九节茶高效液相色谱指纹图谱分离条件的优化

1、九节茶高效液相色谱指纹图谱分散条件的优化杨方明李卫民高英李永平【摘要】目的优化九节茶HPL指纹图谱分散条件。要领利用色谱柱Krasil18(2504.6，5)，活动相为甲醇-0.2%磷酸溶液，柱温为25，流速为0.7l/in，检测波长为340n，观察九节茶的最正确梯度洗脱条件。结果经优化的分散条件为：035in，甲醇由20%线性增至40%；3565in甲醇由40%增至60%，6575in甲醇由60%减至20%，7578in甲醇保持20%，可使重要身分到达较好的分散。结论通过对九节茶HPL指纹图谱分散条件的优化，更有利于操纵九节茶药材的质量。【关键词】九节茶高效液相色谱指纹图谱Abstrat:b

2、jetiveTptiizetheseparatinnditinsffingerprintfrSarandraGlabrusHerbbyHighPerfraneLiquidhratgraphyandlaythefundatinfstudiesnitsqualityntrl.ethdsThesaplesereseparatedbyalineargradientelutinnKrasil18(2504.6，5)asiththeethanl-0.2%phsphriaidslutinasbilephase,thedetetinavelenythas340n,lunteperature25andthefl

3、rateas0.7l/in.ResultsDuringthelineargradientelutinprgra,thevluefratinfethanlinbilephasehangedasflls:035in,fr20%t40%;3565in,fr40%t60%;6575in,fr60%t20%;7578in,20%.Theseparatinnditinsahievedgdresultintheseparatinfessentialpnents.nlusinTheethdisrebenefiialtntrlqualityfGlabrusSarandraHerb.Keyrds:Glabruss

4、arandraGlabrusHerb;HPL;Fingerprintseparatinnditinfhratgra九节茶系金粟兰科植物草珊瑚SarandraglabraThunb.Nakai的枯燥全草，别名肿节风、接骨金粟兰、草珊瑚、接骨木，为多年生常绿草本或亚灌木。九节茶味苦辛、性平、有小毒，有祛风通络、活血散淤、止血止痛、接骨续筋之服从1，临床应用普及，特殊是对呼吸体系、消化体系的炎症性疾患具有较高疗效，还用于骨伤科疾病及种种癌症。?中国药典?2022年版部对九节茶药材的质量操纵是接纳HPL测定此中异嗪皮啶的含量2，但是单一指标性身分的含量测定每每难以反响中药团体质量，不克不及较全面反响中

5、药品格。有文献报道过九节茶药材的指纹图谱的研究3，4，在现实应用中创造上述指纹图谱的猎取要领重复性差。本文拟对九节茶的液相色谱指纹图谱分散条件举行优化，从而为中药九节茶质量操纵提供更好的要领。1质料与仪器1.1质料九节茶药材经广州中医药大学新药开拓与研究中央高英主任中药师断定为金粟兰科植物草珊瑚SarandraglabraThunb.Nakai的全草；甲醇为色谱纯；水为液相用水；其他试剂均为阐发纯。1.2仪器DinexSuit高效液相色谱仪(P680HPLPup,ASI-100AutatedSapledInjetr,PDA-100PhtdideArrayDeteter,UVD170U,STH5

6、85lunven)，hrelen数据处置惩罚体系,Krasil18色谱柱(2504.6，5)；超声波洗濯器(SB-5200，中国船舶产业总公司第七研究院第七二六研究所)；R-114型旋转蒸发仪(BuHI，瑞士)。2要领与结果2.2梯度洗脱条件的优化图2b条件：040in,甲醇由15%线性增至35%；4060in甲醇由35%增至50%，6070in甲醇由50%减至15%，7072in甲醇保持15%，进样量为10l，柱温为25，流速为0.7l/in。色谱图见图2b可以看出，色谱峰的漫衍有所改进，但峰与峰的分散状态不抱负。图1优化条件的HPL图略图2优化条件的HPL图略图3优化条件的HPL图略2.3

7、要领学观察为观察阐发要领的可靠性，对其不变性、仪器细密度、实行要领重现性举行观察。图4差异产地药材的指纹图谱略3讨论3.1活动相的选择九节茶中的化学身分有倍半萜及其苷类、黄酮及其苷类、有机酸类、香豆素类，这些身分多具有必然的极性和酸性5。本实行比力了乙腈-0.1%磷酸、乙腈-0.2%磷酸、乙腈-0.1%醋酸、乙腈-1%醋酸、甲醇-0.1%磷酸、甲醇-0.2%磷酸、甲醇-0.1%醋酸、甲醇-1%醋酸等活动相的分散结果。结果同一条件下甲醇较乙腈对九节茶提取物的分散结果较佳，0.2%磷酸溶液较其他酸溶液对九节茶提取物的分散结果较佳，因此选择甲醇和0.2%磷酸作为活动相单位。3.2柱温的选择在实行历程

8、中，创造柱温对分散结果影响较大，同一条件下观察了20，25，30，35柱温对九节茶提取物的分散结果的影响，结果25较佳。3.4检测波长的选择选择340n作为检测波长3。在举行等度洗脱时，假设溶剂的洗脱本领过强，那么不克不及把重要身分的色谱峰分开；溶剂的洗脱本领弱时，固然可以或许分开，但保存时间太长、峰形不抱负。为了得到分散度好、保存时间符合、峰形抱负的色谱峰，只有选用梯度洗脱。液相色谱条件中的柱温、流速对色谱峰的影响不大，因此应重要调解活动相的构成、溶剂的比例及梯度陡度，从而使各色谱峰之间到达较好的分散。观察活动相的构成时，在反相色谱中,甲醇的洗脱强度比乙腈要小，因此甲醇酸水体系色谱峰的峰形和分散度都要好于乙腈酸水体系。同时磷酸比醋酸的酸性强，对药材中的酸性身分电离的按捺性强，选用磷酸可以确保色谱峰不拖尾。经实行，优化条件得出的九节茶液相色谱图的分散度、漫衍匀称性及峰形好，可用来评价差异产地、品种的九节茶的指纹图谱的质量差异。【参考文献】1江苏新医学院.中药大辞典，上册.上海：上海科学技能出书社，1986：42.2国度药典委员会.中国药典，部S.北京：化学产业出书社，2022.154.3吴永江,侯晓蓉,程翼宇.肿节风H