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文档简介
1、血栓与止血检验Laboratory Examination of Thrombosis and Hemostasis宣武医院检验科姚 洁止血血栓检验10/7/20221血栓与止血检验Laboratory Examination本节内容基本概念及基本原理血栓与止血的试验室检查血栓与止血试验的临床应用止血血栓检验10/7/20222本节内容基本概念及基本原理止血血栓检验10/3/20222第一节 基本概念及原理出血性疾病的概念(Hemorrhagic Disease)血栓性疾病的概念(Thrombotic Disease)血栓与止血的基本原理止血血栓检验10/7/20223第一节 基本概念及原理出
2、血性疾病的概念(Hemorrhag一、出血性疾病的概念(Hemorrhagic Disease) 是指机体内止血机能发生障碍引起的异常情况,是由血管壁异常、血小板数量和/或功能异常或凝血机能障碍所引起的。其临床表现为皮肤、粘膜或内脏自发性出血或轻微损伤后过多出血。止血血栓检验10/7/20224一、出血性疾病的概念(Hemorrhagic Disease二、血栓性疾病(thrombotic disease) 血栓形成是指血液在活体血管内或心脏内发生的凝固过程,生成的血凝块称血栓;血栓以局部脱落的方式进入血循环的称栓子,由栓子堵塞某一部位的血管,造成栓塞,由此而引发的疾病,通称血栓性疾病 。止血
3、血栓检验10/7/20225二、血栓性疾病(thrombotic disease) 止血血栓检验10/7/20226止血血栓检验10/3/20226三、止血、凝血的基本原理止血血栓检验10/7/20227三、止血、凝血的基本原理止血血栓检验10/3/20227止血血栓检验10/7/20228止血血栓检验10/3/20228血管收缩血流缓慢血小板血栓血管损伤组织因子胶原暴露凝血酶纤维蛋白原纤维蛋白血小板黏附聚集释放内外抗凝系统纤溶系统止血血栓止血止血、凝血原理图止血血栓检验10/7/20229血管收缩血流血小板血管组织胶原凝血酶纤维纤维血小板内外抗凝纤本节内容基本概念及基本原理血栓与止血的试验室
4、检查血栓与止血试验的临床应用止血血栓检验10/7/202210本节内容基本概念及基本原理止血血栓检验10/3/202210第二节 血栓与止血的试验室检查血管壁和血小板的实验室检查凝血系统的实验室检查抗凝系统的实验室检测纤维蛋白溶解系统的检查止血血栓检验10/7/202211第二节 血栓与止血的试验室检查血管壁和血小板的实验室检1.出血时间测定(BT,bleeding time)2.血小板计数(PLT,platelet count)3.血小板平均容积和血小板分布宽度测定4.血小板聚集、粘附试验一、血管壁和血小板的检测试验止血血栓检验10/7/2022121.出血时间测定(BT,bleeding
5、time)一、血管1.出血时间测定(BT,bleeding time)原理:刺破后,血液自然流出、自然停止血小板数量和功能受血管壁的通透性和脆性参考值:超过9min为异常止血血栓检验10/7/2022131.出血时间测定(BT,bleeding time)原理:刺临床意义:BT延长见于血小板明显减少血小板功能异常严重缺乏某些凝血因子血管异常药物干扰止血血栓检验10/7/202214临床意义:BT延长见于血小板明显减少止血血栓检验10/3/22.血小板计数(PLT,platelet count)参考值:(100300)109/L临床意义:血小板减少 100 109/L ;止血血栓检验10/7/2
6、022152.血小板计数(PLT,platelet count)参考值表1 血小板减少的临床意义原因常见疾病生成障碍再生障碍性贫血、放射性损伤、急性白血病等破坏或消耗增多原发性血小板减少性紫癜(ITP)、SLE、上呼吸道感染、输血后血小板减少症、DIC等分布异常脾肿大、血液稀释(输入大量库存血或血浆)等止血血栓检验10/7/202216表1 血小板减少的临床意义原因常见疾病生成障碍再生障碍性贫血止血血栓检验10/7/202217止血血栓检验10/3/202217血小板增多 400 109/L ;A.原发性增多:慢性粒细胞增多症真性红细胞增多症原发性血小板增多症等B.反应性增多:急性感染急性溶血
7、等止血血栓检验10/7/202218血小板增多 400 109/L ;A.原发性增多:B.血小板增多症血小板增多症(Primary hemorrhagic thrombocythemia)是一种原因不明的异常增生伴血小板持续增多为主的骨髓增生性疾病。其临床特点为:多见于40岁以上的成年人;常伴有自发性皮肤粘膜出血,反复发作;有血栓形成;脾肿大;血小板持久性明显增多。病因不明。其与红白血病,慢性粒细胞性白血病,真性红细胞增多症,骨髓纤维化关系密切,合称为“骨髓增生综合征”或“骨髓增生性疾病”(MPD)。其出血机理可能与血小板功能障碍或纤维蛋白溶解增强有关。国内报导男多于女。止血血栓检验10/7/
8、202219血小板增多症血小板增多症(Primary hemorrhag3.血小板平均容积和血小板分布宽度 3.1.血小板平均容积(mean platelet volume,MPV)增加血小板破坏增加、骨髓代偿功能良好者;造血功能抑制解除后,MPV增加是造血功能恢复的首要表现。减低骨髓造血功能不良,血小板生成减少;有半数白血病患者MPV减低;MPV随血小板数而持续下降,是骨髓造血功能衰竭的指标之一。止血血栓检验10/7/2022203.血小板平均容积和血小板分布宽度 3.1.血小板平均容积3.2.血小板分布宽度 Platelet distribution width,PDWPDW:血小板的均一
9、性高。PDW :血小板大小悬殊,急性髓性白血病、巨幼细胞性贫血、慢性粒细胞白血病、脾切除、巨大血小板综合症、血栓性疾病。止血血栓检验10/7/2022213.2.血小板分布宽度 Platelet distribu4.1血小板聚集试验(PAgT, platelet aggregation test)PAgT : 血栓前状态和血栓性疾病,如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊高症、静脉血栓形成、肺梗死、口服避孕药、晚期妊娠、高脂血症等。PAgT :血小板无力症、尿毒症、肝硬化、骨髓增生性疾病、原发性血小板减少性紫癜、急性白血病、服用抗血小板药物等。止血血栓检验10/7/2022224.1血小板
10、聚集试验(PAgT, platelet agg4.2血小板粘附试验(PAdT, platelet adhesion test)增高见于血栓前状态和血栓性疾病。减低见于血小板功能减低的疾病。止血血栓检验10/7/2022234.2血小板粘附试验(PAdT, platelet adh第二节 血栓与止血的试验室检查血管壁和血小板的实验室检查凝血系统的实验室检查抗凝系统的实验室检测纤维蛋白溶解系统的检查止血血栓检验10/7/202224第二节 血栓与止血的试验室检查血管壁和血小板的实验室检二、凝血系统障碍的检查外源性凝血系统(extrinsic coagulation pathway,ECP)内源性凝
11、血系统(intrinsic coagulation pathway,ICP)凝血共同途径(common coagulation pathway,CCP)止血血栓检验10/7/202225二、凝血系统障碍的检查外源性凝血系统止血血栓检验10/3/(一)外源性凝血系统障碍的检查血浆凝血酶原时间(PT,prothrombin time)原理:在被检测血浆中加入Ca2+和组织因子,观察血浆的凝固时间。它是外源性凝血系统较为灵敏和最常用的筛选试验。止血血栓检验10/7/202226(一)外源性凝血系统障碍的检查血浆凝血酶原时间(PT,pro止血血栓检验10/7/202227止血血栓检验10/3/2022
12、27止血血栓检验10/7/202228止血血栓检验10/3/202228止血血栓检验10/7/202229止血血栓检验10/3/202229止血血栓检验10/7/202230止血血栓检验10/3/202230止血血栓检验10/7/202231止血血栓检验10/3/202231血浆凝血酶原时间(PT)参考值:手工法、仪器法PT和正常对照相差3秒以上,为异常。PTR(prothrombin ratio)凝血酶原比值,1.00.05INR(international normal ratio)国际标准化比值,1.0 0.1止血血栓检验10/7/202232血浆凝血酶原时间(PT)参考值:手工法、仪器
13、法止血血栓检验1ISI(international sensivity index)国际敏感度指数止血血栓检验10/7/202233ISI(international sensivity in临床意义1.PT缩短:血液高凝状态(hypercoagulable state, HCS):DIC早期、心肌梗死、脑血栓形成、深静脉血栓形成(deep venous thrombosis,DVT )、多发性骨髓瘤等。止血血栓检验10/7/202234临床意义1.PT缩短:血液高凝状态(hypercoagula?止血血栓检验10/7/202235?止血血栓检验10/3/202235病例1 爱玛克里斯泰欧费尔
14、森(Emma Christeifersen) 2000年10月英国妇女爱玛, 28岁,在观看完奥运会之后从悉尼飞回伦敦,在长达20多小时之后,一下飞机她就昏倒在地,而在被送进医院2小时后不治身亡 。- “经济舱综合症”止血血栓检验10/7/202236病例1 爱玛克里斯泰欧费尔森(Emma Christ病例1最容易患上“经济舱综合症”的是老人,正服用避孕片避孕的妇女,体重过重和刚做过手术的人等。 解决:活动、喝水、服药等。止血血栓检验10/7/202237病例1最容易患上“经济舱综合症”的是老人,正服用避孕片避孕的临床意义2.PT延长:先天性凝血因子(纤维蛋白原)、(凝血酶原)、缺乏。后天性凝
15、血因子缺乏,见于维生素K缺乏、纤溶亢进、DIC、口服抗凝剂等。止血血栓检验10/7/202238临床意义2.PT延长:止血血栓检验10/3/202238风心病换瓣术前预防用药华法林止血血栓检验10/7/202239风心病换瓣术前预防用药华法林止血血栓检验10/3/20223临床意义3.INR是口服抗凝剂的首选监测指标:一般情况下,口服抗凝剂监测,国人INR 2.03.0为宜。世界卫生组织(WHO)规定应用口服抗凝剂时INR的允许范围 见表2止血血栓检验10/7/202240临床意义3.INR是口服抗凝剂的首选监测指标:止血血栓检验1表1 世界卫生组织(WHO)规定应用口服抗凝剂时INR的允许范
16、围 临床适应症INR的允许范围预防静脉血栓形成 非髋部外科手术前1.52.5髋部外科手术前2.03.0深静脉血栓形成2.03.0治疗肺梗塞2.04.0预防动脉血栓形成3.04.0人工瓣膜手术3.04.0止血血栓检验10/7/202241表1 世界卫生组织(WHO)规定应用口服抗凝剂时INR的允许病例2 熊卓为2010年4月28日法院判决:民事责任。 熊卓为,女,48岁,2006年1月接受脊柱手术后病情突然加重,发生术后并发症肺栓塞, 31日抢救无效死亡。 止血血栓检验10/7/202242病例2 熊卓为2010年4月28日止血血栓检验10/3/20病例2对围手术期深静脉血栓形成的认识不足,存在
17、检测、预防及治疗等方面的缺陷,未能早期发现深静脉血栓形成;在出现肺动脉栓塞时,也未能及时发现并有效处理,致使病情进一步加重,同时抢救过程中出现心脏和肝破裂。“如履薄冰,如临深渊,全力以赴,尽善尽美”-凌锋教授 止血血栓检验10/7/202243病例2对围手术期深静脉血栓形成的认识不足,存在检测、预防及治肺梗塞患者,应用低分子肝素、华法林止血血栓检验10/7/202244肺梗塞患者,应用低分子肝素、华法林止血血栓检验10/3/20病例3 :遗传性FVII缺乏症 男,23岁,因血尿一个月于1991.11.20, 入院泌尿外科。 查体:中度贫血貌,无黄染,皮肤粘膜无出血点及紫癜,淋巴结(-),心肺(
18、-),肝脾未及。实验室检查:Hg90g/L,PLT100109,尿RT:WBC少许,RBC满视野,肾功能正常。 因血尿原因不明请血液科会诊。 止血血栓检验10/7/202245病例3 :遗传性FVII缺乏症 男,23岁,因 追问病史,患者出牙,拔牙时牙龈渗血,劳累后关节肿痛。家族中无类似症状患者。其父母为姨表兄妹近亲结婚。 凝血因子检查:FVII:C 0.1%( 103.017.3% ), 对患者家系3代12人进行了调查,先证者母亲,二弟,二妹,表弟虽无出血症状,但FVII分别为0.40,0.15,0.27,0.35。故诊断为先天性FVII缺乏, 经用PCC(凝血酶原复合物浓制剂 ,主要含有凝
19、血因子、 )及输血浆治疗,患者血尿消失。 止血血栓检验10/7/202246 追问病史,患者出牙,拔牙时牙龈渗血,劳累后关(二)内源性凝血系统障碍的检查1.全血凝固时间测定(CT,clotting time)原理:静脉血放入试管中,观察自采血开始至血液凝固所需时间。反映内源性凝血系统的凝血试验。参考值:试管法:412min;硅管法:1.532min止血血栓检验10/7/202247(二)内源性凝血系统障碍的检查1.全血凝固时间测定(CT,c(二)内源性凝血系统障碍的检查2.活化部分凝血活酶时间测定(APTT, activated partial thromboplastin time)原理:在
20、被检测血浆中加入Ca2+和APTT试剂,观察血浆的凝固时间。它是内源性凝血系统较为灵敏和最常用的筛选试验。参考值:和正常对照相差10秒以上。止血血栓检验10/7/202248(二)内源性凝血系统障碍的检查2.活化部分凝血活酶时间测定(活化部分凝血活酶时间APTT临床意义:1.APTT缩短:血栓性疾病(thrombotic disease)和血栓前状态(prethrombotic state, PTS),灵敏度、特异性较差。止血血栓检验10/7/202249活化部分凝血活酶时间APTT临床意义:止血血栓检验10/3/2.APTT延长:(1)内源性凝血因子明显减少,、等因子缺乏:血友病古典式血友病
21、,即血友病A,缺乏第8因子,即抗血友病球蛋白(AHG)。这是一种遗传性疾病,都发生在男性,由女性传递;即患病的父亲将疾病基因传给了健康的女儿,再由女儿传给她所生的男孩,止血血栓检验10/7/2022502.APTT延长:(1)内源性凝血因子明显减少,、等病例4:血友病 HA(重型) 男9岁,自幼反复膝关节疼痛肿胀,1周前运动后,右膝关节疼痛难忍,肿胀。 X示膝关节骨膜囊肿行骨科手术,术中出血不止。 其舅舅有类似病史。 BPC 18.4万 BT 4 PT 13” APTT 90” Fib 3g/l TT 18” FVIII 1% (103.025.7%) FIX 84% FXI 100% 止血血
22、栓检验10/7/202251病例4:血友病 HA(重型) 男9维多利亚女王止血血栓检验10/7/202252维多利亚女王止血血栓检验10/3/202252止血血栓检验10/7/202253止血血栓检验10/3/202253Christmas病,即血友病B,缺乏第9因子,即血浆凝血致活酶(PTC)。这也是一种遗传性疾病,女性也可得病。血友病C,缺乏第11因子,即血浆激血致活酶光质(PTA),也是遗传性疾病。止血血栓检验10/7/202254Christmas病,即血友病B,缺乏第9因子,即血浆凝血病例5 小惠,女止血血栓检验10/7/202255病例5 小惠,女止血血栓检验10/3/202255
23、2.APTT延长:(2)严重肝损害;(3)纤维蛋白原严重减少;(4)应用肝素等抗凝药: APTT延长到正常的1.52.5倍;(5)DIC时。止血血栓检验10/7/2022562.APTT延长:(2)严重肝损害;止血血栓检验10/3/2左下肢浅动脉血栓,口服华法林,静脉肝素治疗止血血栓检验10/7/202257左下肢浅动脉血栓,口服华法林,静脉肝素治疗止血血栓检验10/凝血共同途径试验检测纤维蛋白原(Fg,fibrinogen)测定原理:受检血浆中加入一定量的凝血酶,后者使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白,通过比浊原理计算Fg的含量。参考值:WHO推荐Clauss法:24g/L止血血栓检验10/
24、7/202258凝血共同途径试验检测纤维蛋白原(Fg,fibrinogen纤维蛋白原(Fg)临床意义:1.增高:糖尿病、急性心肌梗塞、急性感染、大手术后、血栓前状态等。2.减低:DIC、原发性纤溶症、重症肝炎、肝硬化等。止血血栓检验10/7/202259纤维蛋白原(Fg)临床意义:止血血栓检验10/3/20225病例3:先天性低(无) 血症 止血血栓检验10/7/202260病例3:先天性低(无) 血症 止血血栓检验10/3/202股骨粗隆间骨折,术前筛查止血血栓检验10/7/202261股骨粗隆间骨折,术前筛查止血血栓检验10/3/202261三、抗凝系统的实验室检测抗凝血酶-(AT-:A,
25、 antithrombin activity)原理:在反应体系中加入过量的凝血酶,后者与血浆中的AT-形成1:1复合物,剩余凝血酶作用于合成的凝血酶底物S-2238,释放出显色基团对硝基苯胺PNA,显色反应的深浅与剩余凝血酶的量呈正相关,而与AT-的活性呈负相关。参考值:发色底物法:108.55.3%止血血栓检验10/7/202262三、抗凝系统的实验室检测抗凝血酶-(AT-:A, ant临床意义1.增高:血友病、白血病、和再生障碍性贫血等的急性出血期以及口服抗凝药治疗过程中。2.减低:先天性和获得性AT- 缺乏症,后者见于血栓前状态、血栓性疾病、DIC、肝脏疾病。止血血栓检验10/7/202
26、263临床意义1.增高:血友病、白血病、和再生障碍性贫血等的急性出四、纤维蛋白溶解系统的检查1.血浆D-二聚体测定(DD,D-dimer)2.纤维蛋白(原)降解产物( FDP )3.凝血酶时间测定(TT,thrombin time)4.血浆纤溶酶原活性(PLG:A)止血血栓检验10/7/202264四、纤维蛋白溶解系统的检查1.血浆D-二聚体测定(DD,D-1.血浆D-二聚体测定(DD,D-dimer)鉴别:继发性纤溶症(如DIC)/+; 原发性纤溶症-;排除深静脉血栓(DVT)和肺栓塞(PE): DD-溶栓治疗的监测指标之一。止血血栓检验10/7/2022651.血浆D-二聚体测定(DD,D
27、-dimer)鉴别:继发性纤2.纤维蛋白(原)降解产物(FDP,fibrin(ogen) degradation products)+/:原发性纤溶症以及继发性纤溶症,如DIC、恶性肿瘤、急性早幼粒细胞白血病、肺梗死、深静脉血栓形成、肾脏疾病、肝脏疾病、器官移植的排斥反应、溶栓治疗等。止血血栓检验10/7/2022662.纤维蛋白(原)降解产物(FDP,fibrin(ogen3.凝血酶时间测定(TT,thrombin time)参考值:和正常对照相差3秒以上。临床意义:TT延长见于低(无)纤维蛋白血症和异常纤维蛋白血症;血中纤维蛋白(原)降解产物(FDPs)增高;血中有肝素或类肝素物质存在(如
28、肝素治疗中,SLE和肝脏疾病等)。TT缩短无临床意义。以上(1,2,3)检查主要用于DIC诊断。止血血栓检验10/7/2022673.凝血酶时间测定(TT,thrombin time)参考值怀疑DIC止血血栓检验10/7/202268怀疑DIC止血血栓检验10/3/202268本节内容基本概念及基本原理血栓与止血的试验室检查血栓与止血试验的临床应用止血血栓检验10/7/202269本节内容基本概念及基本原理止血血栓检验10/3/202269第三节 血栓与止血试验的临床应用止血血栓检验10/7/202270第三节 血栓与止血试验的临床应用止血血栓检验10/3/一、血栓前状态的组合试验 血栓前状态
29、(PTS, prethrombotic state)是由多种病因引起止血、凝血和抗凝系统失调的病理过程。其血液处于高凝状态,具有易导致血栓形成的多种血液学变化。 止血血栓检验10/7/202271一、血栓前状态的组合试验 血栓前状态(PT常用筛选试验及PTS时改变1.PT和APTT缩短 2.PAgT增高 3.Fg增高止血血栓检验10/7/202272常用筛选试验及PTS时改变止血血栓检验10/3/202272二、出血性疾病的筛查试验止血血栓检验10/7/202273二、出血性疾病的筛查试验止血血栓检验10/3/202273病例6:血管性血友病(VWD) 女性 26岁 月经30天未净。有鼻衄,月
30、经量多史。 PE: 轻度贫血貌,皮肤散在新鲜出血点与陈旧性紫斑 血常规:Hb 82g/L , WBC 6.8109,PLT 96109/L BT 20( 9min );PTT 44.7;PT 11.7;TT 15.2 血小板聚集:ADP(2um) 53.4, 53.2, 59.8 Risto(1.25g/L) 12.7, 10.1, 15.3 (73.817.0, 87.511.4 , 87.511.4 ) vWF:Ag 21.7% (70150%,ELISA法), 血浆中存在各种分子量的多聚物。 止血血栓检验10/7/202274病例6:血管性血友病(VWD) 女性 26岁 月三、抗凝治疗的
31、监测指标1.肝素治疗:APTT:测定值维持在正常对照的1.52.5倍。PLT计数:50 109/L ,需暂停用药,并查找血小板减少的原因。止血血栓检验10/7/202275三、抗凝治疗的监测指标1.肝素治疗:止血血栓检验10/3/22.口服香豆素类抗凝药:PT,中国人INR值维持在2.02.5之间为宜,一般不超过3.0, 1.5示抗凝无效。止血血栓检验10/7/2022762.口服香豆素类抗凝药:PT,中国人INR值维持在2.023.溶栓治疗的监测溶栓治疗的主要并发症是出血,轻度出血的发生率为530%,重度出血为12%。监测指标:Fg降至1.21.5g/L, TT是正常对照值的1.52.5倍,FDPs在300400mg/L最为适宜。止血血栓检验10/7/2022773.溶栓治疗的监测溶栓治疗的主要并发症是出血,轻度出血的发生4.抗血小板药物治疗的监测抗血小板药物:阿司匹林(aspirin)、氯吡格雷(clopidogrel)、阿昔单抗(abciximab)监测项目:BT维持在治疗前12倍,PLT维持在(5060) 109/L,PAgT( aspirin 要用花
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