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文档简介
1、1.2.1 微生物的基本培养技术 考点1:培养基的配制精讲1.微生物。微生物是难以用肉眼观察的微小生物的统称,包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。本章中提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。2.培养基。人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。3.培养基的种类微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长,可以形成肉眼可见的菌落。4.培养基的营养组成。虽然各种培养基的配方不同,但一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如,在培养乳酸杆
2、菌时,需要在培养基中添加维生素;在培养霉菌时,一般需要将培养基调至酸性;在培养细菌时,一般需要将培养基调至中性或弱碱性;在培养厌氧微生物时,需要提供无氧的条件。精练【例1】下列有关微生物培养基种类及配制原则的表述,正确的是( )A培养霉菌时需将培养基的 pH 调节到中性或微碱性B液体培养基可用于观察菌落,固体培养基可用于工业生产C任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐及生长因子D微生物的生长除受营养因素影响外,还受到 pH、O2、渗透压等的影响【答案】D【详解】A、培养霉菌时需将培养基的pH调节到中性或微酸性,A错误;B、固定培养基可用于观察菌落,液体培养基可用于工业生产,B错误;C、培养
3、基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有些微生物的培养除了上述几种主要营养物质外,还需要添加生长因子,有的微生物培养基中可以不加碳源,如自养型的;C错误;D、培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。微生物的生长除了受到以上营养因素的影响外,还受到pH、O2、渗透压等的影响,D正确。故选D。考点2:无菌技术精讲1.获得纯净的微生物培养物的关键:防止杂菌污染。2.消毒和灭菌的比较条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理、化学或生物等方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源紫外线消毒接种室、接种箱、超净工作台等灭菌强烈
4、的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具等干热灭菌法玻璃器皿、金属工具等高压蒸汽灭菌法培养基、容器等3.消毒和灭菌工作主要包括两个方面:对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;将用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等进行灭菌。精练【例2】下列对灭菌和消毒的理解不正确的是( )A灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物C消毒和灭菌都是采用物理方法杀灭微生物D常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等【答案】C【详解】A、灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程,A正确;B、消毒
5、是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢子),B正确;C、消毒和灭菌都是采用物理或化学的方法杀灭微生物,不仅有物理方法,C错误;D、灭菌的方法比较强烈,一般是高温或高压,常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法,D正确。故选C。【例3】培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是( )化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线灭菌 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法ABCD【答案】A【详解】培养基需用湿热灭菌(高压蒸汽灭菌);培养皿能耐高温,需用干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用化学药剂进
6、行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;为不破坏其营养成分,对牛奶可采用巴氏消毒法。A符合题意。故选A。考点3:微生物的纯培养精讲1培养物。在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。2.纯培养。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。3.微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。4.菌落。分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。5.采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成
7、的纯培养物。6.在马铃薯琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。精练【例4】下列关于微生物纯培养的叙述,正确的是( )A消毒和灭菌的杀菌程度存在差异,消毒可以杀死物体内外所有的微生物B培养基中营养物质浓度越高,对微生物的生长越有利C固体培养基表面生长的一个单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的D在实验室中,可以在非实验区域进食和喝水【答案】C【详解】A、消毒只能杀灭物体体表或内部的一部分微生物,不能杀死孢子和芽孢,而灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,A错误;B、培养基中的营养物质要协调,注意各种营养物质的浓度和比例,若浓度过高,微生物会通过渗透作用失水,对微生物的增殖不利,B
8、错误;C、菌落是指细菌或真菌在固体培养基上由一个细胞生长繁殖而形成的能被肉眼识别的子细胞群体,固体培养基表面生长的一个菌落一般是由单个微生物繁殖形成的,C正确;D、为保证实验者的安全并避免杂菌污染,不能在实验室中进食和喝水,D错误。故选C。【例5】下列有关酵母菌纯培养的叙述,错误的是()A操作者要对操做的空间、自己的衣服和手进行清洁和消毒B培养基中的营养物质浓度越高,对酵母菌的生长越有利C培养基上的单个菌落一般是由单个酵母菌繁殖形成的D每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌【答案】B【详解】A、对实验操作的空间、操作者的手进行清洁和消毒,包括操作者的衣服,A正确;B、培养基中的营养物质浓度过高,影响细胞渗透压,使微生物会通过渗透作用失水,对微生物的生长不
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