福建省福清市私立三华学校2017届高三生物三轮复习选修1知识复习图解

1、学必求其心得，业必贵于专精选修1生物技术实践知识概括图解注意：要先冲洗后除枝梗(预防除掉枝梗时引起葡萄损坏，增加被杂菌污染的机会，同时，防备葡萄汁流失)注意：不能够每每冲洗(预防选择新鲜的葡萄菌种流失)原理：主要菌种是酵母菌。注意：酵母菌是异养兼性厌氧微生物榨汁机要冲洗洁净，原理：主要菌种是醋酸杆菌(异养需氧型)C6H12O6C2H5OHC02并晾干(防杂菌污染)当氧气糖源均充分时，糖醋酸温度：20左右最适合酵预防将果核压破(因母菌生殖，一般控制当氧气充分、缺少糖源时，乙醇乙醛果核含有多种有害葡温度：3035。在1825。萄酒风味的物质)果精选葡萄冲洗榨汁酒精发酵酒和果果酒醋注意：的发酵装置要

2、冲洗洁净，并用体积分数为70的酒精消毒制作发酵瓶装入葡萄汁后留有l/3的空间(目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速生殖，耗尽氧气后再进行酒精发酵；其次，防备发酵过程中产生的CO2造成发酵液的溢出)如用带盖的瓶子制葡萄酒，每隔12h左右将瓶盖拧松一次(注意不是翻开瓶盖，防杂菌污染)，此后再将瓶盖拧紧(目的:排出节余的气体放炸裂)装入葡萄汁关闭充气口(无氧环境和放杂菌污染)(因发酵过程中，随着酒精度数的提高，葡萄酒表现深红色红葡萄皮的色素也进入发酵液)酒精的判定:与酸性重铬酸钾呈灰绿色比较组2mL白酒3mL/L的H2SO43滴混匀实验组2mL发酵液试管甲2mL发酵前液3mL/L的H2SO43滴混匀试管

3、乙2mL发酵后液醋酸发酵果醋注意：需合时通入空气高考劝告：由于醋酸菌和乳酸菌属于核生物，因此在利用者两微生物时，其环境中必然能加入抗生素。酵母菌在营养和氧气充分进行出芽生殖（一）培养基的基本知识微生物的实验室培养培养基的营养成分营养物质碳源氮源水分无机盐生长因子高考劝告钟定义作用主要根源及所波及的微生物凡是能供应微生物所需碳元组成生物细胞、生物体及细胞代谢产物，无机化合物:C02、NaHC03等（自养生物)素的物质有些能为异养生物供应能源有机化合物：糖类、脂质、花生粉饼、石油等（异养生物）凡是能供应微生物所需氮元合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物，也无机化合物:N、NH、铵盐、硝酸盐，自养生物有

4、机化合23素的物质可为异养微生物供应能源物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等，异养生物生物体内含量最高的组成成优秀的溶剂、细胞生活及生化反响的介质、培养基、大气、代谢产物分，分为联合水和自由水参加物质运输及参加生化反响的反响物为微生物供应大量除C、H、0细胞组成成分，生命调治物质,自养菌的能培养基、大气等环境以外的各样元素源或其余营养根源,酶的激活剂微生物正常生长生殖,必不能可作为酶与核酸等的组成成分维生素、氨基酸、碱基等少的微量有机物自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同样（1)自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可依照培养基中营

5、养物质判断微生物的代谢种类。(2）含氮无机物不单好给自养微生物供应氮源，也能作为能源物质，供应能量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源.2培养基的配制原则目的明确.要依照微生物的种类、培养目的等选择原料、配制培养基。(2）营养要协调。各样营养物质要保证适合的浓度和比率。营养物质比率过低，不能够知足微生物生长；浓度过高则会控制微生物的正常生长。营养物质的浓度比（如C/N）还会直接影响某些微生物的代谢产物,如谷氨酸生产,C/N=41时，菌体大量生殖，谷氨酸产量少;而C/N=31时，菌体生殖受控制，但谷氨酸合成量大。(3）pH要适合。不同样微生物生长所需pH不同样。如细菌pH保持在6。57。5之

6、间；放线菌保持在7.58。5之间;真菌应保持在5.06。0之间。学必求其心得，业必贵于专精3培养基的分类及作用：培养基种类好多，作用也不同样。依照不同样的分类标准,可将培养基分为不同样种类.差别标准培养基种类特点用途及实例液体培养基不加凝集剂工业生产物理性质半固体培养基加凝集剂，如：琼脂察看微生物的运动、分类判定、珍藏菌种固体培养基微生物分别、判定、活菌计数、化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确（用化学成分已知的化学物质配成）分类、判定培养基中加入某种化学物质，以控制不需要的微生物培养、分别出特定微生物（如：培养酵母茵或霉菌,选择培养基可在培养基中加入青

7、霉素；培养金黄色葡萄球菌,的生长，促进所需要的微生物的生长可在培养基中加入高浓度食盐)用途鉴识不同样种类的微生物，如可用伊红一美蓝培养基依照微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂鉴识培养基鉴识饮用水或乳制品中可否有大肠杆菌(若有，茵落或化学药品呈深紫色,并带有金属光彩)说明:病毒为非细胞构造的生物体,专营活细胞寄生，眼前不能够利用人工培养基来培养,需接种在动植物组织中才能增殖。常用于培养病毒的是活鸡胚。加入培养基中的凝集剂(如琼脂)，一般不能够被微生物利用,只起到凝集作用。选择培养基一般只生长拥有特定的微生物，鉴识培养基能够存在其余微生物，而且能鉴识特定的微生物。注意：选择培养基的选择方法

8、(1）在培养基中加入某种化学物质。好似，加入青霉素能够分别出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐能够获得金黄色葡萄球菌。这里的加入是在主要营养成分完满的基础上加入。(2）改变培养基中的营养成分.好似缺少氮源时能够分别出固氮微生物；石油作为独一碳源时，能够分别出消项目消毒灭菌除石油污染的微生物。改变微生物的培养条件。好似，将培养基放在高温环境下培养，能够获得耐高温的微生物。(二）灭菌技术1无菌技术的见解在微生物培养中,获得纯净培养物的重点是防备外来杂菌入侵,其主要技术是无菌操作。无菌技术是指经过必然物理、化学的手段，防备实验室培养物被外来微生物污染.无菌技术主要围绕怎样预防杂菌污染张开的.2消毒、灭菌

9、的方法见解常用方法应用范围巴氏消毒法:7075水中煮30min或在80水中煮15min一些不耐高温的物体如牛奶使用较为平易的物理或化学方法，仅杀死煮沸消毒法：在100水浴中煮沸56min一般物品物体表面或内部一部分对人体等有害的微化学药剂消毒法:用乙醇、氯气、漂白粉、KMnO等药剂来4可用来对环境、双手和衣物等消毒生物(不包括孢子和芽孢)杀死或控制细菌生长或生殖紫外线消毒法：30W紫外灯照射30min接种室灼烧灭菌法：酒精灯火焰接种工具如接种环、接种针等使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的干热灭菌法：在160170加热12h如玻璃器皿(吸管、培养皿）和金属用具微生物，包括芽孢和孢子高压蒸汽灭菌

10、：压力为100kPa，温度为12l的条件下,培养基及容器的灭菌保持1530min注意：无菌操作是微生物培养过程中，防备杂茵污染的重点步骤.消毒只能消灭或控制营养体的活动,而不能够达到完整灭菌。酒精消毒用体积分数为70%的酒精收效最好，因浓度学必求其心得，业必贵于专精过高，会使菌体表面蛋白凝集成一层保护膜,乙醇分子不能够进入其中;浓度过低，杀菌力减弱.而灭菌除杀死营养体外，还必定杀死芽孢和孢子.灭菌消毒的原理，就是经过必然理化手段，使病原茵蛋白质变性，失去生命活性.(三）微生物的纯化培养技术1常用细菌培养基-蛋白胨培养基配制流程：注意：溶化琼脂时要控制火力的大小其实不断搅拌，免得培养基溢出或烧焦

11、；注意：据配方计算配加热过程中部分水分蒸发，待琼脂制必然体积培养基完满溶化后应补加蒸馏水，以保持时各成分的用量溶液的浓度注意：分装至试管时培养基的高度不要高出试管高度的1/5注意：可用高压蒸汽灭菌法用干热灭菌法时温度160170(不能够高出180，否则易惹起报纸等焚烧)一般是培养基先灭菌再倒平板，也可先倒平板,再灭菌计算称量溶化（调PH）装瓶灭菌倒平板注意：注意：注意：牛肉膏较粘稠，应玻棒挑取，在称由于不同样微生物适合倒平板时，烧杯口要经过酒精灯火焰灭菌。量纸上称量的pH不同样，因此在熔平板冷凝后要将平板倒置，以保证拿放方便，同时预防水牛肉膏蛋白胨易吸潮，动作要快速化后，必定用NaOH以利微生

12、物生长，也可防备皿盖上凝集的水滴滴入培养或HCl来调治pHpH；其次防备细菌透过皿底、皿盖的空隙，落在培养基倒平板时，不能够将培养基溅在皿底与皿盖之间，以防备杂污染培养基纯化大肠杆菌原理:在培养基大将细菌稀释或分别成单个细胞，使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。微生物接种方法：平板划线法：平板划线法中细胞的分别和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的划线和搬动过程中.在线的开始部分,微生物经常连在一起生长,随着线的延长，菌数渐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落.（如图）(2）稀释涂布平板法:10倍系列稀释操作划线操作时注意：（1）用接种环取菌种以前、每次划线以前和划线结束都要进行灼

13、烧灭菌,灼烧后要在酒精灯相邻冷却后再操作;(第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。每次划线以前：杀死前一次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接根源于前一次划线的尾端。划线结束后：杀死接种环上节余的菌种，预防细菌污染环境和感染操作者)2）划线时不要划破培养基，若是采用分段划线法操作从第二次操作应总在前一次划线尾端开始，首尾区不能够相连；3)操作必定向来在酒精灯火焰旁进行。涂布操作时注意：学必求其心得，业必贵于专精1)配制系列梯度稀释液时,所用的试管和移液管均需灭菌，必定用无菌水配制；2）涂布器用70%的酒精消毒,节余酒精在烧杯中滴尽，沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰引燃。不要将过热的涂

14、布器放入盛有酒精的烧杯中,一面引燃其中的酒精;（3）配制系列梯度稀释液和转移菌液以及涂布过程等必定都在酒精灯火焰旁进行,移液管头不能够接触任何物体。菌种的储藏关于频频使用的菌种，能够采用临时珍藏的方法。关于需要长久储藏的菌种,能够采用甘油管藏的方法。注意:菌种珍藏的原理是：低温、干燥和间隔空气,使微生物代谢能力和生殖能力降低。不同样菌种的珍藏方法因不同样菌种而异。需氧型，必定低温有氧，而厌氧型必定低温无氧;腐生微生物可供应牛肉膏蛋白胨培养基,而寄生微生物需供应活体组织等非人工培养基,如病毒需供应活鸡胚。(三）微生物的精选与计数（以“土壤中分解尿素的细菌”为例）精选菌株菌落计数原则：人为供应有利

15、于目的菌生长的条件，同时控制或阻拦其余微生物的生长培养基的成分：尿素作为独一的氮源(选择培养基、固体培养基)比较：将不接种的培养基置于同样温度恒温箱培养(目的:证明培养基可否被杂菌污染)统计茵落数量的方法：显微镜直接计数法原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算必然容积样品中微生物数量方法：用计数板计数。缺点：不能够差别死菌与活菌。间接计数法(活菌计数法)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，根源于样品稀释液中的一个活菌，经过统计平板上的菌落数，就能推断出样品中大概含有多少活菌。计算公式：每克样品中的菌株数(CV)M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落

16、数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。操作：设置重复组，增强实验的说服力与正确性。同时为了保证结果正确，一般选择菌落数在30300的平板进行计数。菊花的组织培养温度：1822光照：在初期菊花的组织培养需光照，月季的花药培养不需光照(有利愈伤组织形成)，二者后期均需要光照(有利叶绿素形成和光合作用)注意：生长素和细胞分裂素的使用使用次序不同样结果不同样(先生长素，后细胞分裂素：有利于细胞分裂，但不分化资料：植物的种类、年纪、储藏时间消毒原因：大部分来自田间，带有大量病毒、细菌菊花茎段消毒：所用消毒剂为体积分数为70的酒精和质量分数为0.1的氯化汞溶液，所使用的冲洗液是无

17、菌水。注意：不同样植株或同一植株的不同样部位，所采用的消毒剂种类及浓度可能不同样；先细胞分裂素，后生长素：细胞既分裂也分化同时使用：分化频次提高)用量比率不同样发育方向不同样(高：利用根的分化，控制芽的形成低：利用芽的分化，控制根的形成适中：促进愈伤组织的生长)培养注意：培养一株完先进行生芽培养养，若是次序颠就不好引诱生芽制备MS培养基外植体消毒接种愈伤组织胚状体(或不定芽)试管苗移栽成分：无机物(大量元素、微量元素)、有机脱分化再分化原因：因试管苗光合方法：向来在酒精脱分化阶段只分裂；人工种子制备阶段物：糖类(最常使用的糖是蔗糖，供应灯火焰旁进再分化阶段既有分裂也有分化不良环境耐受学必求其心

18、得，业必贵于专精果胶酶在果汁生产中的作用一、果胶酶的组成和作用：包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等。果胶酶能分解果胶，崩溃植物的细胞壁及胞间层。其实质是果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸.注意：果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，不是一种酶.植物、霉菌、酵母菌等细胞均能产生果胶酶，但过去动物细胞不产生果胶酶。在植物细胞工程中，应用纤维素酶和果胶酶来损坏细胞壁,获得原生质体。二、研究温度对果胶酶活性的影响(1）实验原理：果胶酶活性受温度影响,处于最适温度时,活性最高；低于或高于最适温度，酶活性碰到控制。即果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小成正比.设计思路：设置一系列梯度温度，从中选出酶

19、活性最高的温度，尔后再以该温度为中心，减小温度梯度向两个方面各设置梯度温度，以进一步确定最适温度范围。所选择的温度只能凑近最适温度，但不用然就是最适温度。（3)实验操作流程及注意事项设计实验方案着手实验记录实验数据得出结论确定温度梯度商议控制温度的方法和举措确定水果的种类确定制备果汁的方法确定实验用的水果量确定果胶酶的量商议测定果胶酶活性的方法制备水果泥注意：苹果、橙子和葡萄等水果都能够作为反响物，水果不用去皮。如用苹果为原资料，一般的苹果加水100200mL的比率进行搅拌，获得稀的苹果泥制备果胶酶原因：将果泥和果胶酶分装在不同样的试管中恒温办理，能够保证底物和酶在混淆水果泥、果胶酶分别水浴保

20、温预防了果泥和果胶酶混淆时影响混淆物的温度，进而影响果胶酶活性的问水果泥、果胶酶混淆水浴保温原因：让果泥和果胶酶有充分的反响时间过滤出果汁注意：过滤果汁时漏斗中应放置滤纸经过测定滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的高低原因：记录果汁量果胶酶将果胶分解为小分子物质，小分子物质能够经过滤纸，因此苹果汁胶酶的催化分解果胶的能力。在不同样的温度和pH下，果胶酶的活性越大，苹改变不同样温度后重复上面实验(也可同时进行不同样温度的实验)自变量：温度(应控制为独一)比较：互相比较温度/102030405060没关变量：果泥量、果胶酶的浓度和用量、水浴记录表格设计pH等所有其余条件(应控制为同样)果汁量/

21、mL注意：每个研究实验的设计,都要依照实验设计的一般原则,特别是单因子变量控制原则。每个研究实验的设计思路希是大梯度差值搜寻最适范围,再小梯度差值选出最适温度、pH或酶用量。学必求其心得，业必贵于专精若是随酶浓度增加，果汁体积也增大,说明酶用量不足；当酶用量达必然值时，再增加酶用量，果汁体积不变,则说明这个值就是酶的最合用量。若是变量（温度、pH、酶浓度）梯度无法知足实验，即出现过高、过低等现象，则应实时调整实验。血红蛋白的提取和分别一、实验原理：蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别,由此提取和分别各样蛋白质。1凝胶色谱法（分派色谱法）:（1）原理

22、：分子量大的分子经过多孔凝胶颗粒的空隙,行程短,流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,行程长，流动慢。(2）凝胶资料:多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖.(3）分别过程：混淆物上柱洗脱大分子流动快、小分子流动慢收集大分子收集小分子洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液,促进蛋白质分子的差速流动。（4）作用：分别蛋白质，测定生物大分子分子量，蛋白质的脱盐等.2缓冲溶液(1)原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3NaHCO3,NaH2PO4/Na2HPO4等)，调治酸和盐的用量，可配制不同样pH的缓冲液.（2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液pH的扰乱而保持pH牢固。3凝胶电泳法:1

23、）原理：不同样蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同样，在电场中碰到的作使劲大小、方向、阻力不同样，致使不同样蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同样.(2)分别方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。（3)分别过程：在必然pH下，使蛋白质基团带上正电或负电;加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质SDS复合物，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小.二、实验步骤及注意事项红细胞的冲洗样品办理血红蛋白的释放分别血红蛋白溶液粗分别透析凝胶色谱柱装填过程：收集血样(加柠檬酸钠防备血液凝集)低速短时离心(防备白细胞积淀)吸取血浆生细胞粉碎)迟缓搅拌(防备红细胞粉碎释)低速短时离心重复冲洗三次上清液中无黄色

24、冲洗洁净。目的：除掉杂蛋白过程：加蒸馏水加40体积的甲苯磁力搅拌器搅拌目的：红细胞粉碎，释放出血红蛋白注意：加入蒸馏水后红细胞液体积与原血液体积要同样。加入甲苯的目的是溶解细胞膜，有利于血红蛋白过程：离心（2000r/min）目的：分别血红蛋白和其余杂质结果第1层(最上层)：甲苯层(无色透明)第2层(中上层)：脂溶性物质的积淀层第3层(中基层)：血红蛋白的水溶液层(红色透明液体)第4层(最基层)：杂质的积淀层(暗红原理：透析袋能使小分子自由出入，而将大分子储藏在袋内过程：血红蛋白溶液装入透析袋将透析袋放入磷酸缓冲液中透析12h目的：除掉样品中分子量较小的杂质或用于改换样品的缓冲液步骤：固定(色

25、谱柱垂直固定在支架)装填(将凝胶悬浮液一次性装填)冲洗(目的：使凝胶装填紧迫求：亲密、平均(否则，会在色谱柱内形成无效的空隙，使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空流动序次，影响分其余收效)装填成功检测：凝胶是一种半透明的介质，可在凝胶柱旁放一支与凝胶柱垂直的日光灯，检查凝胶加入大分子的有色物质，察看色带搬动可否平均、狭窄、平展。如纹路或是气泡，轻轻敲打学必求其心得，业必贵于专精胡萝卜素的提取一、胡萝卜素基础知识原理：依照胡萝卜素易溶于有机溶剂的特点，可采用有机溶剂萃取的方法来提取胡萝卜素。立刻粉碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使胡萝卜素溶解在有机溶剂中，再蒸发出有机溶剂可获得。2萃取剂的选择