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文档简介

1、 葡萄糖5g硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠4g煌绿0.025g柠檬酸铋铵2g亚硫酸钠6g琼脂18口20g蒸馏水1000mLpH7.5制法:1将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中。2将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解。3将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至804将以上三口合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀。冷至50口55口,倾注平皿。注:此培养基不需高压灭菌。制备过程不宜过分加热.以免降低其选择性。应在临用前一天制备,贮存于室温暗处。超过48h不宜使用。44DHL琼脂成分:蛋白胨20g牛肉膏3g乳糖10g蔗糖10g去氧胆酸钠1g硫代硫酸钠2.3

2、g柠檬酸钠1g柠檬酸铁铵1g中性红0.03g琼脂18口20g蒸馏水1000mLpH7.3制法:将口中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中,校正pH。再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50口55口,倾注平板。45HE琼脂成分:口胨12g牛肉膏3g乳糖12g蔗糖12g水杨素2g胆盐20g氯化钠5g琼脂18口20g蒸馏水1000mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mLAndrade指示剂20mL甲液20mL乙液20mLpH7.5制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL蒸馏水内,加DOODOO甲液和乙液于基

3、础液内,校正pH。再加入指示剂,并与琼脂液合并,口冷至50口55,倾注平板。注:此培养基不可高压灭菌。甲液的配制TOC o 1-5 h z硫代硫酸钠34g柠檬酸铁铵4g蒸馏水100mL乙液的配制去氧胆酸钠10g蒸馏水100mLAndrade指示剂酸性复红0.5g HYPERLINK l bookmark182 1mol/L氢氧化钠溶液16mL蒸馏水100mL将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液。数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1口2mL。46SS琼脂基础培养基:TOC o 1-5 h z牛肉膏5g胨5g三号胆盐3.5g琼脂17g蒸馏水1000mL再将两口混合,121口高压灭菌15mi

4、n,保存备用。完全培养基:基础培养基100mL乳糖10g柠檬酸钠8.5g硫代硫酸钠8.5g10%柠檬酸铁溶液10mL1%中性红溶液2.5mL0.1%煌绿溶液0.33mL加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板。注:制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用。煌口溶液配好后应在10d以内使用。可以购用SS琼脂的干燥培养基。47WS琼脂成分:胨12g牛肉膏3g氯化钠5g乳糖12g蔗糖12g十二烷基硫酸钠2g琼脂15gAndrade指示剂20mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mL甲液20mL蒸馏水1000mLpH7.0

5、制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正注平板应呈草绿色。注:供沙门氏菌分离用。Andrade指示剂和甲液的配制均见HE琼脂。pH后加入指示剂和甲液,倾48麦康凯琼脂成分:蛋白胨口胨猪胆盐(或牛、羊胆盐)氯化钠琼脂蒸馏水乳糖0.01%结晶紫水溶液0.5%中性红水溶液制法:1将蛋白胨、口、胆盐和氯化钠溶解于加热溶解。将两液合并,分装于烧瓶内,2临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至摇匀后倾注平板。注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。17g3g5g5g17g1000mL10g10mL5mL400mL蒸馏水中,校正pH7.2。将琼脂加入121高压灭菌15min备用。50口5

6、5时,加入结晶口和中性红水溶液,49伊红美蓝琼脂(EMB)成分:蛋白胨乳糖10g10g600mL磷酸氢二钾2g琼脂17g2%伊红丫溶液20mL0.65%美蓝溶液10mL蒸馏水1000mLpH7.1制法:将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121口高压灭菌15min备用。成分:临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,口至50口55,加入口红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板。50三糖铁琼脂(TSI)蛋白胨20g牛肉膏5g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5gFe(NH4)2(SO4)2.6H2O0.2g硫代硫酸钠0.2g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼

7、脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入高压灭菌成分:0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。121口15min。放置高层斜面备用。51三糖铁琼脂(换用方法)蛋白胨15g5g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼121脂。加入0.2%酚红水溶液12.5mL,121高压灭菌15min,放置高层斜面备用。52克氏双糖铁琼脂(

8、KI)上层培养基成分TOC o 1-5 h z血消化汤(pH7.6)500mL琼脂6.5g硫代硫酸钠0.1g硫酸亚铁铵0.1g乳糖5g0.2%酚红溶液5mL下层培养基成分 HYPERLINK l bookmark274 血消化汤(pH7.6)500mL琼脂2g葡萄糖1g0.2%酚红溶液5mL制法:1取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别加入琼脂,加热溶解。21取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别加入琼脂,加热溶解。2分别加入其他各种成分。将上层培养基分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌12mmx100mm试管内,每管约2mL。115高压灭菌10min。3将上层培养基放在56水浴箱内保温;将下

9、层培养基直立放在室温内,使其凝固。4当下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约放成斜面。53克氏双糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨20g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g葡萄糖1g氯化钠5g柠檬酸铁铵0.5g硫代硫酸钠0.5g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层。高压灭菌15min。放置高层斜面备用。1.5mL,12154葡萄糖半固体发酵管成分:蛋白胨1g牛肉膏0.3g氯化钠0.

10、5g1.6%溴甲酚紫酒精溶液0.1mL葡萄糖1g琼脂0.3g蒸馏水100mLpH7.4制法:将蛋白胨、牛肉膏和氯化钠加入于水中,校正pH后加入琼脂加热溶解,再加入指示剂和葡萄糖,分装小试管,灭菌12115min。0.2g0.5g5g1.2mLpH7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。0.2g0.5g5g1.2mLpH7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121口15min,将两口混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d内发酵。555%乳糖发酵管成分:蛋

11、白胨氯化钠乳糖2%溴麝香草酚蓝水溶液蒸馏水100mL蒸馏水56CAYE培养基Honda氏产毒肉汤。Honda氏产毒肉汤。57Honda氏产毒肉汤成分:制法:水解酪蛋白20g酵母浸膏粉10g氯化钠2.5g磷酸氢二钠15g葡萄糖5g微量元素0.5mL蒸馏水1000mLpH7.5溶解后校正pH,高压灭菌121口15min,待冷至45口50时,加入林可霉素溶液,每毫升培养基内含微量元素配方90Ng。:硫酸镁5g,氯化铁0.5g,氯化钻2g,蒸馏水100mL成分:麦芽糖58Elek氏培养基(毒素测定用20g3gTOC o 1-5 h z乳糖0.7g氯化钠5g琼脂15g40%氢氧化钠溶液1.5mL蒸馏水1

12、000mLpH7.8制法:用500mL蒸馏水溶解琼脂以外的成分,煮沸,并用滤纸过滤。用1mo1/L氢氧化钠校正pH。用另外500mL蒸馏水加热溶解琼脂。将两液混合,分装试管10mL或20mL。121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂倾注平板。59氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基甲液:胰蛋白胨10g蒸馏水1000mL乙液:磷酸氢二钠甲液:胰蛋白胨10g蒸馏水1000mL乙液:磷酸氢二钠9.5g蒸馏水1000mL丙液:氯化镁(MgCl2.6H2O)40g蒸馏水400mL以上分别在121灭菌15min。丁液:孔雀绿0.2g蒸馏水100mL戊液:羧苄青霉素1mg/mL制法:取甲液620mL、乙液160

13、mL、口液212mL混合,再加入丁液6.4mL和戊液成分:1000mL培养基。分装灭菌烧瓶,每瓶2.4mL,即为100mL,或灭菌试管10mL。成分:胰蛋白胨蒸馏水pH7.0制法:将上述成分溶解,校正成分:胰蛋白胨蒸馏水pH7.0制法:将上述成分溶解,校正10g1000mLpH。分装试管,121口高压灭菌15min。61Rustigian氏尿素培养液成分:TOC o 1-5 h z尿素20.0g酵母浸膏0.1g磷酸二氢钾(KH2PO4)0.091g磷酸氢二钠(Na2HPO4)0.095g酚红0.01g蒸馏水1000mL制法:将上述成分:于蒸馏水中溶解,校正pH为6.80.2。不要加热,过滤除菌

14、,无菌分装于灭菌小试管中,每管为约3mL。用途:尿素酶试验用。6262氯化钠结晶紫增菌液20g40g5mL1000mL20g40g5mL1000mL蛋白胨氯化钠0.01%结晶紫溶液蒸馏水pH9.0制法:除结晶紫外,其他按上述成分:配好,加热溶解。约加加热煮沸,过滤。再加入结晶紫溶液,混合后分装试管。30%氢氧化钾溶液4.5mL,校正121高压灭菌15min。pH。63氯化钠蔗糖琼脂成分:蛋白胨牛肉膏氯化钠蔗糖琼脂0.2%溴麝香草酚蓝溶液蒸馏水pH7.8制法:将牛肉膏、蛋白胨及氯化钠溶解于蒸馏水中,校正指示剂,分装烧瓶100mL。121高压灭菌加热溶化并冷至50,倾注平板。10g10g50g10

15、g18g20mL1000mLpH。加入琼脂,加热溶解,过滤。加入15min备用。临用前在100mL培养基内加入蔗糖1g,64嗜盐菌选择性琼脂成分:蛋白胨氯化钠琼脂0.01%结晶紫溶液蒸馏水pH8.7制法:除结晶紫和琼脂外,其他按上述成分配好,校正溶液,分装烧瓶,每瓶100mL。20g40g17g5mL1000mLpH。加入琼脂,加热溶解。再加入结晶紫653.5%氯化钠三糖铁琼脂成分:三糖铁琼脂氯化钠制法:按前面三糖铁琼脂,再加入氯化钠备用。1000mL30g30g,分装试管,121口高压灭菌15min。放置高层斜面66氯化钠血琼脂成分:TOC o 1-5 h z酵母膏3g蛋白胨10g氯化钠70

16、g磷酸氢二钠5g甘露醇10g结晶紫0.001g琼脂15g蒸馏水1000mL制法:调pH8.0加热30min(不必高压),待冷至45左右时,加入新鲜人或兔血(5%口10%)混合均匀,倾注平皿。673.5%氯化钠生化试验培养基成分及制法:根据所需糖的种类按3.2配制。只是将氯化钠含量改为3.5%,pH为7.7。68改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)成分:磷酸氢二钠(Na2HPO48.23g磷酸二氢钠(NaH2Po4-H2O)1.2g氯化钠(NaCl)5.0g三号胆盐1.5g山梨醇20g制法:将磷酸盐及氯化钠溶于蒸馏水中,再加入三号胆盐及山梨醇,溶解后校正试管,于121口高压灭菌15min

17、,备用。69CIN1培养基pH为7.6,分装基础培养基胰胨酵母浸膏甘露醇氯化钠去氧胆酸钠硫酸镁(MgSO4.7H2O)琼脂蒸馏水pH7.50.1将基础培养基高压灭菌。Irgasan以95%的乙醇作溶剂,溶解二苯醚,配成混匀。20.0g2.0g20.0g1.0g2.0g0.01g12.0g950mL0.4%的溶液,待基础液冷至80时,加入1mL冷至50时,加入:中性红(3mg/mL)10.0mL结晶紫(0.1mg/mL)10.0mL头孢菌素(1.5mg/mL)10.0mL新生霉素(0.25mg/mL)10.0mL最后不断搅拌着加入10.0mL的10%氯化锶,倒平皿。盐性试验培养基70嗜成分:蛋白

18、胨2g氯化钠按不同量加蒸馏水100mLpH7.7制法:配制2%蛋白胨水,校正pH,共配制5瓶,每瓶100mL。每瓶分别加入不同量的氯化钠:(1)00;(2)3g;(3)7g;(4)9g;(5)11g。口溶解后分装试管。121高压灭菌15min。71成分:蛋白胨15.0g氯化钠5.0g乳糖10.0g草酸钠2.0g去氧胆酸钠6.0g三号胆盐5.0g丙酮酸钠2.0g孟加拉红40mg水解酪蛋白5.0g琼脂17.0g蒸馏水1000mL制法:将上述成分:混合,于121高压灭菌改良Y培养基15min,待冷至45左右时,倾注平皿。最终pH7.40.1。72成分:蛋白胨20g牛肉膏3g酵母膏3g山梨醇20g葡萄

19、糖1g氯化钠5g柠檬酸铁铵0.5g硫代硫酸钠0.5g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正改良克氏双糖pH。加入0.02%酚红水溶液12.5mL,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层。121高压灭菌15min,放置高层斜面口用。73快速硫化氢(H2S)试验琼脂制法:A液:布氏杆菌肉汤无水磷酸氢二钠无水磷酸二氢钾琼脂加热溶解,高压灭菌,氢钠,D73快速硫化氢(H2S)试验琼脂制法:A液:布氏杆菌肉汤无水磷酸氢二钠无水磷酸二氢钾琼脂加热溶解,高压灭菌,氢钠,D液10%丙酮酸钠。上述B、C、D溶液均新鲜配制,无菌调pH到

20、7.3,无菌分装,每管成分:DNA植物蛋白胨胰蛋白胨氯化钠琼脂(1.5%)蒸馏水pH7.3970mL1.18g0.23g2g121口15min。加入B液用除菌滤膜过滤。3mL,塞紧备用。74DNA酶甲基绿琼脂2.0g5.0g15.0g5.0g15.0g1000mL10%硫酸亚铁(含7H夕),C液10%偏亚硫酸将此除菌溶液各1mL混合后再入A液中,(DTA)制法:称取各成分后,加水徐徐加热,避免形成饼溶性丝状物,甲基绿配制(MG):配制止。过滤除菌,置4保存。0.5%的甲基绿水溶液。用等体积氯仿作12115min高压。5口7次抽提,直到口仿口无色为每100mL灭菌溶化的DTA培养基加1mL(MG

21、)染料液,甲基口最终浓度为0.005%。75CaryBlair氏运送培养基成分:TOC o 1-5 h z硫乙醇酸钠1.5g磷酸氢二钠1.1g氯化钠5g琼脂5g蒸馏水1000mL1%氯化钙溶液9mLpH8.4制法:除氯化钙外,其他均按上述成分配制,加热溶解。冷至50,加入氯化钙溶液,校正pH到8.4。分装试管,每支5mL,或注入具有胶塞的瓶内。121口高压灭菌15min。用途:作空肠弯曲杆菌、霍乱弧菌、沙门氏菌、志贺氏菌采样时用。TOC o 1-5 h z注:在该采样管中的标本,只能保存72h。76Skirrow氏培养基成分:蛋白胨15.0g胰蛋白胨(tryptone)2.5g酵母浸膏5.0g

22、氯化钠5.0g琼脂15.0g蒸馏水1000.0mL甲氧苄氨嘧啶(trimethoprim,TMP)5.0mg万古霉素(vancomycin)10.0mg多粘菌素B(polymyxin)2500.0国际单位冻溶马血70.0mL制法:1除甲氧苄氨嘧啶、抗生素和冻溶马血外,121口高压灭菌15min,备用。口即血琼脂基础培养基。21除甲氧苄氨嘧啶、抗生素和冻溶马血外,121口高压灭菌15min,备用。口即血琼脂基础培养基。2临用前,加热溶解基础培养基,冷至血7mL及TMP、抗生素混合液血7mL及TMP、抗生素混合液用途:分离空肠弯曲菌之用。说明:1TMP、抗生素混合液配法:灭菌蒸馏水中,然后再加入0

23、.5mL,摇匀,倾注无菌平板。100mL先配成乳酸TMP溶液,以乳酸62mg(约1口2口)混合于100mLTMP溶液。B,摇匀后,即成TMP抗生素混合液。):为广谱抗菌剂,其抗菌谱与磺胺嘧啶B,摇匀后,即成TMP抗生素混合液。):为广谱抗菌剂,其抗菌谱与磺胺嘧啶2TMP、抗生素的作用TMP(甲氧苄氨嘧啶,又称磺胺增效剂或抗菌增效剂相似,但对链球菌及大多数革兰氏阴性菌的抗菌作用较磺胺嘧啶强,与抗生素合用有协同作用,能增加杀菌和抑菌作用。万古霉素:是窄谱抗菌素,仅对革兰氏阳性菌有较强的杀菌和抑菌作用,如溶血性链球菌、草绿色链球菌、肠球菌、金黄色葡萄球菌等。多粘菌素B:仅限于对口兰氏阴性菌,如对产气

24、杆菌、流感杆菌、痢疾杆菌等。TMP和抗生素称量必须正确,操作必须慎重小心。77TTC琼脂成分:胰蛋白胨(tryptone)17.0g大豆胨3.0g葡萄糖6.0g氯化钠2.5g硫乙醇酸钠0.5g琼脂15.0gL氨酸口盐酸(L口Cys-HCl)0.25g亚硫酸钠0.1g1%氯化血红素溶液0.5mL1%维生素K1溶液0.1mL2,3,5氯化三苯四氮唑(TTC)0.4g蒸馏水1000mL制法:1除1%氯化血红素、维生素K1和TTC外,将其他成分:混合,加热溶解。L氨酸先用少量氢氧化钠溶解后加入,校正pH7.2,然后加入预先配成的氯化血红素和维生素K1,充分摇匀。装瓶,每瓶100mL。121高压灭菌15

25、min,备用。平板。2临用前,溶解基础琼脂,每100mL基础培养基中,加入TTC40mg,充分摇口,倾注无菌3说明将可疑空肠弯曲菌接种于平板上,在微氧环境下,于43培养48h。阳性菌落呈紫红色,空肠弯曲菌呈阳性反应;胎儿和肠道弯曲菌呈阴性反应。1%氯化血红素溶液和1%维生素K1溶液配法:称取氯化血红素1g和1mol/L氢氧化钠5mL混合。再用蒸馏水稀释到100mL,即为1%氯化血红素溶液。成分:制法:右,说明:培养成分:制法:管。于成分:可保存称取维生素K11g和纯乙醇99mL混合,或用维生素78甘氨酸培养基K1针剂。布氏(Brucella)肉汤琼脂甘氨酸(glycine)(又称氨基乙酸将以上

26、成分混合,加热溶解,校正aminoaceticacid)pH7.00.2,分装1000mL1.6g10.0g13mmx100mm试管,每支约4mL左121高压灭菌15min,备用。空肠弯曲菌对甘氨酸有耐受性,穿刺接种于甘氨酸培养基中,置于微需氧环境下,在48h。在培养基表面出现云雾状现象为阳性,胎儿弯曲菌口肠亚种为阳性结果。79改良磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠磷酸二氢钠氯化钠蒸馏水山梨醇胆盐43(Na2HPO4)(NaH2PO4.H2O)(NaCl)8.23g1.20g5.0g1000.0mL将磷酸盐及氯化钠溶于蒸馏水中,再加入山梨醇及胆盐,溶解后,校正10.0g1.5gpH为7.6,分装试121高

27、压灭菌15min,备用。80氯化镁孔雀绿肉汤1%胰胨水(高压灭菌)156mL1/15mo1/L磷酸氢二钠(Na2HpO4)溶液(ODDO)40mL40%(m/V)氯化镁(MgCl2-6H2O)水溶液(100煮沸数分钟)53mL0.2%孔雀绿溶液将上述几种溶液按列出的容量混合,即成氯化镁孔雀绿肉汤。1.6mL分装试管,制法:10个月。如若配氯化镁孔雀绿羧节青霉素肉汤,除上述几种溶液外,再配制羧节青霉素每管10mL,于4(carpenicillin)溶液(溶解1mg于1mL水中),将此溶液与其他溶液混合,即成。81胰酪胨大豆肉汤成分:胰酪胨(或胰蛋白胨17g植物蛋白胨(或大豆蛋白胨)氯化钠磷酸氢二

28、钾葡萄糖蒸馏水制法:将上述成分混合,加热并轻轻搅拌并溶解,82Baird3g100g2.5g2.5g1000mL分装后,121口高压灭菌15min,最终pH7.30.2。Parker氏培养基成分:胰蛋白胨10g牛肉膏5g酵母膏1g丙酮酸钠10g甘氨酸12g氯化锂(LiCKHQ)5g琼脂20g蒸馏水950mLPH7.5增菌剂的配法:30%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%口蹄酸钾溶液10mL混合,保存于冰箱内。制法:将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解。口至25,校正pH。分装每瓶95mL,121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂,冷至50口,每95mL加入预热至501的卵黄口口酸钾增菌剂

29、5mL,摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。837.5%氯化钠肉汤成分:蛋白胨牛肉膏氯化钠蒸馏水pH7.4制法:将上述成分加热溶解,校正10g3g75g1000mLpH,分装试管,121口高压灭菌15min。84匹克氏肉汤成分:含1%胰蛋白胨的牛心浸液200mL1:25000结晶紫盐水溶液10mL1:800三氮化钠溶液10mL脱纤维兔血(或羊血)10mL制法:将上述已灭菌的各种成分,用无菌手续依次混合,分装于无菌试管内,每管约2mL,保存于冰箱内备用。85甘露醇卵黄多粘菌素琼脂成分:蛋白胨10g牛肉膏1g甘露醇10g氯化钠10g琼脂15g蒸馏水1000mL0

30、.2%酚红溶液13mL50%卵黄液50mL多粘菌素B100国际单位pH7.4制法:将前面五种成分加入于蒸馏水中,加热溶解,校正100mL,121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂,口至多粘菌素B10000国际单位,混口后倾注平板。/mLpH,加入酚红溶液。分装烧瓶,每瓶50,每瓶加入50%卵黄液5mL及成分:863.8%柠檬酸钠溶液柠檬酸钠3.8g蒸馏水100mL制法:取柠檬酸钠3.8g,加蒸馏水到100mL,溶解后过滤,装瓶,121口高压灭菌注:兔(人)血浆制备:取3.8%柠檬酸钠溶液一份加兔(或人)全血四份,混好静置之,则血球下降,即可得血浆进行试验。15min。87酪蛋白琼脂成分:酪

31、蛋白10g牛肉膏3g磷酸氢二钠2g氯化钠5g琼脂15g蒸馏水1000mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液12.5mLpH7.4制法:将除指示剂外的各成分混合,加热溶解(但酪蛋白不溶解),校正pH。加入指示剂,分装烧瓶,121口高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂,冷至50口,倾注平板。注:将菌株划线接种于平板上,如沿菌落周围有透明圈形成,即为能水解酪蛋白。88木糖明胶培养基成分:胰胨10g酵母膏10g木糖10g磷酸氢二钠5g明胶120g蒸馏水1000mL0.2%酚红溶液25mLpH。加入酚红溶液,分装试管,pH。加入酚红溶液,分装试管,121高压制法:将除酚红以外的各成分混合,加热溶解,校正灭菌15

32、min,迅速冷却。成分:89庖肉培养基牛肉浸液1000mL蛋白胨30g成分:89庖肉培养基牛肉浸液1000mL蛋白胨30g酵母膏5g磷酸二氢钠5g葡萄糖3g可溶性淀粉2g碎肉渣适量pH7.81称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉制法:500g,加蒸馏水搅拌煮沸15min,充分冷却,除去表层脂肪,澄清,过滤,加水补足至1000mL和1mol/L氢氧化钠溶液25mL,1000mL。加入除碎肉渣外的各种成分,校正pH。2的各种成分,校正pH。2碎肉渣经水洗后晾至半干,分装15mmx150mm试管约0.2g或铁屑少许。将上述液体培养基分装至每管内超过肉渣表面约或液体石蜡0.3口0.4cm。121高压灭菌15m

33、in。2口3cm高,每管加入还原铁粉1cm。上面覆盖溶化的凡士林0.1口90卵黄琼脂培养基成分:基础培养基肉浸液蛋白胨氯化钠琼脂pH7.550%成分:基础培养基肉浸液蛋白胨氯化钠琼脂pH7.550%葡萄糖水溶液。50%卵黄盐水悬液。制法:制备基础培养基,分装每瓶1000mL15g5g25口30g100mL。121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂,口至50,每瓶内加入50%葡萄糖水溶液2mL和50%卵黄盐水口液10口15mL,摇匀,倾注平板。91亚硫酸盐多粘菌素磺胺嘧啶琼脂(SPS)成分:胰酶消化酪蛋白胨15g酵母膏10g柠檬酸铁0.5g琼脂15g蒸馏水1000mL10%亚硫酸钠水溶液(新

34、配)5mL0.12%多粘菌素B硫酸盐水溶液10mL1.2%磺胺嘧啶钠水溶液10mLpH7.0制法:前面五种成分配合后加热溶解,校正pH。分装每瓶100mL,121C高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂,冷至50。按比例加入后3种溶液,摇匀,倾注平板。92液体硫乙醇酸盐培养基(FT)成分:胰酶消化酪蛋白胨15gLDODO0.5g葡萄糖5g酵母膏5g氯化钠2.5g硫乙醇酸钠0.5g刃天青(Resazurin)0.001g琼脂0.75g蒸馏水1000mLpH7.1制法:煮沸溶解,冷却后校正pH,分装试管,口管10mL,121高压灭菌15min。临用前隔水口沸10min,以驱除培养基中溶解的氧气,迅

35、速冷却。93含铁牛奶培养基成分:新鲜全脂年奶1000mL硫酸亚铁1g1000mL牛奶中,混口。分装试管,蒸馏水50mL1000mL牛奶中,混口。分装试管,制法:将硫酸亚铁溶解于蒸馏水中,不断搅拌,缓慢地加入于每口10mL,121高压灭菌15min。本培养基必须新鲜设备。94动力-硝酸盐培养基(A法)成分:蛋白胨5g牛肉膏3g硝酸钾1g琼脂3g蒸馏水1000mLpH7.0制法:加热溶解,校正pH。分装试管,口管10mL,121高压灭菌15min。95动力硝酸盐培养基(B法)成分:蛋白胨5g牛肉膏3g销酸钾5g磷酸氢二钠2.5g半乳糖5g甘油5g琼脂3g蒸馏水1000mLpH7.4将以上各成分混合

36、,加热溶解,校正制法:pH。分装试管,121高压灭菌15min。成分:制法:在肉浸液肉汤蛋白胨液肉浸液冰乙酸葡萄糖将蛋白胨液5min。96血清肉汤(3.1)中按10:1以无菌操作加马97马丁氏肉汤500mL500mL6g10g成分:蛋白胨5g牛肉膏3g销酸钾5g磷酸氢二钠2.5g半乳糖5g甘油5g琼脂3g蒸馏水1000mLpH7.4将以上各成分混合,加热溶解,校正制法:pH。分装试管,121高压灭菌15min。成分:制法:在肉浸液肉汤蛋白胨液肉浸液冰乙酸葡萄糖将蛋白胨液5min。96血清肉汤(3.1)中按10:1以无菌操作加马97马丁氏肉汤500mL500mL6g10g(或羊、兔)血清即为血清

37、肉汤。500mL与肉浸液500mL混合,加热至80,加冰乙酸1mL,摇匀,再煮沸加15%氢氧化钠溶液约20mL,校正pH至7.2。加乙酸钠6g,再校正pH至7.2。继续煮沸10min,用滤纸过滤。在每1000mL肉汤内,再加葡萄糖10g。然后装瓶,每瓶500mL。放置高压灭菌器内经121灭菌15min,备用。注:蛋白胨液的制备:取新鲜猪胃,去脂绞碎。再加盐酸(化学纯,比重1.19)10mL,经充分混合后,称取350g加50口左右蒸馏水置56温箱中消化1000mL,充分摇匀。24h(每小时搅拌1口2次),消化完毕后,加热,用滤纸过滤,备用。98明胶培养基成分:蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏

38、水1000mL制法:将上述成分混合,置流动蒸气灭菌器内,加热溶解,校正pH至7.0口7.2,用绒布过滤。分装试管,121灭菌15min,备用。99察氏培养基成分:硝酸钠3g磷酸氢二钾1g硫酸镁(MgSO4-7H2O)0.5g氯化钾0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂20g蒸馏水1000mL制法:加热溶解,分装后121灭菌20min。用途:青霉、曲霉鉴定及保存菌种用。100高盐察氏培养基成分:硝酸钠2g磷酸二氢钾1g硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.5g氯化钾0.5g硫酸亚铁0.01g氯化钠60g蔗糖30g琼脂20g蒸馏水1000mL制法:加热溶解,分装后,115高压灭菌30min。必要时,可酌量增加琼脂。用途:分离霉菌用。101马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)成分:马铃薯(去皮切块)300g葡萄糖20g琼脂20g蒸馏水1000mL制法:将马铃薯去皮切块,加1000mL蒸馏水,煮沸10口20min。用纱布过滤,补加蒸馏水至1000mL。加入葡萄糖和琼脂,加热溶化,分装,121高压灭菌20min。用途:分离培养霉菌。102马铃薯琼脂成分:马铃薯(成分:马铃薯(去皮切块)200g制法:用途琼脂蒸馏水同马铃薯葡萄糖琼脂。:鉴定霉菌用。20g1000mL103孟加拉红培养基成分:蛋白胨5g葡萄糖10g磷酸二氢钾1g硫

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