丹参多酚酸提取工艺的研究

1、丹参多酚酸提取工艺的研究【摘要】目的优选丹参多酚酸最正确提取工艺。方法以丹参多酚酸B和总丹参多酚酸含量为指标成分，对丹参多酚酸提取工艺进展优眩结果优化工艺为：12倍量30%乙醇回流提取3次，1h/次。丹参多酚酸B和总丹参多酚酸含量分别为57.7%，66.9%。结论该工艺合理，丹参多酚酸成分提取完全，具有较好的经济效益。【关键词】丹参；多酚酸；提取工艺Abstrat：bjetiveTptiizetheextratinpredurefrthesalvianliaidsfSalviailtirrhiza.ethdsTheptiunditinsfextratinpressfrsalvianliaids

2、fSalviailtirrhizaasseletediththententssalvianliaidBandsalvianliaidasindexesbyexperientaldesign.ResultsTheptialextratinpredureasrefluxingextratinfsalvianliaids,andtheSalviailtirrhizaasextratedith30%ethanlties,1hurspertie.ThententsfsalvianliaidBandsalvianlitere57.7%，66.9%.nlusinTheptiupreparativepredu

3、reisreliable.Salvianliaidsereextratedpletely,andithasthehighenibenefit.Keyrds：Salviailtirrhiza；Salvianliaids；Extratingpredure丹参多酚酸是中药材丹参中的水溶性成分，主要成分为丹酚酸、原儿茶醛、原儿茶酸、丹参素、咖啡酸、迷迭香酸等。丹参多酚酸具有显著的抗心肌缺血作用，可降低心脏耗氧量，并能对抗诱导的血小板聚集和抑制血栓的形成。临床试验研究说明，丹参多酚酸对于冠心并心绞痛，疗效显著、确切，病人使用平安1。目前丹参多酚酸是多种丹参制剂的重要原料，其质量好坏与稳定直接关系到制剂的

4、临床疗效。因此本文对丹参多酚酸提取工艺进展优化，以期为对丹参多酚酸制剂的消费开发提供理论根据。1仪器与材料1.1仪器aters自动进样液相色谱仪，alliane_2966型光电二极管阵列检测器(美国aters)；旋转蒸发仪(上海亚荣仪器厂)；电子分析天平(赛多利斯-startrius/BP211D)；紫外分光光度仪岛津UV-2450。1.2材料丹参药材(四川中江新世界丹参基地)；丹酚酸B对照品(中国药品生物制品检定所，批号：111562-202205)；甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1丹酚酸B的HPL含量测定方法建立2.1.1色谱条件色谱柱Luna518(2)100A

5、2504.60；流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(3010159)；检测波长：286n；柱温：30；流速：1l/in；进样体积：20l，理论塔板数按丹酚酸B计算应不低于2000。2.1.2标准曲线的建立精细称定丹酚酸B对照品5g，加75%甲醇定容至25l容量瓶中，得到浓度为0.2052g/l的丹酚酸B对照品溶液。分别精细汲取对照品溶液2，4，6，8，10l，稀释定容至10l，分别进样10l，记录色谱图。以色谱峰面积(Y)对丹酚酸B的量(X作回归，回归方程为：Y=954.41X-60730,R2=0.9994。丹酚酸B在410.42052.0g范围内线性关系良好。2.2丹参总酚酸含量测定标准曲线的建

6、立精细称定原儿茶醛对照品5.02g，置50l棕色容量瓶中，加水稀释定容至刻度，即得100.4g/l的对照品溶液。分别精细汲取0.2，0.6，1.0，1.4，1.8，2.2，2.6l，用NaN2-Al(N3)3比色法进展比色，测定吸收度，经EXEL回归软件计算，以原儿茶醛的含量为(X)，以吸收度A为(Y)回归方程为：Y=0.0029X-0.007，R2=0.9994，线性范围为20.08261.04g。2.3样品含量测定方法2.3.1丹酚酸B的含量取各供试品溶液过0.45微孔滤膜，按照丹酚酸B的测定方法进展测定，计算其含量。2.3.2紫外分光光度法测定丹参总酚酸的含量精细分取供试品溶液上清液10

7、l，水浴蒸至干，加水溶解，加0.1l/L的Hl溶液稀释定溶于100l容量瓶中，过滤，取滤液25l,参加5gNal至溶解，等体积的乙醚萃取3次，萃取液在水浴上蒸干，残渣用乙醇溶解定溶于50l容量瓶中，用NaN2-Al(N3)3比色法进展比色，即得吸收度，然后代入标准曲线，即得以原儿茶醛表示的丹参总酚酸的含量。2.4提取溶剂的选择丹参多酚酸可溶于水及不同浓度的甲醇、乙醇溶液2，为了选择最正确提取溶剂，我们对水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇作为提取溶剂进展了考察。取100g药材8份，分别加上述4种溶剂加热回流提取3次，30in/次，合并提取液，过滤取上清液。分别按照“2.3项下计算丹参酚酸B和

8、丹参总酚酸的含量。结果见表1。结果说明，30%乙醇溶液提取丹酚酸B和总丹酚酸含量均较高，因此选择30%乙醇溶液作为提取溶剂。表1不同溶剂提取效果的比拟略转贴于论文联盟.ll.2.5正交实验施行考察最正确提取工艺根据文献报道3并结合实际，醇提丹酚酸的影响因素有溶剂用量、提取时间、提取次数，为此选择3因素作为考察因素，并结合消费实际，每因素又选取3个程度，按L934正交表安排实验，以丹参多酚酸B和总丹参酚酸含量作为衡量提取效率的双重客观指标，优选最正确工艺，因素程度安排见表2。表2因素程度略最正确提取条件要满足丹参多酚酸B含量高并且总丹参酚酸含量也高，因此采用加权评分法综合评估丹参酚酸的提取条件。

9、评分标准为：将各项指标除以该列最大值再乘以100，为该项得分。设定丹参多酚酸B含量(X)总丹参多酚酸含量(Y)两者的权重系数分别为0.6和0.4，对两项指标进展加权求和。通过公式Z=0.6X+0.4Y，得到综合评分(Z)。实验结果及方差分析见表34。表3正交实验表结果及分析，表4方差分析略。2.6结果分析正交实验方差分析说明，因素A溶剂量、因素D提取次数对丹参多酚酸的提取有显著影响，而因素提取时间对丹参多酚酸的提取无显著影响。由Rj得出影响因素大小顺序为DA，由此得出最正确工艺为A32D3，即12倍量30%乙醇回流提取3次，1h/次。2.7验证实验按照理论最正确工艺A32D3，进展重复试验，丹参酚酸B和总丹参多酚酸含量分别为57.7%，66.9%，实验结果一致。3讨论丹参多酚酸一般提取溶剂为水，但水作为溶剂，不仅使水溶性杂质过多的提取出来，而且提取液易发生霉变，故考虑用醇水溶液提取，但醇的浓度也不能过高，否那么，脂溶性杂质成分也会过多的提取出来。因此本实验对丹参多酚酸的提取溶剂进展优选，结果显示30%乙醇提取效率较高，丹参多酚酸提取的得率和含量都比拟高，同时还易于回收溶剂。本实验以丹参酚酸B和总丹参多酚酸含量为指标对影响丹参多酚酸提取的提取时间、提取次数和溶剂用量进展优选，并采用加权平均法对结果进展分析，实验结果为丹参多酚酸的工业化消费提供理论和科学根据。【参