消毒灭菌工作规范

1、文件名消毒灭菌工作规范电子文件编码YFGL-02-006页码9-1一、消毒、灭菌方法的分类1.物理消毒灭菌法(1)热力消毒灭菌：干热法、湿热法。(2)辐射法消毒灭菌：紫外线、闵湎(钴60)。(3)清洁消毒。(4)其他消毒法。2.化学消毒法：使用化学消毒剂杀死和消除病原微生物的方法为化学消毒法。根据对微生物的杀灭作用分为三类：(1)高效化学消毒剂：能杀死包括细菌芽胞、真菌孢子在内的各种微生物，又称灭菌剂。如甲醛、戊二醛、过氧化氢等。(2)中效化学消毒剂：能杀死除菌芽细胞以外的各种微生物，如乙醇等。(3)低效化学消毒剂：只能杀灭细菌繁殖体和亲脂类病毒，有的对真菌有一定效果，如新洁尔灭、来苏尔、石炭

2、酸、洗必泰等。二、医疗器物分类及灭菌、消毒方法的选择医院内使用的医疗器械及各种用具，按其导致病人院内感染的危险度分为高危、中危、低危三类，根据医疗器物分类，选择正确、合适的灭菌方法，这是预防医源性感染的基本原则。1.高危物品的灭菌(1)高危物品的范围损伤皮肤、粘膜、进入无菌器官或深部组织的医疗器物属高危物品，如外科手术器械、注射器针头、动静脉置管、器官组织移植物、泌尿道插管、注射液体均属这一类。文件名消毒灭菌工作规范电子文件编码YFGL-02-006页码9-2(2)灭菌措施高危物品一旦被病原体污染，将会引起严重感染的可能，这一类物品必须采取严格的灭菌，首选压力蒸气灭菌，不能耐受高压的可采用干热

3、灭菌、环氧乙烷气体及高效化学灭菌剂如2戊二醛、6过氧化氢等(但如有可能尽量避免使用)灭菌，灭菌后必须做灭菌效果监测。2.中危物品的消毒(1)中危物品的范围指接触病人粘膜、皮肤的医疗物品，如呼吸机、麻醉机、口腔科器械、纤维鼻咽镜、喉镜(纤维、动态)、支气管镜、胃镜、阴道窥器、体温计等，损伤引起感染几率相对较低，但对免疫机能低下者，则导致感染危险度增加。(2)消毒措施此类物品必须采用高效消毒剂，其中金属器械(部分口腔科器械及内窥镜活检钳、镊子等)可耐高温、高压的采用压力蒸气消毒，或用2戊二醛浸泡消毒，体温表用0.5过氧乙酸消毒。3.低危物品消毒(1)低危物品范围指与完整皮肤接触或接触不密切的医疗器

4、物。如便盆、血压计、听诊器、床头柜、墙面、地板等。(2)消毒措施一般只需采用低效消毒剂或清洁剂擦洗、浸泡即可，只有明显致病微生物污染的医疗器物才需高水平消毒，传染病人及需严格保护性隔离的病人使用的器材均须经过灭菌处理。文件名消毒灭菌工作规范电子文件编码YFGL-02-006页码9-3三、医院消毒效果监测的人员须经过专业培训，掌握消毒知识，具备熟练的检验技能，选择合适的采样时间(消毒后、使用前)，遵循严格的无菌操作，以保证监测质量。四、监测方法1.压力蒸气灭菌效果的监测方法(1)工艺监测法(程序检测)。即按灭菌工艺参数进行检查，判断灭菌有否按规定条件进行。检查设备完好情况：仪表(温度、压力)、自

5、控设备有无故障，管道、夹层有无漏气。蒸气质量：不饱和蒸气、超热蒸气影响灭菌质量。检查物品包装规格、每锅装载容量。详细记录每锅的锅号、压力、温度、时间、灭菌物品、操作者姓名或编号。(2)化学监测法化学指示胶带：将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外，观察其颜色的改变，以指示是否经过灭菌处理。化学指示管(卡)：将既能指示温度，又能指示温度持续时间的化学指示管(卡)放入每一待灭菌的物品中央(下排气压力蒸气灭菌锅用121化学指示卡、管，预真空压力蒸气灭菌锅用132指示卡、管)。经灭菌后，据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。极少数基层医院仍在使用已淘汰的硫磺、苯甲酸作为指示剂)。实践验证，将上述指

6、示剂与生物指示剂监测作对照，发现硫磺、苯甲酸漏查率达20%25%。监测所用化学指示剂须经卫生部批准，并在有效期内使用，化学指文件名消毒灭菌工作规范电子文件编码YFGL-02-006页码9-4示胶带不能替代化学指示管(卡)用于包内作灭菌监测。(3)生物监测法。该方法是最可靠的灭菌效果监测手段，但等待检验结果时间较长，需2448小时。最新研制的快速生物指示剂，13小时可出检验结果，大大提高了灭菌生物监测速度。指示菌株：指示菌株为嗜热脂肪芽胞杆菌(ATCC7953株或SSIK31)，菌片或带培养基的生物培养指示剂，含菌量5.01055.0106cfu片，放置在热力较难达到的点，大型灭菌器至少5片，温

7、度1210.5，D值(杀灭90的细菌所需时间)为1.31.9分钟，杀灭时间(KT值)19分钟，存活时间(ST值)为3.9分钟。灭菌后菌片直接常规培养有无细菌生长，或放入溴甲酚葡萄糖蛋白胨水培养基中562培养2448小时，观察如原紫红色不变，表示灭菌成功，如变黄色则提示细菌繁殖，灭菌失败。快速生物指示剂(FLASH)：检测嗜热脂肪芽胞杆菌的活芽胞产生的酸性代谢产物(a-D葡酸苷酶)，使PH值改变，通过在培养基质中加入一种特殊的荧光物质，使之显示荧光，如灭菌后不能测到荧光即认为灭菌成功。有1小时、3小时两种快速生物指示剂。压力蒸气灭菌技术指标压力蒸气灭菌器压力(MPacm2)温度()灭菌时间(mi

8、n)下排气0.07115400.10512130预真空0.21013446注意：A.对含液体、玻璃制品装的各种制剂不宜采用预真空灭菌器，以防爆炸，损坏灭菌器，宜采用下排气灭菌器，按其特性，在确保不受损害的情况下，选用适当温度与时间。文件名消毒灭菌工作规范电子文件编码YFGL-02-006页码9-5B.预真空灭菌器：每晨消毒前需做B-D试验，建议用B-D试纸(图)，将其置于标准试验包中央。C.BD试验标准包制作：由3件平纹长袖手术衣、4块小手术巾、2块中手术巾、1块大手术巾、30块1010cm28层纱布敷料，外用平纹细布包裹，体积为253030cm3，检测冷空气排除效果。米字型3M胶带检测，固胶

9、带间隙大，常出现冷凝气团漏检。D.压力蒸气灭菌分为下排气、预真空两种方法，有人对二类灭菌器按常规灭菌方法灭菌，用指示剂检测对比研究，发现下排气灭菌器合格率58.8，预真空灭菌器100达标。其原因为：a.设备老化、漏气、仪表(压力、温度)失灵。b.蒸气质量不佳，不饱和，含湿过多或超热蒸气等影响灭菌质量。c.操作失误：冷空气未排尽，消毒时间不足，包装过大，装载不当。d.容器不合格(无孔铝盒、搪瓷盒)。2.紫外线表面消毒效果监测。紫外线属电磁波辐射，消毒灭菌使用多为C波紫外线，波长范围200275nm，杀菌最强波段250270nm，采用等级品石英玻璃管，有抛光铝板反光罩，平均每10m2面积配置一支3

10、0W灯管或按1.5Wm3配置。消毒适宜温度2040，相对湿度低于60，否则应适当延长相对时间。一般消毒时间每天不少于45分钟。消毒效果评价方法包括以下几种：(1)物理学检测法：采用紫外线强度测定仪(标定有效期内)测试，距灯管垂直距离1米，室温2025，220V普通30W管型紫外线灯，253.7nm紫外线辐射强反应70Wcm2，否则必须更换。表面消毒接受辐射剂量文件名消毒灭菌工作规范电子文件编码YFGL-02-006页码9-6应达到杀灭目标微生物所需，对大肠杆菌8099或ATCC259n，照射剂量应达到2万Wscm2，对枯草杆菌黑色变种芽胞(ATCC9372)应达到100000Wscm2。照射剂

11、量计算公式：剂量(Wscm2)强度(Wcm2)时间(S) (2)化学监测法：将化学指示卡置于灯管下1米，图案面朝上，照1分钟，涂层正中白色变紫红，与周围相应色块比较，即可读知该灯管的参考照射强度，简单、方便，但不够精确。(3)生物检测法：采用载体定量消毒试验，开启紫外线灯5分钟，将8个染菌玻片置于灭菌器皿中，水平放于适当距离照射，于不同间隔时间各取2个染菌玻片，分别投入2个盛有5ml洗脱液(1吐温80脂蛋白胨的生理盐水)试管中振打80次，稀释后取0.5ml作平板倾注，每个染菌玻片接种两个，置37培养箱48小时后作活菌计数。(阳性对照不作照射，模拟上述处置办法活菌计数)指示菌杀灭率()（阳性对照

12、回收菌数-试验组回收菌数）/阳性对照回收菌数100(杀菌率99.9，认为消毒合格)3.液体消毒剂消毒效果监测(1)消毒剂浓度有效成分监测试纸法：将消毒液浓度检测专用试纸在被检消毒液中浸一下取出，观察其色泽改变，与标志不同深度的标准板对比，得到被检消毒液的浓度()或含量(mgL)，方法简便、快速。如3M公司的戊二醛浓度测试试纸、军事医学科学院研究成功的G-1型浓度试纸可用于戊二醛、过氧乙酸、过氧化氢、部分含氯制剂的有效含量测试。文件名消毒灭菌工作规范电子文件编码YFGL-02-006页码9-7a.浓消毒液需稀释后测定，计算公式如下：浓消毒剂浓度()（比色值稀释液ml数）/采样浓消毒液数量(ml)

13、100b.固体消毒剂有效浓度()，需先配制溶液，再按下列公式计算：固体消毒剂浓度()（比色值稀释液ml数）/取固体消毒剂g数100滴定法：根据不同消毒剂，采用不同试剂，经各自检测的操作步骤，得出结果，根据公式计算出各种消毒液有效含量，如戊二醛有效浓度测定：精确量取戊二醛1ml，置三角烧瓶中，加入0.25M亚硫酸氢钠溶液20ml，放置5分钟后，用滴定管滴加0.1M碘溶液，观察五色溶液转为黄色，又由黄色变成无色，继续滴至再次出现黄色，并保持3分钟以上，记录消耗的碘溶液的毫升数。同样用蒸馏水代替样品做空白对照，按以下公式计算戊二醛含量：戊二醛(WV)M(V2-V1)100.12/（2S1000）10

14、0式中：M碘液的摩尔浓度V1样品消耗碘酒毫升数V2空白消耗碘液的毫升数100.12戊二醛分子量S样品毫升数(2)消毒剂生物学检测：残留药物的去除方法和中和试验：评价化学杀菌剂对微生物的杀灭作用，在试验中必须采取去除残留杀菌剂的措施，以便阐明测试的化合物有无杀灭微生物作用，以及不同浓度和不同作用时间的杀灭效果。不采用有效的去除残留杀菌剂的消毒试验和文件名消毒灭菌工作规范电子文件编码YFGL-02-006页码9-8灭菌试验是失败的试验。化学中和剂的要求是：a.可以终止杀菌剂对试验微生物的作用；b.对试验微生物无杀灭或抑制作用；c.对培养基无不良影响。采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml

15、被检样液，加入9ml稀释液中混匀。对于醇类与酚类消毒剂稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需在肉汤中加入0.1硫代硫酸钠；对于洗必泰、季胺盐类消毒剂，需在肉汤中加入3(WV)吐温80和0.3%卵磷脂；对于醛类消毒剂，需在肉汤中加入0.3甘氨酸；对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需在肉汤中加入3(WV)吐温80，以中和被检样液的残效作用。细菌菌落数检查：用无菌滴管各吸取0.5ml样品分别接种于二块普通营养琼脂培养平板上，置于361、28温度下各培养3天、7天，观察并计算菌落生长数。每ml污染菌数(cfuml)（两块平板上菌落数稀释倍数）/（0.52）使用中消毒液细菌菌落总数lOOcfuml，致病微生物不得检出。无菌器械保留液，必须达到无菌要求。4.一次性医疗用品质量监测制度根据卫生部消毒管理办法、医院感染管理规范规定：一次性使用医疗、卫生用品进入医疗市场必须持有省级以上卫生行政部门的“生产许可证”、“卫生许可证”、及“推销员证”。并规定，一次性医用器具使用后必须经毁形和无害化处理，严禁重复使用和回流市场。文件名消毒灭菌工作规范电子文件编码YFGL-02-006页码9-9(1)采购验核“三证”，对各厂家设备条件、生产环境、产品声誉、技术力量等