分后流出。用于分别极性及中等极性物质反相分派色谱：流动相极性大于固定相极性。极性大的组分先流

7、出，极性小的组分后流出。应用宽泛，用于分别非极性至中等极性物质离子对反相色谱：在流动相中加入有机离子对试剂，用于有机酸、碱、盐的分别离子克制色谱：调整流动相pH，克制组分的解离常用固定相和流动相固定相：化学键合相非极性：十八烷基硅烷键合硅胶极性：氨基和氰基硅烷键合相流动相正相色谱：烷烃加极性调理剂反相色谱：甲醇-水、乙腈-水五、色谱系统合用性试验固定相种类、流动相构成、检测器种类不得改变，其余可合适改变以达到色谱系统合用性试验要求理论塔板数：不得低于各品种项下规定的最小理论塔板数分别度：除还有规定外，分别度应大于1.5重复性：取各品种项下比较品2连续进样5次，除还有规定外，其峰面积丈量值的相对

8、标准误差不大于2.0%4.拖尾因子：除还有规定外，拖尾因子应在0.951.05之间六、应用鉴识：利用保存值进行鉴识。检查内标法加校订因子测定供试品中某个杂质含量外标法测定供试品中某个杂质含量加校订因子的主成分自己比较法不加校订因子的主成分自己比较法面积归一化法：一般不用于微量杂质检查含量测定：外标法，内标法内标物要求：原样品中不含有的组分;保存时间与待测组分邻近，但能完整分别;纯度符合要求。第四节气相色谱法一、基来源理以气体为流动相的色谱法，拥有分别效能高、敏捷度高、样品用量少、剖析速度快等长处，不合用于难挥发和热稳固性差的物质剖析。分类：吸附色谱和分派色谱;气-固色谱随和-液色谱;填补柱色谱

9、和毛细管色谱二、气相色谱仪气源：FID常用载气多为氮气或氦气;TCD多用氦气或氢气为载气;ECD多用氮气或氩气进样方式：溶液直接进样;顶空进样色谱柱和柱温箱：填补柱和毛细管柱检测器火焰离子化检测器FID：敏捷度高、响应快、线性范围宽，最常用。氮磷检测器NPD：合用于含氮、磷元素的药物火焰光度检测器FPD：合用于含磷、硫元素的药物电子捕捉检测器ECD：主要用于含卤素的药物质谱检测器MS：高敏捷度、高专属性，可用于结构确证热导检测器TCD：结构简单、测定范围广、样品不损坏，但敏捷度较低。三、常用固定液与载体固定液烃类：标准非极性固定液硅氧烷类：通用型固定液醇类：氢键型固定液载体：化学惰性的多孔微粒

10、，常用硅藻土毛细管色谱柱开管型：涂壁毛细管柱、载体涂层毛细管柱填补型四、色谱系统合用性试验检测器种类、固定液品种及特别指定的色谱资料不得改变。五、应用标准溶液加入法：配制杂质比较品溶液，精细加入到供试品中，测定杂质含量，再扣除加入比较品溶液量。采纳顶空进样时，该法可除去基质效应的影响。该法与其余方法结果不一致时以本法结果为准。第五节电泳法一、基来源理电泳迁徙速度=E在相同电场强度下，两组分分别程度取决于两者淌度之差。电泳分别后各组分的相对地点由组分的电泳泳动缓和冲液电渗共同决定。影响电泳分别的条件包含：缓冲液的pH值和离子强度：pH直接影响组分的荷电状况，是电泳分别的最重要条件。离子强度太小则缓冲容量不足，区带易扩散;太大则组分挪动慢，发热严重。电场强度：电场强度越大分别越完整，大于20V/cm时发热严重。样品浓度：往常以1%为宜。太浓拖尾，太稀测定结构精细度差。二、各种电泳法纸电泳法醋酸纤维素电泳法琼酯糖凝胶电泳法聚丙烯酰胺凝胶电泳法5.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法三、毛细管电泳法以弹性石英毛细管为分别通道，以高压直流电场为驱动力，依仍旧品中各组分之间淌度和分