肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价

1、肿瘤免疫细胞生物治疗临床试验设计及疗效评价李磊 第三军医大学赵明 中南大学深圳生物医药研究院leili1214肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第1页肿瘤发病机制基因突变与基因表示异常环境不协调发展信号通路调控异常机体免疫监视异常 肿瘤免疫逃逸肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第2页肿瘤发病免疫机制肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第3页肿瘤治疗策略机械性手术切除指标不治本方法负荷较大实体瘤手术首选肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第4页肿瘤治疗策略物理性放射治疗针对DNA变异通杀性策略化学性细胞毒性药品细胞内各种代谢酶覆盖性治疗策略肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效

2、评价第5页肿瘤治疗策略肿瘤生物治疗新兴第四种抗肿瘤策略细胞因子 单克隆抗体 免疫 刺激剂 作用于基因免疫毒素作用于特定分子靶点非细胞毒性小分子免疫效应细胞：LAK, TIL,CTL,CIK肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第6页肿瘤免疫生物治疗策略基于肿瘤发生发展过程中免疫监视异常和肿瘤免疫逃逸原理，利用免疫学技术制备各种生物制剂，经过激发或增强机体免疫功效方式，针对肿瘤细胞演变关键步骤实施靶向性治疗。肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第7页肿瘤免疫生物治疗分类免疫因子： IFN, ILs，TNF，TGF-，CSF，chemokines，thymosine etc.肿瘤疫苗： DN

3、A疫苗，多肽疫苗，蛋白质疫苗，HSP蛋白疫苗，抗独特型抗体疫苗，DC疫苗基因修饰T淋巴细胞过继性免疫效应细胞： NK, LAK, CIK，TIL肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第8页肿瘤免疫生物治疗机理调整机体抗肿瘤免疫能力干扰肿瘤细胞增殖、分化、凋亡、转移等生物学行为。肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第9页肿瘤免疫生物治疗特点特异性靶点肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第10页肿瘤免疫生物治疗特点个性化治疗肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第11页肿瘤过继免疫细胞生物治疗流程肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第12页药品临床试验研究目：是否有效？是否安全？意

4、义：确定治疗价值临床研究要求： Good Clinical Practice(GCP）策略： 前瞻性研究肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第13页肿瘤免疫细胞治疗临床试验根本要求 掌握法规，符合伦理，设计科学， 明确指标，客观统计，临床可行。肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第14页肿瘤生物治疗与化学治疗各期临床试验设计对比化学治疗生物治疗I期研究目标最大耐受剂量，毒性，药代动力学最正确生物剂量，毒性。药品剂量剂量爬升剂量爬升观察终点毒性靶点抑制II期研究目标抗瘤谱靶点依赖抗瘤谱药品剂量最大耐受剂量最正确生物剂量观察终点肿瘤缩小（周期短）肿瘤进展时间（周期长）III期研究目标临床获

5、益临床获益药品剂量最大耐受剂量最正确生物剂量观察终点生存情况生存情况肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第15页肿瘤免疫细胞治疗试验关键点I 期临床试验 寻找最正确生物学剂量为其主要目标； 是否诱发免疫相关性疾病为主要观察指标； 个性化治疗为其主要特点； 标准化生产为其主要保障； 受试患者选择以疾病终末期为宜； 受试病例以30例为佳。肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第16页肿瘤免疫细胞治疗试验关键点II期临床试验 确定治疗肿瘤谱系和适应证为其主要目标； 确定临床有效性为试验终点指标 瘤体大小、肿瘤进展、无进展生存、 总生存率、临床获益 确定是否进行III期试验及其病例数量 病例筛选

6、不局限于终末期肿瘤患者 病例数量以100例左右为佳肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第17页肿瘤免疫细胞治疗试验关键点III期临床试验 试验目： 通过大宗病例对比研究，最终验证临床获益是否具有统计学差异 病例要求：1000例以上肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第18页实体瘤疗效评价注意事项： 国际计量单位（mm），使用直尺或测量器； 全部基线评价应尽可能靠近治疗开始； 检验伎俩和评价方法前后一致； 图片留档； 终点指标为客观有效率时，普通不能用超声作为评价疗效伎俩； 肿瘤标识物单独不能评价疗效肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第19页实体瘤疗效评价病灶选择 1. 最少有1个

7、可准确测量径线病灶，在常规CT下，其最大直径20mm，或螺旋CT下，其最大直径需10mm； 2. 假如只有1个可测量孤立病灶，则必须由细胞学/组织学证实具为肿瘤； 3. 全部观察病灶最长径总和统计为基线最长径。肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第20页实体瘤疗效评价完全缓解 complete response： 全部观察病变完全消失。部分缓解 partial response： 与基线总最长径相比，观察病灶总最长径降低最少30%。进展 progressive disease： 与基线总最长径相比，观察病灶总最长径增加20%以上，或治疗开始后出现1个或更多新病灶。稳定 stable dis

8、ease： 与基线总最长径相比，观察病灶总最长径降低不到30%，增加不到20%。肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第21页实体瘤疗效评价疗效确认1. 评价有效确实认： 在首次评价有效后，需最少4周后复验确证；2. 肿瘤稳定确实认： 通常最少6-8周，肿瘤测量仍符合稳定标准；肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第22页实体瘤疗效评价疗效连续时间 1. 缓解期 从上次评价有效开始到客观统计到出现复发时间 2.稳定连续时间 由治疗开始到出现进展时间 （研究开始后最少6-8周，肿瘤测量仍符合稳定标准才能评价为稳定）肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第23页肿瘤免疫细胞治疗惯用检测指标1

9、. 迟发型超敏反应 定性不定量 假阳性与假阴性肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第24页肿瘤免疫细胞治疗惯用检测指标2. 细胞毒性T淋巴细胞杀伤试验 Cytotoxic T lymphocyte (CTLs) 是T 细胞在体内或体外经抗原刺激后产生一个效应细胞，可特异性裂解靶细胞，这种能力能够反应机体抗肿瘤活性。 肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第25页肿瘤免疫细胞治疗惯用检测指标 CD8+ 细胞毒性T淋巴细胞杀伤试验同位素法LDH肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第26页肿瘤免疫细胞治疗惯用检测指标3. 淋巴细胞增殖试验 T细胞前体没有任何效应功效，但在碰到抗原时能够增殖

10、，这是抗原特异性Th 细胞存在标志。3H2TdR 掺入法MTT （琥珀酸脱氢酶法）流式细胞术肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第27页肿瘤免疫细胞治疗惯用检测指标4. MHC多肽四聚体法 T细胞定量、定性分析MHC 类分子四聚体检测CD8 + 细胞MHC 类分子四聚体检测CD4 + 细胞肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第28页肿瘤免疫细胞治疗惯用检测指标5.免疫细胞因子检测 ELISA ELISPOT FCM Gene PCR肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第29页肿瘤免疫细胞治疗惯用检测指标铬释放法被认为是评价抗原特异性CTL 反应金标准，但该法无法检测不具增殖潜能T 细胞前体；ELISPOT能更准确地反应T 细胞在体内情况，但仍依赖一定时间肽诱导以产生细胞因子,会低估总特异性CTL 数量,不过敏感度远高于铬释放法；MHC肽复合物多聚体染色法，是当前最新直接检测特异性CTLs 方法，能够直接对T 细胞染色，还可结合FCM计数细胞，敏感性大大增强，又不受基因型限制。关于tumor marker检测： 下降50%，改进; 下降90% 有效 但干扰原因多，拟慎用肿瘤免疫生物治疗的临床试验设计及疗效评价第30