综5骨骼肌收缩效能实验

1、1骨骼肌收缩效能实验综合性实验Page 1292014年（第六章 第一节）掌握坐骨神经-腓肠肌标本制备方法。观察分析刺激强度和刺激频率与骨骼肌收缩张力的关系。观察分析神经传导受阻对骨骼肌收缩力的影响。实验目的和要求目的以小组为单位完成实验。写实验报告。 要求实验原理 神经、肌肉组织接受刺激而产生动作电位（锋电位）是兴奋的标志。 阈强度是衡量可兴奋组织或细胞兴奋性高低的客观指标。 1. 兴奋性（excitability）实验原理2. 单收缩（single switch） 骨骼肌受到一个短暂有效刺激出现的一次机械性收缩和舒张。其全过程可分为潜伏期、收缩期和舒张期。3. 刺激强度与骨骼肌收缩幅度的相

2、关性实验原理阈强度（threshold strength）： 能使组织发生兴奋的最小刺激强度，是衡量可兴奋组织或细胞兴奋性高低的客观指标。最大刺激（maximal stimu1us）：能引起肌肉发生最大收缩反应的最低刺激强度的刺激。一定范围内，骨骼肌收缩力随剌激强度的增大而增强。 实验原理4. 刺激频率与骨骼肌收缩幅度的相关性单收缩：刺激间隔 一次单收缩持续时间。复合收缩：刺激间隔 收缩期。完全强直收缩：刺激间隔收缩期。实验原理5. 坐骨神经诱发的腓肠肌收缩 神经细胞受刺激时，兴奋沿神经纤维传导，通过神经肌接头的化学传递，使肌肉终板膜上产生终板电位，可引起肌肉产生兴奋（即动作电位），传遍整个肌

3、纤维，再通过兴奋-收缩耦联，宏观上表现为肌肉收缩。实验原理局麻药（Local anesthetics） 与细胞膜电压依赖性Na+通道内侧靶位结合后，引起蛋白构象变化，阻滞Na+内流，抑制动作电位的产生，可逆性地阻断神经冲动的产生和传导。 不同直径的神经纤维膜上Na +通道的密度不同，纤维细的密度低，麻醉作用快。坐骨神经-腓肠肌标本制备破坏脑和脊髓，剪去躯干上部及内脏坐骨神经-腓肠肌标本制备剥皮坐骨神经-腓肠肌标本制备蛙板上固定分离腹腔部坐骨神经坐骨神经-腓肠肌标本制备切除梨状肌及周围组织分离坐骨神经沟坐骨神经-腓肠肌标本制备游离大腿部坐骨神经钝性分离腓肠肌，游离部分跟腱坐骨神经-腓肠肌标本制备

4、结扎并剪断跟腱远端剪下小块坐骨神经相连的脊椎骨坐骨神经-腓肠肌标本制备剪断膝关节周围肌腱，清除附着于股骨上肌肉剪断股骨中部，剪去膝关节下方小腿坐骨神经-腓肠肌标本制备锌铜弓检查标本完整性任氏液中浸泡5-10 min实验装置的连接屏蔽盒固定标本股骨端螺丝孔观察项目1刺激强度对骨骼肌收缩幅度的影响(1) 记录阈强度和最大刺激强度刺激参数：细电压，单刺激，波宽0.1 ms，强度0 v，自动幅度，增量0.05 v, 主周期3 s。程控测得阈强度和最大刺激值。 （2）骨骼肌收缩曲线各项指标潜伏期收缩程度（最大值）舒张程度（最小值）收缩幅度（Fmax）收缩间期舒张1/2间期最大收缩速度（+dF/dtmax

5、）最大舒张速度（-dF/dtmax）观察项目观察项目2利多卡因对骨骼肌舒缩功能的影响 （1）测定最大刺激用蟾蜍另一条后肢观察项目2利多卡因对骨骼肌舒缩功能的影响 2g/L利多卡因小棉条覆于坐骨神经上，观察骨骼肌收缩曲线随时间的变化（0、1、2、4、6、8、10 min等）。测量各时间点的Fmax 、+dF/dtmax和-dF/dtmax 。（2）记录用利多卡因后腓肠肌单收缩曲线刺激参数：细电压，单刺激，波宽0.1 ms，最大刺激。观察项目（3）利多卡因阻断神经传导作用的可逆性坐骨神经浸到任氏液中3、6、10、15 min。测量各时间点腓肠肌最大单刺激的Fmax、+dF/dtmax和-dF/dt

6、max。刺激参数：细电压，单刺激，波宽0.1 ms，最大刺激。注意事项剥皮后洗干净所用器械，标本不能用水冲洗。去除神经周围结缔组织时，避免用力牵拉或夹捏神经。经常用任氏液湿润标本。每次连续刺激一般不超过34 s，刺激后应有一定间隔时间（0.51 min），以防标本过于疲劳。肌肉在未给刺激时出现挛缩，可能是因漏电或静电感应等所致，需检查仪器接地是否良好。实验报告要求1. 实验结果2. 讨论截取各观察项目的实验记录图。单收缩阈刺激强度、最大刺激强度和收缩幅度值填入表1。利多卡因麻醉和复苏时Fmax、+dF/dtmax和-dF/dtmax，填入表2。根据实验结果逐项分析其作用机制。观察指标阈强度最大刺激强度Fmax单收缩表1 刺激对腓肠肌收缩幅度的影响 实验报告要求处理因素Fmax（g）+dF/dtmax（g/ms）-dF/dtmax（g/ms）利多卡因