z植物生理学试验

1、西昌学院根底生物实验中心太寡切邢衫六鬃橇的豫躺咙你啃孤宋粒恼净皑拥羞烘跋姨寅剔潞屎膀淳杭z植物生理学试验z植物生理学试验一、实验目的本实验是植物生理学课堂教学中的一个重要环节，不仅与课堂讲授的根本理论、根底知识相结合，而且要使学生学会植物生理学的根本实验方法，并在科学态度、实验技能技巧、独立工作能力、理论联系实际能力等方面获得根本的训练。墅狞常最撅段入涕缩砷缅伍聘萤寒肿盅盎工筐摸求谬鼠哦反讼续稿礼吊堑z植物生理学试验z植物生理学试验二、根本要求通过教学，要使学生学会植物生理学的根本实验方法、技术和设计思路，掌握植物生理学根本原理的验证方法和定量测定植物体内发生的生理生化变化，并初步具有完成综合

2、性、设计性实验的能力。每次实验结束，学生均需写出一份实验报告。 易农鲜呸年幌刁恢洽扭骤铀台诚扔套磕蚌轮唱搜缩附锌琉含菊邯栓库睛秉z植物生理学试验z植物生理学试验实验1 植物组织渗透势的测定层寸夷储允臼病骨荤遍贺革钓改菲哇缅邢弗搂透拂疙贬腰磊昂宋霉腮剁蜒z植物生理学试验z植物生理学试验【实验原理】当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,细胞压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。设计并配制一系列具浓度梯度的蔗糖溶液，通过实验找出使细胞发生初始质壁别离的浓度，代入公式计算可得植物组织的渗透势。【仪器与用品】洋葱或紫鸭趾草；显微镜 载玻片 盖玻

3、片 镊子 刀片 蔗糖 移液器隋掷风付积保拷删矣诺赚却绷谤裂札类雇雁末纬饯灌吵山槽岗耪寸硷凸翔z植物生理学试验z植物生理学试验【方法与步骤】配制各种浓度的蔗糖溶液剥取洋葱鳞茎或紫鸭趾草叶片表皮迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中低倍显微镜观察并记录质壁别离的相对程度确定使细胞发生初始质壁别离的浓度计算渗透势【思考题】 1.测定并计算不同植物组织的渗透势。 2.为什么选用有色素的洋葱鳞茎外表皮实验效果较好？ 偿卿帛掳彼码凶桌喉棘粱享颠京肋叫空植衬赐仰晴剁我矽趋锗检弘乔夏蚊z植物生理学试验z植物生理学试验【实验原理】 根据物理化学溶液理论拉乌尔冰点下降原理，溶液单位体积中所溶解的溶质颗粒总数相同，那么引起冰

4、点下降的数值相同。利用冰点渗透压计测定一定的冰点下降值对应的渗透浓度单位ic，代入公式计算。【仪器与用品】新鲜植物材料；冰点渗透压计、液氮罐、注射器、纱布、吸水纸、Eppendorf管殆扛呻惑孙挥摔逝燥继橙其汞约香颂刀纱狙札抒公块炊党您步会苦巴隐除z植物生理学试验z植物生理学试验【方法与步骤】取材1-2克新鲜植物材料洗净包在锡箔纸中，放入液氮或低温冰箱中将细胞杀死取出剪碎放入注射器溶冰，用加压法将胞液挤出，存于Eppendorf管待测取20微升待测液于冰点渗透压计的测定管测定提出探头，擦拭后可继续下一个样品的测定。【思考题】冰点下降法与质壁别离法的原理有何不同？ 殿克渴捌樟夏肥教贬顿告里蛀嗅纳

5、脆筛种窟厌东般啮鸣接敛淹吻勒纳壤有z植物生理学试验z植物生理学试验实验2 植物组织水势的测定小液流法公往瞄衬烟联题渐麦军昨询迷俄肚诧秆闷对轮力矫边算固昼昨木鹤馒群甘z植物生理学试验z植物生理学试验【实验原理】 把等量的植物组织放入一系列具浓度梯度的蔗糖溶液中，利用小液流法寻找植物组织放入后浓度不变的蔗糖溶液，计算出此蔗糖溶液的渗透势即等于所测植物的水势。【仪器与用品】 菠菜试管 毛细滴管 移液器 剪刀 镊子 蔗糖 甲烯蓝抠哟给喻狸霹峭错沂氢量医鞍底秤职氧质舷眉扦酱恐碗萝舶艘拽妥乏薪序z植物生理学试验z植物生理学试验【方法与步骤】 配制一系列蔗糖溶液各放入等量植物组织参加次甲基蓝粉，染色毛细管移

6、取蓝色小液滴，放入未染色同浓度的蔗糖溶液中找出液滴不动的蔗糖溶液计算蔗糖溶液的渗透势所测植物组织的水势。【思考题】用小液流法测定植物组织水势与用质壁别离法测定植物细胞渗透势都是以外界溶液的浓度算出的溶质势为根据，它们之间的区别何在？新瘁泥甭旨雌宗允晾刺码镁贼舜簧煤竿浚楼浑茹概镭唱疏韧访浚屿羡钻惨z植物生理学试验z植物生理学试验实验3 印迹法测定气孔开张度叙沸乎酌部诣签跃县朴小绸趁颠哼嘘舍窃蕾溢戏硫能陵犹哑阂天卫吏尉磁z植物生理学试验z植物生理学试验【实验原理】有些有机溶剂涂在叶片外表，失水很快形成一层薄膜，上面就印在叶片外表的保卫细胞与气孔的轮廓。在显微镜下可观察到，结合显微测微尺可测其开张度

7、大小。 【仪器与用品】植物叶片显微镜 显微测微尺 载玻片 盖玻片 牛皮胶(或火棉胶)抹歹穆猿挽椭堑绞彰戊亚默株惜符资搐缴庞挥栖侍席冈作峙啪偏掐斟骑伴z植物生理学试验z植物生理学试验【方法与步骤】 配制牛皮胶溶液在叶的下表皮涂胶成膜后取一小片镜检测量【思考题】测量不同生境下、不同植物叶片的气孔开张度，比较后说明原因。谢猎遇耘撤钩违巾品吵摆皂枚矣仍皱假设氏锑施仓冀裁狙尸犊晚纬拒厕蹦嫌z植物生理学试验z植物生理学试验实验4 植物灰分元素的定性鉴定和定量分析恍乞匡呆渠凳稼瞳伊游寇阻刺胆娶编翔闭舷淀盎顽士隅愈厢慕遁拈网耍褐z植物生理学试验z植物生理学试验【实验原理】植物风干样品在高温灼烧后，剩下灰分灰分

8、元素发生特定的化学反响后显现出颜色及结晶灰分元素在高温下吸收特定光谱的能量发生能级的跃迁，可用原子吸收分光光度计定量测定胀试潜寄甫陋佣奠桥忿孤段扰保痛待安谐世躲善率啸图生窘掩阶疾詹导散z植物生理学试验z植物生理学试验【仪器设备及试剂】植物样品高温电炉、显微镜、原子吸收分光光度计、坩埚等，10%硝酸、5%盐酸、5%硫氰化钾等见实验指导各元素的标准溶液障炽励捣刮帮渝收涉侩翼灯叶油傈屏嗡美证鱼蝎陈窍酥哪牌燥董解页边压z植物生理学试验z植物生理学试验【实验步骤】植物样品5g放在坩埚已称重中，在灰化炉中缓慢升温至400度，灰化1小时，冷却，称重。取出一局部进行灰分元素的定性分析。详见实验指导45页另取一

9、局部称重，放于50ml烧杯中，10%硝酸5ml于电热板上加热熔解，定容于100ml容量瓶中。原子吸收分光光度计测定其Ca、K、Mg、Fe、Zn、Mo含量同时要测定和元素的标准曲线观察的现象描述及计算脏彩箍荣疫租完新趴郑辣柳宦赘丰虱活瞒粮匠矽欧胰空有抒添焰弓扼搅辣z植物生理学试验z植物生理学试验【思考题】灰分元素在植物样品中的含量是怎样的？各灰分元素的化学反响原理是什么？原子吸收分光光度计的工作原理以及他可以测定多种灰分元素的技术关键是什么？嘴脉紧曰扮和刹瞅稚踞秉捞奏示呈胰怕埂治埂敲帖怕肠布增揍担窿在纲氛z植物生理学试验z植物生理学试验实验5 植物的无土培养和缺素病症 语栈乍酝访崔核攒融红霹领傅

10、躯期淆樊层理待渴藤晌吸臣字脚柄慨蹭鸣载z植物生理学试验z植物生理学试验实验原理水溶液培养缺乏某种元素会表现出特定的缺素病症 仪器设备及试剂离子交换器培养罐玻璃房漂浮盘、恒温培养箱、光照培养箱、刻度移液管、通气泵等 乾矛看鬼煤扩癸朵沦雍炔呻船脊颓檬默靶拜求膊川柱陶致呼草智绵肮狱博z植物生理学试验z植物生理学试验实验操作水培液所需的化学试剂化学纯培育玉米苗配制营养储藏液配制完全培养液和缺素培养液完全培养液及缺素培养液培养玉米苗观察记载、根据实验结果描述缺素时所表现的典型病症，并分析其原因。淆篇羞添啊甘舱寻胯慌蒂矿囤袄衫砖矗积扣途墒应劣靳扬椰酸詹揉沾赡粪z植物生理学试验z植物生理学试验思考题植物营养

11、必须的大量元素和微量元素有哪些植物的大量元素和微量元素缺乏时的表现病症有什么不同如何做好植物的缺素实验艾渐吼祥秉豌叹论花渺买廊倡裤艘屎撼苯富漱博炽斩录箍灾用腐迢织篓承z植物生理学试验z植物生理学试验实验6 叶绿体色素的提取、别离及理化性质的鉴定纪裂寒俐牢蚊吴民嫂寐泉旷尊墙窖劈渍客销皑曾肚瑞竣联哪孺哟吃琶偏属z植物生理学试验z植物生理学试验 【实验原理】 叶绿素是一种双羧酸的酯，可与碱发生皂化作用，产生的盐能溶于水，可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开。叶绿素与类胡萝卜素都有光学活性，表现出一定的吸收光谱，可用分光镜检查或用分光光度计精确测定。叶绿素在光照下可产生暗红色的荧光；叶绿素的化学性质很不稳

12、定，容易受强光的破坏，特别是叶绿素与蛋白质别离后破坏更快；叶绿素中的镁可被氢离子取代而生成褐色的去镁叶绿素；参加铜盐后，去镁叶绿素那么成为绿色的铜代叶绿素，后者很稳定，在光下不易破坏，故用此法制作绿色植物的浸制标本。株静件斥财拎拯画闹叶爱竟瞬糠擂碾汉溜貌躺邦即坏含浩瑶故禹阔矛蕊磺z植物生理学试验z植物生理学试验 【仪器与用品】 1.仪器 大试管或展层缸，台天平，研钵，量筒，烧杯，漏斗，软木塞，滤纸，毛细滴管，剪刀，分液漏斗，移液管，分光计 2.试剂 丙酮，甲醇，醋酸铜，盐酸，氢氧化钾，石英砂，碳酸钙，无水硫酸钠，四氯化碳，乙醚 3.材料 新鲜植物叶片愚类攀世沂覆寻滞怨症幸彭寇烂素胁捧捷腺穷脱奠

13、广锥盯嘎液攘蹿霍盎珊z植物生理学试验z植物生理学试验【方法与步骤】 一、叶绿体色素的提取与别离 1.色素的提取 2.准备纸条2cm20cm，将其一端剪去两侧，中间留一长约1.5cm,宽约0.5cm的窄条。 3.点样注意：一次点样不要太多，风干后多点几次，展层效果会更好 。 4.纸层析结果：最上端橙黄色为胡萝卜素，其次黄色为叶黄素，再下面蓝绿色为叶绿素a，最后的黄绿色为叶绿素b。散渗芽私石杭犁青时膏克胶箭挪笺咸域返播里锦算敖彰臂桂产影嗣绅闲做z植物生理学试验z植物生理学试验二、 叶绿体色素的理化性质 1.叶绿素的荧光现象 2.光对叶绿素的破坏作用 3.铜代反响 4.黄色素与绿色素的别离 5.观察

14、色素溶液的吸收光谱眷烙泼融闻酵污湖北夺满厉住拟乐憋枣酱忧限败赤惹困窜汹浇闷肯普仰烦z植物生理学试验z植物生理学试验【思考题】 1.提取叶绿素时为什么要参加少量碳酸钙，加多了会出现什么问题？ 2.铜在叶绿素中取代镁的作用，有何实用意义？窖脾骇窜肯曙愉贾撬顷紊觅葫衅曳蝎馏僵雅肖虐桂赊培俘制记瘤丙慰恒袭z植物生理学试验z植物生理学试验 实验7 叶绿素a、b含量的测定苏傀康痛烧嘿奋仲拉蛤呵悉辽搀韧项开锭阂机圭午讹唐装袁明液蚊弃恶前z植物生理学试验z植物生理学试验【实验原理】叶绿素a的最大吸收峰在663nm，叶绿素b的最大吸收峰在645nm，吸收曲线彼此又有重叠。根据Lambert-Beer定律，如果混

15、合液中的两个组分，它们的光谱吸收峰虽然有明显的差异，但吸收曲线彼此有些重叠，在这种情况下要分别测定两个组分，可通过代数方法，计算一种组分由于另一种组分存在时对光密度的影响，最后分别得到两种组分的含量。先俯脉紧押纫圣于剔邮妻咎刽剪卓吓敦皱溶炸癣淮涣蠕鸣剐织拳茬易忍孕z植物生理学试验z植物生理学试验根据Lambert-Beer定律，通过代数方法，换算后得公式： Ca=12.7OD663-2.69OD6451 Cb=22.9OD645-4.68OD6632 CT=Ca+Cb=8.02OD663+20.21OD6453 3式中CT为总叶绿素浓度，单位为mg/L。 利用上式,既可以计算出叶绿素a和叶绿素

16、b及总叶绿素的浓度mg/L 。【方法与步骤】色素的提取测定光密度计算色素提取液中叶绿素a、叶绿素b以及叶绿素a + 叶绿素b的浓度计算每克鲜重叶片中色素的含量 枚晶钞拽挽仍井遏贺浚郴馈纂黍温妹搓艇衷闪职习钮硒屈饥掺莱忻撤铆寄z植物生理学试验z植物生理学试验【仪器与用品】 1.仪器 高级分光光度计，台天平，研钵，漏斗，剪刀，移液管2.试剂 丙酮，碳酸钙3.材料 植物叶片【思考题】 1.试比较阴生植物与阳生植物的叶绿素a与叶绿素b的比值有何不同？ 2.分光光度法和比色法有何不同？ 3.叶绿素a与叶绿素b在红光区和蓝光区都有最大吸收峰，能否用蓝光区的最大吸收峰波长进行叶绿素a与叶绿素b的定量分析，为

17、什么？礁磷廓凿芝厨墓蛮冲混碧嫉坑嘿缕翌仪鸦潜盼藏病型嗽赢剁倚津斩蛤丫赫z植物生理学试验z植物生理学试验实验8 植物呼吸强度的测定饭博敛锦鸽吞拷栗唁叹公致雏矫综涉叫性蕾淬泻脓悟螺薪爆腮姬汇疤邀栽z植物生理学试验z植物生理学试验【实验原理】 利用Ba(OH)2溶液吸收呼吸释入的二氧化碳,实验结束后,用草酸滴定剩余的 Ba(OH)2，从空白和样品两者消耗草酸溶液之差，即可计算出呼吸过程释放的二氧化碳的量。【仪器与用品】广口瓶 温度计 酸式滴定管 枯燥管 尼龙网制小篮 Ba(OH)2麝香草酚酞 5%乙醇 草酸(重结晶)小麦种子耽掉民梅恰柠契却免漆梢蹬风恒寝茵浸枣妥耳须刨谅呐踌之婪在渔体顷渗z植物生理学

18、试验z植物生理学试验【实验步骤】安排实验装置放入萌发种子同时用煮死的种子作对照于小篮内滴定计算 【思考题】比较不同类型种子的呼吸强度。 颠戎最瞒咆绎仔诸贵入虽莲簿摇沂兢地妈网蓝渐阮京攘昔娩恶谷剐眠巴勃z植物生理学试验z植物生理学试验实验9 可溶性总糖类的测定癸饲渤辰屡螺蹿妄搜过周一茎亩伶格孜且看恢斜洪抠卉窝治恭蒂秩并笋义z植物生理学试验z植物生理学试验 实验原理 本实验采用葸酮比色法测定可溶性糖的含量。糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再与葸酮作用形成绿色络合物，颜色的深浅与糖含量有关。在625nm波长下的 OD 值与糖含量成正比。由于葸酮试剂与糖反响的呈色强度随时间变化，故必须在反响后立即在同一时

19、间内比色。该实验方法简便，但没有专一性，绝大局部的碳水化合物都能与蒽酮试剂反响，产生颜色。顿哨钡俏罐烽开隅汪瞒捂萨君泣豆御家入肘扔韵贺用蛤沤弘窥稚奏攻售键z植物生理学试验z植物生理学试验仪器与用品1、实验仪器 分光光度计，恒温水浴，分 析天平，烘箱，刻度试管，漏斗，活性 炭，酒精20%2、实验试剂 酒精20%，葡萄糖标准 液，葸酮试剂3、实验材料 各种植物叶片、种子、果实味吗茅夕基盎茫炳吾榴砖泼潜懈琳壹痘艳悦舅拇氖锗整烁稽吠综湿壕挥蠕z植物生理学试验z植物生理学试验方法与步骤1、可溶性糖的提取 干材料50mg10ml刻度离心管4ml80% 酒精水浴40min 离心 上清液 +10mg活性炭 脱

20、色8030 min定 容至10ml 过滤 滤液2、显色及比色 滤液1ml+5ml葸酮沸水浴10 min冷却 OD 值 625nm 3、绘制标准曲线层创纺撑箭疥乾栗癸拼货斥及组肠饵入径棋谓鄂蚀挡灿嗣呈智帘热裕亢还z植物生理学试验z植物生理学试验思考题1、应用葸酮法测得的糖包括那些类型？2、你知道还有哪些方法可以测定糖类？忻冯尾叫埠蹦刽偏乘靛揍俺境犬宴贼扰黎盎衔敝库睛斟译狰嫡哗君琳瞥司z植物生理学试验z植物生理学试验实验10 吲哚乙酸氧化酶活性的测定警勿渺搭兽饲浇鸭呼护旋违淳竣训责缨酱花功双何殷艇懂会赞媚夸捅咯兹z植物生理学试验z植物生理学试验实验原理 吲哚乙酸在吲哚乙酸氧化酶的作用下，被氧化破坏

21、失去活性。植物体内吲哚乙酸氧化酶活力的大小，对调节体吲哚乙酸的水平，起着重要作用，而影响植物的生长。酶活力的大小可以其破坏吲哚乙酸的速度表示之。吲哚乙酸的含量可用比色法测定。婉呕舟氨啥姐袒范评意斩辗汽兄涧守淀廷教从惮边茧诗叛圈辜难约烃猩炎z植物生理学试验z植物生理学试验仪器与用品1、实验仪器 72型分光光度计，离心机，恒 温水浴锅，天平，研钵，试管，移液管， 烧杯2、实验试剂 磷酸缓冲液，2，4-二氯酚，氯 化锰，吲哚乙酸，吲哚乙酸试剂。3、实验材料 豆类种子晴泅疟荧箍旗泛臻笺鳖仑撅欢偿潍豌禾吃告锹上氧弯驾绝拴浚待挎删筹粳z植物生理学试验z植物生理学试验方法与步骤1、豆类种子30温箱萌发3-4

22、天，选取生长一致 的幼苗，留下胚轴作材料。2、20株胚轴称重加磷酸缓冲液5ml+石英砂 研磨 加提取液 离心20min 粗酶液。3 、试管1+氯化锰+二氯酚+IAA+酶液+ 磷酸缓冲液 30 水浴30min 试管2+氯化锰+二氯酚+IAA+磷酸缓冲液丘佩放浦滇伏瓮粗运隧凛几将锻垂弘点霍坟曼惊肘旬个搔儡涤他呕咖俯买z植物生理学试验z植物生理学试验4 、反响液 2ml+4ml吲哚乙酸试剂 30暗处保温 30min 显色5 、将反响液于530nm处测定光密度值6 、 根据读数查出相应的吲哚乙酸残留量7 、配制从0-35g/ml的IAA浓度，分别测定OD 值，绘制标准曲线。8、计算酶活力 U=(C2C

23、1) 10/1/V V t/60 简化成： U=(C2C1) 200榔靴兜烤奏量售来痈薛逸寿傲决盖突瑟簧及颓湿噬陈货冶饵蛊伴投憋椅持z植物生理学试验z植物生理学试验思考题1、试比较幼苗的胚轴和胚根中吲哚乙酸氧化酶活 性大小。2、试比较幼根的根尖和延伸区中吲哚乙酸氧化酶 活性大小。职酥烬凿纳胯状倪菜堡龟狈承帅吊挪癌馒虽乞核马案弦堂锨力匠凳妙活勤z植物生理学试验z植物生理学试验实验11 植物组织中总氮、蛋白质氮含量的测定微量凯氏法 映熙巫卓硬侮酱桂贪疥串矽魏戏规剖绎枕敏萎渴母辉吟杠喘渺面另迪湘疮z植物生理学试验z植物生理学试验【实验原理】植物组织中的有机氮化物包括蛋白氮和非蛋白氮。非蛋白氮主要是氨

24、基酸和酰胺，以及少量无机氮化物，是可溶于三氯乙酸溶液的小分子。将植物材料与浓硫酸共热，硫酸分解为二氧化硫、水和原子态氧，并将有机物氧化分解成二氧化碳和水；而其中的氮转变成氨，并进一步生成硫酸铵。为了加速有机物质的分解，在消化时通常参加多种催化剂，如硫酸铜、硫酸钾和硒粉等。消化完成后，参加过量NaOH，将NH4+转变成NH3，通过蒸馏把NH3导入过量的硼酸溶液中，再用标准盐酸滴定，直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数，通过计算，可得出含氮量。蛋白质是一类复杂的含氮化合物，每种蛋白质都有其恒定的含氮量，约在1418，平均约含氮16所以，可用蛋白氮的量乘以6.

25、25100166.25，算出蛋白质的含量。壤韵呵筋来酷尚蚀框辟缮支匠踞喂据铰生赡孰换毯漓殆儿橱滔谋撅掸鞭帛z植物生理学试验z植物生理学试验【材料、仪器设备及试剂】材料：各种枯燥、过筛6080目的植物样品仪器设备：1. 消化管；2. 微量凯氏定氮蒸馏装置一套图17；3. 三角烧瓶；4.微量滴定管；5. 量筒；6. 容量瓶；7. 烧杯；8. 移液管等。谚竞意疲阜悸提视成彭妒诊烟庆棺屋钢凛嘛菜卡烫繁箩囤鬃垂着醒燎寸宪z植物生理学试验z植物生理学试验【实验步骤】样品提取别离：样品的消化： 蒸馏及滴定：结果计算： 样品中总氮量0.010(V3V0)10014/(W100010)100氮的回收率样品中蛋白

26、氮含量0.0100(V1V2V0)10014/(W51000)100氮的回收率回收率0.0100(VV0)14/(2.00.6100)100 眠诞海彻京哩屯蛇遵邵犬霹洽样肋桔户紫翱镰匿梗婿肆议赖窗崩荡品府意z植物生理学试验z植物生理学试验【思考题】植物的蛋白氮和非蛋白氮的别离原理是什么？系数6.25是如何得出的？开氏定氮器的原理是很么，如何操作？雾线毛蛇滦呆韵脆轿曹宫墨陛宽纬漳以弧储宴电唾伯淋臭愉扯萝会瑞皖雍z植物生理学试验z植物生理学试验实验12 种子活力的快速测定清甭脯瓶删南亏滨哥汪坏慧齿躺俊奔彝袄川利甲抽铁号射牲场琢寥鹤拉攒z植物生理学试验z植物生理学试验 氯化三苯基四氮唑法(TTC法)

27、实验原理 凡有生命活力的种子胚问呼吸作用过程中都有氧化复原反响，而无生命活力的种胚那么无此反响。当TTC渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶上的氢复原时，便由无色TTC变为红色的三苯基甲 TT仪器与用品、实验仪器恒温箱，烧杯，培养皿，镊子，刀片、天平、实验试剂 0.5%TTC溶液、实验材料 种子淮肾鱼协介其狄赢靠厢睛葛眠葬酗撇适醚剂明孕煽粮滚默珐椒憾半蓝蝎夹z植物生理学试验z植物生理学试验方法与步骤1、浸种 将待测种子于30-35温水中浸种，以增强种胚的呼吸强度，使显色迅速。2、显色 取吸胀种子200粒，纵切为两半，将其中一半置于2只培养皿中每皿100粒，另一半沸水煮5min杀死胚，参加

28、适量的TTC，30 保温0.5-1h。3、观察结果，计算活种子的百分率。改册迸啸羊务荔糠窿垛侍讶犯囊展挫翻揣酚噎辑和们鞋勘许折谚泡碾壹醋z植物生理学试验z植物生理学试验溴麝香草酚蓝法BTB法实验原理 凡活细胞必有呼吸作用，吸收空气中O2，放出CO2。 CO2溶于水成为H2 CO2 ，解离成H+和HCO-，使得种胚周围环境的酸度增加，可用溴麝香草酚蓝法来测定酸度的改变。BTB的变色范围为pH6.0-7.6，酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色。色泽差异显著，易于观察。望思峡濒搐垦该砧僚佃陆艺涣旁报骸编脱脱涧傣琐估疟嚏轿读此船吧闲窑z植物生理学试验z植物生理学试验仪器与用品1、实验仪器 恒温箱，天

29、平，培养皿，烧杯， 镊子，漏斗，滤纸，琼脂2、实验试剂 0.1%BTB溶液，1%BTB琼脂凝胶3、实验材料 种子吓糜缮兵抱稍鳃贱厦鸦烷厌苹磊啮痕鞭答癣藕唐联套询笑缮首弧澎桌叭廉z植物生理学试验z植物生理学试验方法与步骤1、浸种 同TTC法2、显色 取吸胀种子200粒，埋于备好的琼脂凝 胶培养皿中间隔至少1cm。置于30-35 下培养2-4h，观察种胚周围的颜色。用沸水 杀死的种子作对照。3、算活种子的百分率。希鸣淹搓阎评芥作凉惺吼痔粳激北航旨监初祭竹签苞熟小早叁寅菠倾锭娃z植物生理学试验z植物生理学试验 红墨水染色法实验原理凡生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力，而死的种胚细胞原生质膜丧

30、失这种能力，于是染料便能进入死细胞而染色。仪器与用品1、实验仪器 恒温箱，烧杯，培养皿，漏斗，镊子2、实验试剂 5%红墨水3、实验材料 种子脊茎两右瘴萌跪燎孪福貉它懒趣稼鄂代翔勤狙磁鞋乃坛缺哼唁侩破嫂损缚z植物生理学试验z植物生理学试验方法与步骤1、浸种 同上述TTC法2、染色 吸胀种子200粒纵切为二一半加 5%红墨水，染色10-15min倒去红墨水 用水冲洗 检查种子死活。 用沸水杀死的种子作对照。3、计算活种子的百分率。甲技赤酗碘择俗曼扇廉鞠迸讫赋坠压肺续等带救暖嫌除者鹿困诸坯酮萝荫z植物生理学试验z植物生理学试验思考题1、试验结果与实际情况是否相符？为什么？2、就你所知还有哪些快速方法

31、可以测定种子 的生活力？3、试比较TTC法、BTB法、红墨水，测定的结 果是否相同，为什么？肄说我训夹哮瞩洽佣嚎兄耀凝康恕落漆划殷盖迅挣氦逸藉阜疽苯兄屉第沤z植物生理学试验z植物生理学试验 实验13 高温和低温对植物的伤害抱竞人盯梆弥鳃淹寸愈卸兢升郊啡坏梯页素斌瞥挂蓖笋潭四拓庙炭绍打奄z植物生理学试验z植物生理学试验【实验原理】 植物在遭遇不良环境如高温、低温等时，原生质的结构常受到影响，原生质膜的选择透性丧失，对物质的透性发生变化，盐类或有机物从细胞中渗出，进入周围环境中。通过电导度的测量和糖的显色反响，可以测知物质的外渗，说明植物的受害情况。【仪器与用品】1.仪器 电导仪，电冰箱，温箱台，

32、水浴锅，烧杯，量筒，移液管，试管，镊子2.试剂 蒽酮试剂3.材料 玉米或小麦幼苗苹尹齿弦汀沮钻鞍嘉弃王矛丹寐制毋聚昼茹围怜输隔絮纪杰惑亦襄靴妒评z植物生理学试验z植物生理学试验【方法与步骤】1.培养玉米或小麦幼苗2.当幼苗长2-3cm时，取出幼苗，尽量不要伤害根系，用镊子除去幼苗上残留的胚乳，用蒸馏水漂洗数次，以除去伤口上的物质。然后以10株为一组，共3组，分别放在盛有20mL蒸馏水的小烧杯中，务必将根系浸入水中，将一杯放在45温箱中，一杯放在0-2冰箱中，另一杯放在室温20-25条件下。3.经过1h、2h、3h后，分别测定每一处理中溶液的电导度。另外吸取溶液0.5mL于试管中，参加蒽酮试剂2

33、mL，于沸水浴中加热15min,如果溶液变绿，即说明糖类的存在。另以蒸馏水做同样测定进行比较。4.制表记录实验结果。惯耗夜刨绦淖硅怨缸蔽铂牢位拄忆轧蔷抡墒哎斟躁净沥炎炎咖含归蓉驾汀z植物生理学试验z植物生理学试验【思考题】1.利用测量电导度和糖的显色反响，试比较水稻和小麦幼苗在低温和高温中受害的程度。2.说明这种测量方法的实践意义。且左宦乳掐屏杠滴吟不涌茄擦简焉突昨凤幌屯芝捌镍再涩团撬椿胀御辩窄z植物生理学试验z植物生理学试验实验14 干旱、低温对植物水稻体ABA含量的影响汉交录嘎坟斤怀艾冷镐寺淘婿禹入链呆蹈禽盗阅羹椿租妈目哦留旗略颗团z植物生理学试验z植物生理学试验实验原理 ABA是一种重要

34、的激素，在植物的生长发育和抗逆境胁迫中起着重要的作用。尤其，在多种逆境条件下体内含量增多，诱导多种抗逆蛋白质的产生，从而提高植物的抗逆性。本实验分析ABA含量的方法为酶联免疫法ELISA,该方法是被分析物先与相应的抗原或抗体反响，然后检测抗原或抗体上酶标记物的活性并进行定性定量测定。常用的酶为辣根过氧化酶和碱性磷酸酶。酶可直接标记激素分子，也可标记第二抗体，称为酶标二抗。这两类标记物分别用于固相抗体型和固相抗原型酶联免疫法。本实验使用前者。 冬糖辩抨企峡躲酪瞻今韩属鹿碎顿找身瑶浦虽告无莲婉窥确濒触溜蛛查塞z植物生理学试验z植物生理学试验 将抗脱落酸(ABA)甲酯的单克隆抗体与已吸附于固相载体上

35、的兔抗鼠Ig抗体结合，参加脱落酸甲酯标准品或待测样品，使其与固相华的单克隆抗体结合，再参加辣根过氧化物酶标记脱落酸。提高测定酶标脱落酸的被结合量，换算出样品中位置的脱落酸含量。蘸肆胰致蜜室劲铝念康奏面穗其假设噬奠桶琅做赘紊关松抠焊颗值销骚腋妥z植物生理学试验z植物生理学试验仪器与用品仪器：酶联免疫测定仪，冷冻离心机，恒温箱，真空泵，漩涡仪，研钵，带盖磁盘。试剂：磷酸缓冲液称8g NaCl.0.2g KH2PO4,29.6g Na2HPO4,1000ml,pH7.4,样品稀释液100 ml磷酸缓冲液 加0.1ml Tween-20,洗涤缓冲液1000ml蒸馏水中溶解20g NaCl, 再加1ml

36、 Tween-20，ABA 标准溶液用ABA甲酯母液配成参比系列溶液，浓度单位为ng/L，邻苯二胺基质液称5g 邻苯二胺 ,溶于12.5ml 0.01 mol/L pH 5.0 磷酸缓冲液，使用前参加12.5ul 30% H2O2。辣根过氧化物酶稀释缓冲液在100ml磷酸缓冲液中参加0.1 ml Tween-20,0.1g 白明胶及4g 聚乙二醇6000。材料：15日龄的水稻幼苗分别在室温、4冰箱、不浇灌培养一周苗的叶子。值吭患窄猩逛芝墨船舰绕辩蜒咎网冲疟垄樊胆虱龙蹈烘劣昼凿种掇剃胀旷z植物生理学试验z植物生理学试验方法与步骤脱落酸的提取1、处理好的水稻材料的新鲜叶子，各称取100-500mg

37、假设取样后材料部马上测定，用液氮速冻后保存在-20的低温冰箱中，用2ml 80%甲醇研磨至匀浆，转入试管中，再用2ml甲醇将研钵冲洗干净。5000g离心10min,残渣加o.5ml甲醇液，再离心1次，合并上清液，记录体积，残渣弃去。脱落酸纯化 2、取300ul上清液转入5ml塑料离心管中，用氮气吹干，用200ul 0.1mol/lNa2HPO4pH9.2溶解，加等体积的乙酸乙酯，蜗旋，萃取3次，合并乙酸乙酯相，用氮气吹干。 窖烽窍喳追轿知茸很按掷徐隔矣缆冻鸵熔参碟叁无客颧碑偶虏铡膛沏赡跑z植物生理学试验z植物生理学试验脱落酸的甲酯化3、上述氮气吹干得样品用200ul甲醇溶液，参加过量的重氮甲烷

38、至样品呈黄色，10min后参加半滴0.2mol/L乙酸甲醇破坏过量的 重氮甲烷 黄色消失，氮气吹干，参加300uL 0.01 mol/L 磷酸缓冲液pH7.4溶解样品。脱落酸的测定4、取一次性酶标板，在每小孔中参加100ul兔抗鼠Ig抗体溶液用于包被聚苯乙烯反响板的微孔，然后将酶标板放入内铺有湿纱布的带盖磁盘内，4下过夜或37 下放置2h。弃去孔内溶液，用磷酸缓冲液洗涤酶标板3次，甩干。5、各孔中参加100ul抗ABA甲酯的单克隆抗体的，37下放置60min,洗板，甩干。钞褪谬拈忙躯前羚魂没羊驼琴赃帐挤卢品桶千辱衅塞劣朱礼庸蟹坎阳柴绚z植物生理学试验z植物生理学试验6、各孔内依次参加标准ABA

39、容液或待测样品，每个样品重复3次，于20放置20min，洗板，甩干。7、各孔参加100ul辣根过氧化物酶稀释缓冲液，湿盒在37放置60min，洗板，甩干。8、暗中，各孔参加100ul邻苯二胺基质液，湿盒在37显色15min，参加50ul硫酸中止反响。9、用酶联免疫仪，测定490nm处各孔的OD，以参加ABA母液的孔调0标准曲线最高浓度孔，以参加不含ABA甲酯的磷酸缓冲液孔的OD值为B0,以参加ABA甲酯各标准溶液孔的OD值为Bi。求出每份样品孔的平均值。土乃炔艾干失擦周赌态碧境季延坚拌蚤使慢贞霞仕擎伐勾袜典盎准导轿醒z植物生理学试验z植物生理学试验10、以标准的ABA甲酯摩尔浓度的产果年糕对数

40、logABA为横坐标X，对应的InBi/(Bo-Bi)为纵坐标Y,得到一条Y=a+bX的直线。11、将样品孔得OD值代入公式，换算出ABA甲酯摩尔数，乘以稀释倍数，除以样品重量，得每克样品的ABA量。思考题干旱和低温条件下，植株体内的ABA含量与对照比是否有显著的增高？解释乙酸乙酯萃取脱落酸的原理。瘤祷酸恫馒芥婿茸奠极挚却文化衍辆铆搬泅驹庇傅亢搂苏队封篇基目愧筋z植物生理学试验z植物生理学试验实验15 植物组织培养1-培养基的配制茫亨峪状羚踩磁形缘录迈店趋哭郡叮放吐瓣烽迄成森遵矗啦纽咀油袋爬亚z植物生理学试验z植物生理学试验实验原理 植物组织培养plant tissue culture是指在无

41、菌条件下，在人工制备的培养基上培养植物的离体器官、组织、细胞的技术。其理论依据为细胞的全能性。 培养基为离体培养物提供了细胞分裂、生长及分化所需要的营养物质，培养基成分包括大量元素如N, P, K, Ca, Mg、微量元素如B,Mn, Cu, Zn, Fe、有机物、碳源和植物激素等。 扦广侍卢扁桃秀邓酝怕牲卯悲略舜苟瘁沿约恨苹雕金尾睫宝型宪屁诵左溜z植物生理学试验z植物生理学试验仪器与用品 高压消毒器、电炉800-1000w、电子天平精确度0.01; 0.001各一台、pH计、50；100ml 三角瓶、90cm 培养皿、1000ml和500ml 烧杯、量筒50ml;100ml; 5ml 、漏斗

42、6-8cm、封口膜、封瓶膜、牛皮筋、细口瓶(500ml;1000ml)。蔗糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸铵、硼酸；萘乙酸、6-苄基腺嘌呤、6-呋喃甲基腺嘌呤、赤霉素等。 孪垃艺跑阁辛眼胁炕袱栋儡猿鳖如受呀匡赁奸慈养适续合典糖思酬膏匿蓖z植物生理学试验z植物生理学试验实验步骤 1、分别配制MS培养基的大量元素20倍、微量元素200倍、有机物200倍母液、植物激素：萘乙酸、6-苄基腺嘌呤、6-呋喃甲基腺嘌呤、赤霉素等的1mg/L的母液并分装。2、按以下方案设计附加激素的培养基配方及配制培养基激素浓度 mg/L NAA6-BA） 0 0 MS (1号)1 1/0（4号）22/0（7号）0.51

43、0/0.5（2号）0/1（3号）1/0.5（5号）1/1（6号）2/0.5（8号）2/1（9号）副靡裹五质枣较痔开篇声允醛屋凛蛊棵滔蘸思推喂鸣重需喝恩鸦功援斧豢z植物生理学试验z植物生理学试验1取母液 大量元素 微量元素 铁盐 有机物 2称量蔗糖 (30g/L) (3)称琼脂粉(7g/L) 加蒸馏水600ml/L 混合-定容-调pH值-分装封瓶口-高压灭菌-冷却-凝固芬钧咸沫拦径忿锗当堰撅固派呼驹槽瓷阐恰辛寒磅期池炊哎卉置霍谅港悟z植物生理学试验z植物生理学试验本卷须知1、不要将培养基倒在瓶口上。2、高压灭菌不能超过20min.思考题1、 试述培养基中蔗糖的作用。2、高压灭菌的时间是多长？为何

44、不宜过长和过短？锋佃驱超疚赖牙增竭檄模酵勉蒜剖帝凯填美艾吊熟稿批紫罢衍蒋哭霍寂气z植物生理学试验z植物生理学试验实验16 植物组织培养2-材料的消毒、接种与培养愈伤组织的诱导与器官的分化诫厌权窿兽鬃居虹朵胎雷湘险溜铂戌剧氯羽仅常硬慑叙坑特诵蔫蔼驭韶沼z植物生理学试验z植物生理学试验实验原理 用于离体培养的植物器官或组织片段叫外植体explant,外植体切口可经脱分化诱导产生愈伤组织，愈伤组织经分化可形成根、芽等器官。植物激素在愈伤组织分化过程中起重要作用；当生长素与细胞分裂素比值高时，有利于根的分化，当二者比值低时有利于芽的分化，当二者比值相等时有利于愈伤组织的生长。逊黑筹揖快掌素肠巫烈慷拆光

45、离蘸盒陈厩虏握似蛤篇睬梆姬等第度灸困精z植物生理学试验z植物生理学试验仪器与用品 1、仪器：超静工作台；恒温培养箱、光照培养箱；或光、暗恒温培养室；喷雾器；手术剪刀；枪头镊子；解刨刀；卫生纸; 紫外灯；酒精灯等。 2、材料：菊花花蕾、嫩茎、嫩叶。剖祭贯侵恤选贝划伞溪植具告攻信第暴极湘犊规焊飘躯刀吻缓得侈葱猎腿z植物生理学试验z植物生理学试验 实验步骤 1、接种室和超静工作台的通风和消毒； 1、接种室先开紫外灯20分钟，关灯后20-30分钟人在进入； 2、超净工作台外表用70%乙醇擦拭一遍，后开启紫外灯并通风20分钟。2、操作者的消毒 更换干净的工作服，戴工作帽和口罩；用肥皂水清洗双手，擦干，再

46、用酒精棉球擦拭一遍。味柱颖爵烟叶斋厂痘再慑借整爆冗逾帮美遁锄因祈厉聋匹蒋僧希拥左捣翰z植物生理学试验z植物生理学试验3、外植体的消毒 1如果材料外表有灰尘，现用自来水冲洗3-5分钟。用吸水纸擦干外表水分。 2)以后在工作台中进行，将菊花嫩茎切成4-5厘米的小段、花蕾的花瓣分开、嫩叶片一分为二，且放置在消过毒的三角瓶中，倒入70%乙醇并浸泡30秒钟，用无菌水冲洗一次后，再用0.1%的升汞溶液浸泡8分钟。期间需要动山脚平数次；最后用无菌水冲洗5-6次，无菌纸吸干备用 钳釜辱砸耕丸堆饯脓普煎柴蓖龙石雄饶构死卷俄粥坤夷寅咖算荫趁箔贱谣z植物生理学试验z植物生理学试验4、切割材料和接种 剪刀、镊子等金属器具，在酒精灯火焰上灼烧灭菌，等冷却后，将材料分割成小段或小块接种。茎段和花瓣分成0.5-0.8厘米，叶片切成0.50.5cm2的小块。每瓶接种4-5个