直链淀粉和支链淀粉

1、直链淀粉和支链淀粉配比与糊化温度的关系作者石家源指导教师闫怀义（忻州师范学院 化学系0701班034000）摘 要 为了研究直链淀粉和支链淀粉配比与糊化温度的关系，以玉米淀粉为原料，采用正 丁醇沉降法和温水浸出法提取出直链淀粉和支链淀粉，并比较了两种方法提取出产品的纯 度，然后用分光光度法测定了不同配比的直、支链淀粉的糊化温度。结果表明：正丁醇沉降 法过于复杂，且所需时间过长；温水浸出法操作简单，节省时间；正丁醇沉降法分离出的支 链淀粉纯度比温水浸出法的高，但是相差不多；由温水浸出法分离出的直链淀粉纯度比正丁 醇沉降法的高；所以在工业生产中完全可以用温水浸出法代替丁醇沉降法；用温水浸出法提 取

2、出的直链淀粉的糊化温度为80 ；支链淀粉的糊化温度为55C。即直链淀粉含量越多， 糊化温度越高；支链淀粉含量越多，糊化温度越低。关键词 直链淀粉；支链淀粉；提取；配比；糊化温度引言直链淀粉和支链淀粉是淀粉的两大组成成分，由于二者的分子结构、分子聚 集状态不同，从而使得不同来源的淀粉有各自的用途。研究表明，淀粉中直链淀 粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接 的影响。因此，对于不同比例直、支链淀粉的淀粉的研究具有重要的意义。在淀粉的悬浊液中，淀粉微晶束溶融的过程叫做淀粉的糊化，艮即水分子进 入淀粉微晶束结构，拆散分子间的缔合状态。淀粉不溶于冷水，难被酶解，没有 消

3、化性。但淀粉糊化后形成的胶体糊，能被酶解、消化。糊化完全的淀粉可以 100%被消化；干燥的糊化淀粉食品可以长期保藏且不变质；作为施胶剂或浆料， 糊化后的淀粉才能成糊以供涂抹。因此，淀粉应用的前提是淀粉的糊化。糊化是 淀粉的一大特性，评价糊化的基础是：粘度、结晶性、糊化温度、糊化度、润涨 度、溶解度等。糊化温度是指淀粉发生糊化时的温度，通常用糊化开始和完成的 温度来表示淀粉糊化温度的范围。糊化的方法有间接加热法、直接加热法、超高 压糊化法及化学糊化法等。研究糊化温度一般采用差示扫描量热分析、定量差示 热分析、分光光度法、激光光散射法以及核磁共振分析等方法。洪雁用正丁醇沉降法提取了直链淀粉纯品，并

4、通过蓝值、凝胶色谱、高效液 相色谱法等方法对其纯度进行了鉴定。本文以玉米淀粉为原料分别用正丁醇沉降 法和温水浸出法两种不同的方法提取直链淀粉和支链淀粉，利用光吸收特性与纯 品对比纯度。再用温水浸出法提取出的直链淀粉和支链淀粉进行不同配比后运用分光光度法测糊化温度。1材料与方法1.1材料与仪器玉米淀粉：食品级，山西红鑫淀粉有限公司；氢氧化钠、无水乙醇、正丁醇、 异戊醇、冰乙酸、直链淀粉：分析纯，天津市风船化学试剂科技有限公司；支链 淀粉：分析纯，梯希爱(上海)化成工业发展有限公司；盐酸：分析纯，郑州市 荥阳新化工厂；95%乙醇、碘化钾：分析纯，天津市申泰化学试剂有限公司；碘： 分析纯，天津市北辰

5、方正试剂厂；AL204电子天平：梅特勒-托利多仪器(上海) 有限公司；电热恒温水浴锅：北京科伟永兴仪器有限公司；723可见分光光度 计：上海光谱仪器有限公司；TGL-16台式高速离心机：金坛市希望科研仪器有 限公司；电热鼓风干燥箱：重庆试验设备厂。1.2实验方法1.2.1直、支链淀粉的制备方法1.2.1.1正丁醇沉降法玉米淀粉中直链淀粉和支链淀粉的粗分离：称取10g玉米淀粉，加入少量的 无水乙醇润湿，再加入350mL 0.5mol/L的氢氧化钠，在沸水浴中搅拌10min， 使溶液分散透明，冷却至室温后冷冻，高速离心(8000r/min)10min，用2mol/L 的HCL中和至中性，加入100

6、mL 3: 1正丁醇-异戊醇的混合溶液，在沸水浴中搅 拌10min，冷却至室温，于2-4C的冰箱中静置24h，取出，冷冻，高速离心 (8000r/min) 10min，得到的沉淀物为粗直链淀粉，离心液为粗支链淀粉。直链淀粉的纯化：在200mL水中加入正丁醇至饱和，并将粗直链淀粉沉淀全 部转移到上述溶液中，加热到溶液透明，然后冷却至室温，于2-4 C的冰箱中静 置24h，取出，冷冻，高速离心(8000r/min) 10min，得到的沉淀物按照上述实验 方法再纯化数次。将沉淀物在漏斗中过滤，并用无水乙醇洗涤数次后在40C的 鼓风干燥箱中干燥8h，即得到纯直链淀粉。支链淀粉的纯化：在分离得到的粗支链

7、淀粉离心液中加入40mL1： 1正丁醇 -异戊醇的混合液，然后在沸水浴中搅拌10min，冷却至室温，于2-4C的冰箱中 静置48h，取出，冷冻，高速离心(8000r/min) 10min。在离心液中缓缓加入二 倍体积的无水乙醇，于2-4C的冰箱中静置24h，按照上述方法纯化数次。沉淀 物用无水乙醇洗涤数次后在40C的鼓风干燥箱中干燥8h，即得到纯支链淀粉。 1.2.1.2温水浸出法配制2%的淀粉悬浮液，在恒温水浴锅中搅拌加热至65C，恒温静止待溶液 分层后。提取上清液，加入适量正丁醇，静置沉淀，将沉淀过滤后用无水乙醇洗 涤45次，自然干燥得直链淀粉。反复操作多次，下层沉淀即为较纯的支链 淀粉。

8、1.2.2标准样品吸光度的测定准确称取100mg标准样品放入25mL的比色管中，然后加入1mL95%乙醇、 9mL1mol/L的NaOH，旋紧盖子后在沸水浴中加热10min使淀粉糊化；冷却至室 温，再将内容物完全转移到100mL容量瓶中用蒸馏水稀释定容;再准确吸取5mL 样液于另一个100mL容量瓶中，加入1mL1mol/L的醋酸和2mL碘试剂，用蒸 馏水定容混匀。静置20min后，用蒸馏水作背景，在620nm波长下用1cm比色 皿测定吸光度。1.2.3鉴定直、支链淀粉的纯度1.2.3.1比较不同方法制得的直链淀粉纯度分别准确称取100mg用两种方法分离提取出的直链淀粉放入25mL的比色管 中

9、，然后加入1mL95%乙醇、9mL1mol/L的NaOH，旋紧盖子后在沸水浴中加热 10min使淀粉糊化；冷却至室温，再将内容物完全转移到100mL容量瓶中用蒸 馏水稀释定容；准确吸取5mL样液于另一个100mL容量瓶中，加入1mL1mol/L 的醋酸和2mL碘试剂，用蒸馏水定容混匀。静置20min后，用蒸馏水作背景， 在620nm波长下用1cm比色皿测定吸光度。1.2.3.2比较不同方法制得的支链淀粉纯度分别准确称取100mg用两种方法分离提取出的支链淀粉放入25mL的比色管 中，然后加入1mL95%乙醇、9mL1mol/L的NaOH，旋紧盖子后在沸水浴中加热 10min使淀粉糊化；冷却至室

10、温，再将内容物完全转移到100mL容量瓶中用蒸 馏水稀释定容；准确吸取5mL样液于另一个100mL容量瓶中，加入1mL1mol/L 的醋酸和2mL碘试剂，用蒸馏水定容混匀。静置20min后，用蒸馏水作背景， 在620nm波长下用1cm比色皿测定吸光度。1.2.4分光光度计法测定糊化温度首先，用温水浸出法分离直链淀粉和支链淀粉，并多次提纯。然后准确称取 0.5g不同配比的直链淀粉和支链淀粉，定容到50ml的容量瓶中（即配制成1% 的淀粉悬浮液）。在电热恒温水浴锅中连续加热，用723可见分光光度计分别测 定在 50C、55C、60C、65C、70C、75C、80C、85C、90C和 95C时的透

11、光率（每次测量时要将待测液体冷却到室温，并用蒸馏水作背景）。根据实验数 据作出透光率随温度变化图，再从图中判断糊化温度。2结果与分析2.1标准直链淀粉和支链淀粉与吸光度的关系配置不同比例的直链淀粉和支链淀粉的标准混合样并分别测定其吸光度（见 表1）。表1不同比例的直链淀粉和支链淀粉的吸光度支链淀粉（%）直链淀粉（%）吸光度10000.08590100.09480200.10470300.11260400.12350500.13440600.14330700.15620800.16310900.17401000.185由表1可得出结论：淀粉的吸光度随支链淀粉含量的增加而变小，随直链淀 粉含量的增

12、加而变大。即淀粉的吸光度越小，支链淀粉越纯；淀粉的吸光度越大， 直链淀粉越纯。2.2不同方法提取的直链淀粉和支链淀粉纯度的比较2.2.1不同方法提取出的支链淀粉纯度的比较表2两种方法分离的支链淀粉纯度的比较支链淀粉（止醇沉降法）的吸光度支链淀粉（温水浸出法）的吸光度0.247 ( A )0.315 ( A)由表1、2可得出结论：由正丁醇沉降法分离出的支链淀粉的吸光度比温水浸 出法的小，所以正丁醇沉降法分离出的支链淀粉纯度比温水浸出法的纯度高，但 是相差不多。2.2.2不同方法提取出的直链淀粉纯度的比较表3两种方法分离的直链淀粉纯度的比较直链淀粉（止醇沉降法）的吸光度直链淀粉（温水浸出法）的吸光

13、度0.305 (A)0.474 (A)由表1、3可得出结论：由温水浸出法分离出的直链淀粉的吸光度比正丁醇沉 降法的大，所以温水浸出法分离出的直链淀粉纯度比正丁醇沉降法的纯度高。2.3影响玉米直链淀粉和支链淀粉分离和纯化的主要因素：2.3.1正丁醇沉降法中影响玉米直、支链淀粉分离和纯化的主要因素：包括淀粉 用碱液分散时的搅拌速度、纯化时正丁醇及水的用量、离心力的大小等。淀粉在 分散时的搅拌速度是影响分离成功的主要因素，搅拌剧烈则使整个胶体结构破 坏，在离心时直链淀粉与支链淀粉无法完全分离，所以应以小玻璃棒轻轻搅动为 好；直链淀粉容易老化，一旦老化，分离的直链淀粉即使加热也极难溶解，在多 次纯化的

14、过程中，可通过增大正丁醇及水的用量来降低直链淀粉的浓度，减弱直 链淀粉的老化速度，制得纯度较高的直链淀粉；脂质、蛋白质无机物等成分的存 在对直链淀粉多次纯化后的纯度有影响，在进行直链淀粉和支链淀粉分离前可通 过含有15%-20%水的甲醇溶液进行抽提除去脂质、甲苯浸泡除去蛋白质等方法消 除这些微量成分对于直链淀粉纯度的影响。离心力的大小和离心的温度是影响支 链淀粉纯度的主要因素，当离心力较小的情况下和离心温度较高时，会导致离心 液较混浊，直链淀粉和支链淀粉无法完全分离开，最后制得的支链淀粉中含有较 多无法完全沉淀的直链淀粉。因此，离心速度必须大于6000r/min，离心温度最 好在2，离心时间最

15、好大于10min，这样可使直链淀粉每次充分沉淀，制得的 支链淀粉较纯。2.3.2温水浸出法中影响玉米直、支链淀粉分离和纯化的主要因素：此方法中温 度影响淀粉的提取效率，一般温度稍高于淀粉的糊化温度。若温度太高，则直链 淀粉的提取效率高，但支链淀粉也会被提取出来，纯度差；若温度太低，则提取 效率低，直链淀粉得率也低。2.4直链淀粉和支链淀粉配比与糊化温度的关系2.4.1不同配比的直链淀粉和支链淀粉的糊化温度用分光光度计法（方法见1.2.4）在不同温度下测定不同配比的直、支链淀粉 的透光率，然后以温度为横坐标，透光率为纵坐标作图，从而判断其糊化温度。)%( 率 光 透1412)%( 率 光 透14

16、12108642040 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 温度(C)图1直链淀粉和支链淀粉的配比为100/014 -12 -）10 -（ 8 -光6 透4 -0八4045 50 55 60 6570 75 8085 90 95温度（C）图2直链淀粉和支链淀粉的配比为90/10由图1可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为100/0时的糊化温度约为80C。由图2可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为90/10时的糊化温度约为78C。)%( 率 光 透12108642)%( 率 光 透040 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95温度)%( 率

17、光 透12108642)%( 率 光 透040 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95温度（C）1412108 642 040 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95温度（C）图3图3直链淀粉和支链淀粉配比为80/20图4直链淀粉和支链淀粉配比为70/30由图3可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为80/20时的糊化温度约为75C。由图4可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为70/30时的糊化温度约为72C。)%( 率 光 透1412108642)%( 率 光 %( 率 光 透1412108642040 45 50 55

18、 60 65 70 75 80 85 90 95温度（C）图5直链淀粉和支链淀粉配比为60/4040 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95温度（C）图6直链淀粉和支链淀粉配比为50/50由图5可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为60/40时的糊化温度约为69C。由图6可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为50/50时的糊化温度约为65C。)%( 率 光 透1412108)%( 率 光 透1412108642040 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95温度（C）图7直链淀粉和支链淀粉配比为40/6016 -14 - ）12 -（ 10 一率8

19、 一光6 一.透 4 -* *2 -. V*iiii0*40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95温度（C）图8直链淀粉和支链淀粉的配比为30/70由图7可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为40/60时的糊化温度约为62C。由图8可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为30/70时的糊化温度约为61C。30)%( 率 光 透25201510540 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 952530)%( 率 光 透25201510540 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 952540 4550 55 6065 7075 8

20、0 8590 95温度(C)温度(C)温度(C)图9直链淀粉和支链淀粉配比为图9直链淀粉和支链淀粉配比为20/80图10直链淀粉和支链淀粉配比为10/90由图9可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为20/80时的糊化温度约为60C。由图10可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为10/90时的糊化温度约为58C。30）%（ 率 光 透）%（ 率 光 透2015105040 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95温度（C）图11直链淀粉和支链淀粉配比为0/100由图11可得出结论：直链淀粉和支链淀粉配比为0/100时的糊化温度约为55C。2.4.2由2.4.1部分可得到不同配

21、比与糊化温度的关系见表2表2直链淀粉和支链淀粉不同配比与其糊化温度的关系直链淀粉/支链淀粉糊化温度（C）100/08090/107880/207570/307260/406950/506540/606230/706120/806010/90580/10055由表2可得出结论：直链淀粉含量越多，糊化温度越高；支链淀粉含量越多，糊 化温度越低。3结论3.1用正丁醇沉降法可以得到纯度较高的直链淀粉和支链淀粉，但是方法过于复 杂，且所需时间过长；温水浸出法操作简单，节省时间。根据直链淀粉和支链淀 粉的光吸收特性判断出由正丁醇沉降法分离出的支链淀粉纯度比温水浸出法的 高，但是相差不多；由温水浸出法分离出

22、的直链淀粉纯度比正丁醇沉降法的高。 所以在工业生产中完全可以用温水浸出法代替丁醇沉降法。3.2通过以上的测定、分析、比较发现：用分光光度计法测定不同配比的直链淀 粉和支链淀粉的糊化温度，结果表明：用温水浸出法提取出的直链淀粉的糊化温 度为80C；支链淀粉的糊化温度为55C。即直链淀粉含量越多，糊化温度越高； 支链淀粉含量越多，糊化温度越低。参考文献洪雁.直链淀粉和支链淀粉纯品的提取及其鉴定A.食品工业科技,2004(4)： 8688.李洁、田翠华、项丽霞等.莲藕淀粉糊化温度测定方法的比较A.中国粮油学报,2007,22(3):7073.夏慧玲,王水兴,潘阳.红薯直链淀粉的分离纯化和检测J.食品

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25、Rix, Melbourne. A simple and rapid colorimetric method for the determination of amylose in starch produces. Starch 1998,50:158163.Amylose and amylopectin ratio and the relationship betweengelatinization temperatureAuthor: Shi Jia-yuan Director: Yan Huai-yiAbstract: Amylose and amylopectin are the tw

26、o starch components,and in the starch ,the proportion of amylose and amylopectin has a direct impact on gelatinization temperature.Gelatinization temperature is the temperature when the starch gelatinization occurs,the general temperature of gelatinization by differential scanning calorimetry analysis of quantitative differential t