褪黑素及中药复方抗雄性鼠前列腺炎作用的研究

1、褪黑素及中药复方抗雄性鼠前列腺炎作用的研究【摘要】目的旨在研究褪黑素elatnin，T及中药复方(pundhineseTraditinalediine，T)抗雄性鼠前列腺炎的作用并对其作用机制进展讨论。方法通过考察前列腺腺体器官的重量及指数、卵磷脂小体的密度、白细胞总数以及其组织病理切片等实验的检测，对T及T抗前列腺炎作用及机制进展分析讨论。结果实验说明：褪黑素及中药复方对前列腺炎方面表现出较好的药理作用。显著降低前列腺重量、指数，抑制性腺功能，增加卵磷脂小体的密度，降低白细胞总数，对其他炎症反响也有较好的抑制作用。切片中可见复方制剂可使腺腔构造及腺管直径根本恢复正常。结论本实验研究证明褪黑素

2、及中药复方有较好的抗雄性鼠前列腺炎的作用，其作用机制可能与其抗自由基、补肾壮阳和抗衰老等成效有关。【关键词】褪黑素T；中药复方(T)；丙二醛DA；一氧化氮N；前列腺指数；卵磷脂小体密度；白细胞总数褪黑素elatnin，T是松果腺于夜间分泌的、普遍存在于生物体内的一种吲哚类激素，在体内起重要的生理作用1。T具有明显的昼夜节律性及明暗周期。T对机体有着广泛的影响，具有调节免疫、抗氧化、抗炎、镇痛、镇静、催眠、抗衰老等作用2，未见其治疗前列腺炎的国内外报道。本实验中药复方pundhineseTraditinalediine，T源自金匮肾气丸(古成方)，有补肾壮阳之成效。PS指前列腺非特异性感染所致的

3、急性或慢性炎症引起的部分和全身病症，是男性常见玻本实验以褪黑素及中药复方合用对雄性鼠进展口服灌胃给药，通过考察前列腺腺体器官的重量及指数、卵磷脂小体的密度、白细胞总数以及其组织病理切片等实验的检测，对T及T抗前列腺炎的作用及机制进展分析讨论。1实验材料1.1实验动物istar大鼠，雄性250g左右，由沈阳药科大学动物室提供。1.2实验药品和试剂熟地黄RadixRehanniaepreparata、黄芪(Radixastragali)、茯苓(Pria)、肉桂(rtexinnai)、枸杞(Frutuslyii)、山茱萸(Frutusrni)等：购自沈阳同仁堂大药房；褪黑素elatnin：江苏常州医

4、药技术开发公司；前列康：浙江康恩贝制药股份(批号：021029-3)；角叉菜胶(arrageenin)：美国SIGA公司。2实验方法2.1实验模型的建立角叉菜胶致大鼠实验性非细菌性前列腺炎模型37。按张氏8造模方法，取istar雄性大鼠40只，体重250g左右，每鼠分别称重，按体重腹腔注射10%乌拉坦，1l/100g，待麻醉成功后，剪除下腹部被毛，无菌条件下，于下腹部正中切口，直达腹腔，提起膀胱，暴露前列腺腹叶，以1%灭菌角叉菜胶溶液0.1l注入腹叶，送复脏器，缝合肌肉、皮肤。将40只造模大鼠随机分为4组，每组8只，即褪黑素组、褪黑素中药复方组、模型对照组、前列康片对照组，另取8只未造模大鼠作

5、为正常对照组。造模后7天开场给药。模型对照组灌胃给予蒸馏水10l/kg，实验组灌胃给予褪黑素8.0g/kg、褪黑素中药复方9.72g/kg；阳性对照组灌胃给予前列康片417g/kg。每组每日晚5：00灌胃给药一次，空白组不予处理。连续1周，于第8天给药后1h，将各组动物处死，摘取前列腺，取10l前列腺按摩液，用白细胞稀释液稀释20倍，于显微镜下数白细胞数。另取1滴前列腺液涂片，镜下观察卵磷脂小体密度按临床检验标准分为4级，即满视野为4级，3/4视野为3级，1/2视野为2级，1/4视野为1级。记录结果，用t检验进展统计学处理。2.2检测方法2.2.1前列腺指数及性腺器官指数的测定9，10大鼠称重

6、，然后处死，取前列腺称重。前列腺指数=前列腺重/体重。2.2.2前列腺液的检测11，12用前列腺按摩法采取前列腺液。正常前列腺液为稀簿乳白色液体，镜检：有很多卵磷脂小体，每高倍视野白细胞数在4个以下，偶见精子。前列腺炎时，白细胞或脓细胞每高倍视野4个以上，卵磷脂小体减少，偶可查到滴虫。在显微镜下检查可见以下几种成分：(1)卵磷脂小体：正常前列腺液内卵磷脂小体几乎布满视野，当前列腺发生炎症时，巨噬细胞吞噬大量脂类，故卵磷脂小体减少。因此，卵磷脂小体的多少，在一定程度上反映前列腺炎的轻重。(2)血细胞：正常前列腺液内红细胞极少，往往在炎症时才出现，如按摩过重也引起红细胞数增加；正常前列腺液内白细胞

7、散在，每高倍视野下不超过4个。2.3切片的制作13用颈椎脱臼法处死大鼠，立即翻开腹腔，摘取前列腺，取部分组织，福尔马林溶液固定，常规石蜡包埋切片(6)，HE染色后，光镜观察，每组随机取5张切片，每张随机选择5个视野。2.4数据处理数据采用均数标准差xs表示，组间比拟采用t检验进展统计学处理。3结果3.1T、T中药复方对角叉菜胶所致实验性非细菌性前列腺炎大鼠前列腺重量及指数的影响见表1。T组、T中药复方组及前列康组大鼠的前列腺组织的重量和指数与模型组比拟差异有显著性P0.01，模型组与空白组相比差异有显著性P0.01。T组与模型组比拟差异不明显。提示：实验性非细菌性前列腺炎大鼠模型成立，T、T中

8、药复方及前列康对实验性非细菌性前列腺炎大鼠的炎症有一定的抑制作用。Tab.1EffetsfT、T+Tnabaterialprstatitisinduedbyarrageenininrats(xs)Anntatin：paredithntrlgrup：P0.01；paredithdelgrup：*P0.05；*P0.013.2T、T中药复方对角叉菜胶所致实验性非细菌性前列腺炎大鼠卵磷脂小体密度及白细胞总数的影响见表2。T组、T中药复方组及模型组大鼠的前列腺组织的卵磷脂小体密度与模型组比拟差异有显著性，前列康组、T中药复方组与模型组相比差异有显著性P0.01。T组与模型组比拟差异不明显。T组、T中药

9、复方组及前列康组大鼠的前列腺液的白细胞总数(个/HP)与模型组比拟均有差异。T中药复方组及前列康组差异显著P0.01。提示：T对角叉菜胶所致实验性非细菌性前列腺炎大鼠的前列腺炎有一定的抑制作用，T中药复方及前列康的作用较T中药复方低剂量显著。Tab.2.EffetsfT+Tnabaterialprstatitisinduedbyarrageenininrats(xs)Anntatin：paredithntrlgrup：P0.01；paredithdelgrup：*P0.05；*P0.013.3T、T中药复方对角叉菜胶所致前列腺炎大鼠前列腺腺体组织构造的影响病理切片病理报告示：1正常对照组：间质

10、内未见炎性细胞及其他异常现象(图1)；2T中药复方组：腺泡间质偶见炎性细胞，腺泡排列大小均未见异常(图2)；3T组：腺泡间质中可见炎性细胞浸润，结缔组织增生，轻度水肿(图3)；4模型组：前列腺间质内可见多数炎性细胞浸润，腺上皮可见乳头状增生，结缔组织增生(图4)；5前列康组：有的腺泡间质内可见炎性细胞，间质疏松，呈水肿状，有的前列腺组织构造根本正常(图5)。图1前列腺炎症实验空白对照组图2前列腺炎症实验T+T组图3前列腺炎症实验T组图4前列腺炎症实验模型组图5前列腺炎症实验前列康组4结论角叉菜胶致大鼠前列腺炎模型成立；T中药复方、前列康对角叉菜胶致大鼠前列腺炎有明显的抑制作用，T组对角叉菜胶致

11、大鼠前列腺炎有一定的作用。褪黑素及中药复方能显著抑制雄性PS模型鼠的炎症，减轻其炎性水肿引起的前列腺腺泡间质水肿、炎性细胞的浸润、结缔组织增生。5讨论T中药复方的抗前列腺炎作用。常见的前列腺炎动物模型根本为慢性炎症，有以下几种：角叉菜胶致大鼠前列腺炎模型、蛋清致大鼠前列腺炎模型、大肠杆菌致大鼠前列腺炎模型等。在前期实验中发现角叉菜胶致大鼠前列腺炎模型比拟典型，因此本实验选用角叉菜胶作为模型的诱发剂。自由基代谢紊乱与细胞损伤程度关系亲密14。它是通过脂质过氧化作用使细胞膜受损，LP程度的增高，还能通过脂质氢化过氧物的分解产物引起细胞损伤。SD是一种超氧化自由基去除剂，通过一种连锁反响是超氧自由基

12、歧化为H22，而后者在过氧化氢酶的作用下，生成无毒的H2。刘小平实验显示15，BP、NP患者血清中DA高于安康对照组，SD活力低于安康对照组，这可能与炎症的长期慢性持续的刺激有关。氧自由基自始至终参与前列腺炎的发生开展，促进前列腺导管水肿、变性、纤维化，使慢性前列腺炎症病症持续存在。SD活力下降可使RB膜变形才能下降，影响运输氧的功能，导致部分循环障碍，促进或加重前列腺部分淤血、缺氧、水肿。本文用角叉菜胶制造了大鼠实验性非细菌性前列腺炎模型，其他炎症有用二甲苯制造小鼠急性渗出性炎症模型，用棉球制造小鼠慢性增生性炎症模型，用蛋清制造大鼠急性渗出性炎症模型。近年来的国内外报道中未见褪黑素抗前列腺炎

13、的研究，但有其抗炎作用的相关报道。由本实验结果可见，褪黑素及褪黑素+中药复方可显著进步前列腺液中卵磷脂小体密度，降低白细胞数量，改善腺腔大小不一，减轻腔内炎细胞浸润、间质炎细胞浸润及间质水肿的程度，但褪黑素+中药复方对雄性大鼠前列腺炎的治疗作用比单用褪黑素效果显著。实验说明，褪黑素+中药复方有一定的抗前列腺炎作用，这可能主要与其抗自由基作用有关。综上所述，褪黑素elatnin，T及中药复方通过去除自由基、补肾壮阳、抗衰老、增强免疫功能等方面的机制，起到抗前列腺炎的作用，并为今后进一步的药理学研究提供理论根据。【参考文献】1魏伟，徐叔云.褪黑素的神经内分泌免疫作用及其应用前景.中国药理学通报，1

14、997，133：196-200.2刘雪莉，付新录，钱伯初.褪黑素抗前列腺增生及前列腺肿瘤的研究进展.中国药理学通报，2002，185：490-493.3唐凤珍，候惠茹，张景云，等.大鼠前列腺炎模型的制备方法.中国药理学通报，1998，14(2)：187-188.4孙蓉，陈明，吕丽莉，等.前列泰颗粒对大鼠慢性前列腺炎模型的抗炎作用研究.中药药理与临床，2001，17(6)：42-44.5戴岳，张聪，林巳茏，等.黄芩总苷对大鼠急慢性前列腺炎影响的实验研究.中医药学刊，2022，21(3)：386-387.6崔祝梅，黄正良，任远，等.前列泰片对前列腺增生及其抗炎镇痛作用的实验研究.中成药，1994，16(4)：38-40.7王飞，杨奎，蒲旭峰，等.加味三妙胶囊对实验性前列腺炎大鼠血液流变学的影响.新疆中医药，2022，21(2)：7-9.8张亚强.中药前列腺汤对实验性前列腺炎病理模型的影响.中西医结合杂志，1991，11(8)：480.9郇宜俊，钟奋志，郭永成，等.首丹王栓治疗慢性前列腺炎的药效学研究.山东中医药大学学报，2002，26(3)：227-229.10陈奇.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993，84.11唐凤珍，候惠茹，张景云，等.大鼠前列腺炎模型的制备方法.中国药理学通报，1998，14(2)：187-188.12孙蓉，陈明，吕丽莉，等.前列泰