Agilent260液相色谱系统操作规程

1、目的 测工作的顺当进展。适用范围Agilent 1260职责试验室分析人员负责 Agilent 1260 系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。系统组成Agilent 1260(G1311C)和脱气机；可变波长紫外检测器VWDG1314F；Chemstation A.01.04AT-550色谱柱；电脑、打印机等关心设备。无操作程序开机前的预备检查仪器校验标识，确认仪器处于校验周期内。检查上次试验室仪器设备使用记录表和仪器状态，确认仪器处于正常状态；流淌相的制备：按高效液相色谱法流淌相配制标准操作规程配制需要的流淌相。一般1020min。更换流淌相：瓶盖；将排液管的出口端放入废液瓶中，并盖好瓶盖

2、。供试溶液的配制：Agilent 1260供试品用规定溶剂配制成供试品溶液。定量测定时，比照品溶液和供试品溶液均应分别配制 2 份。6.1.5.2 如有必要，样品需预处理，如过滤等，以免对色谱系统产生污染和色谱干扰。选择色谱柱：依据待检供试品的检测方法确定所需的色谱柱；检查仪器上安装的色谱柱是否与其一样，假设不同则需进展更换。更换色谱柱拆卸原色谱柱：先握住色谱柱，再松动色谱柱出口端螺帽，取下出口端的管线；松动色谱柱入口端螺帽，取下入口端的管线；用止动塞将色谱柱的进出口塞住拧紧后，将色谱柱放回原专用包装盒内。安装色谱柱：从专用包装盒内取精彩谱柱，松动并取下色谱柱出入口的止动塞；将与进样器相连的管

3、线一端插入色谱柱入口端，拧紧螺帽；(留意:安装时色谱柱上的流向标志应与管路的流淌相流向全都。)将与检测器相连的管线一端插入色谱柱出口端，拧紧螺帽。开机通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。接通电源，翻开计算机和打印机开关。Windows翻开柱温箱开关。待各模块自检完成后，点击Windows桌面“”图标进入化学工作站画面。再连接工作站。把握”项，进入方法和运行把握窗口。操作泵的开启和设置逆时针，右键点击四元泵下面的空白处，选择“方法”选项，进入泵编辑画面。Agilent 1260设流速：0ml/min，点击“确定”。 右键点击四元泵下面的空白处，选择“把握”选项，选中“

4、启动”，点击“确定”，泵开头启动。5ml/min ，A100%，单击“确定”。则系统开头冲洗，直到管线内由溶剂瓶到泵入口道无气泡为止5min。或降低流速；10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。0ml/min，Purge顺时针。相比例和流速或选择已有方法开头系统平衡。“确定”。方法编辑骤建立：/采集”、“运行时选项表”三项，点击确定；息，点击确定；泵参数设定1ml/min，B”80.0,(A=100-B-C-D)入 ”一行“时间表”,编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压,如 300bar，以保护柱子。点击“确定”进入下一参数设定。柱温箱参数设定在柱温箱上手动输入规定的温度即可。紫外

5、检测器VWDG1314F参数设定的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在“峰宽(响应时间)”下方点击Agilent 12600.1min (2s)1min ，波长=300nm。点击“确定”，进入下一参数设定。击“确定”。运行样品所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定”。从“运行把握”菜单中选择“样品信息”选项，输入操作者名称；在“数据文件”中选/计数器”。的数据掩盖掉。Pr在前缀/计数器 “前缀”框中输入前缀，在“计数器”框中输入计数器的vwd0001，vwd0002。点击“确定”，从“仪器”菜单项选择择“系统开启”。手动进样数据处理双击电脑桌面的“入脱机工作站，从“视图”菜单中选择“数

6、据分析”，或点击屏幕左下方的“数据分析”，进展数据处理。处理的数据：从“文件”菜单中选择“调用信号”，或者点击屏幕左上方的图标“”，跳出一个对话框，选择相应文件夹里的数据文件名称，单击“确定”即可。调用方法：从“方法”菜单里选择“调用方法”，或者点击屏幕左上方的图标“跳出一个对话框，选择相应的方法名称，单击“确定”即可。积分：从“积分”菜单中选择“积分”，当前数据被积分。假设积分不是很抱负，则从“积分”菜单中选择“积分大事”，选择适宜的“斜率灵敏度”、“最小峰面积”、“最小峰高”等。从“积分”菜单中选择“积分”，则当前数据被重积分。6.3.4.3.3如积分不抱负，则重复6.3.4.3.1和6.

7、3.4.3.2，直到满足为止，此时点击图标“进展积分参数的保存并退出积分参数设定界面。6.3.4.3.4 假设局部谱峰自动积分不是很抱负，也可选择手动积分。点击图标“”，绘制峰基线并积分点击图“切线撇去一个峰并积适合拖尾峰的处理点击图“手动分裂已积分的峰适合未基线分别的峰的处理；点击“”，删除已积分的峰；点击图Agilent 1260标“”，将当前手动积分大事保存到数据文件中。其他数据处理方式详见工作站说明书。打印报告翻开打印机电源开关“报告菜单中选“设定报告或点击屏幕中间的图“跳出一对话框，选择相应的定量方法和报告格式，单击确定后退出。从“报告”菜单中选择“打印报告”，或点击屏幕中间的图标“

8、 ”，则可预览到报告。假设报告中显示的时间范围及响应范围不适宜，则可点击“关闭”退出预览。进入“报告版面设计”界面，选择相应的报告格式，双击图谱，点“自定义量程”，输入适宜的时间范围和响应范围，并选择“全部使用一样量程”，点击“确定”并保存当前模版后退出，再重进入“数据分析”界面，重预览报告，假设时间范围和响应范围均适宜，单击“打印报告”，即可。宏命令的使用在“视图”下拉单中调出“化学工作站工作日程表”；输入日期时间、命令并选好执行命令的模式，点击保存图标；开泵：pumpallon关泵：pumpall off开灯：lampall on 关灯：lampall off载入一个方法：loadmeth

9、od xxx.M 开头一个方法：startmethod xxx.M停顿一个方法：stopmethod xxx.M 关闭整个系统：standby。6.5.4 留意事项：日程表编辑完毕后，肯定要保存，并且不能关闭；宏命令不区分大小写。关机样品测试完毕后，关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。/20min;30-60min./20min;/20min。退出化学工作站，依次提示关泵及其它窗口，关闭计算机。关闭Agilent 1260开关。做好仪器使用登记，并填写试验室仪器设备使用记录表。Agilent 1260系统日常维护和保养色谱柱pH相类型等。乙腈/甲醇-水应用棕色玻璃瓶存放，避开光照，防止长

10、菌。试样配制尽量用流淌相配制试样。必要时使用超声波处理试样，确保试样完全溶解并混合均匀。选择有机相或水相针头过滤器。对含有颗粒的固体样品，经研磨均匀前方可取样。手动进样针：取样前应用试样润洗 3 次以上，使用后应用甲醇/乙腈清洗 3 次以上。废液处理：准时清理废液瓶，以防废液溢出。仪器安全保障每天使用仪器之前，要翻开Purge 阀将各个通道冲洗 45min 左右； Purge Valve，5ml/min10bar时)。Purge当仪器使用缓冲溶液作业时，要用水进展过渡并将柱塞杆清洗开关翻开。仪器暂停两天以上不使用包括两天，过滤板最好选用甲醇浸泡。每次使用前后，应检查泵头、并清洗除去污染物或析出的固体盐。降低以避开压力波动过大，损坏色谱柱。排解，排解故障前方能进展操作。如压力上升，甚至自动停泵，应检查柱端有无污染、堵塞。等。对试验中仪器的出错，应当具体填写具体的发生状况以及处理方法。未能处理的，应向他人求证，并对下位使用者提出问题所在。每次使用仪器之前，应当查看使用记录，确定有没有尚未