植物组织培养课件

1、植物组织培养课件植物组织培养课件Objectives课程目标了解植物组织培养的基本原理及概念了解植物组织培养的应用掌握培养基配置方法掌握无菌操作技术（进行花菜花柄的试管苗诱导）测试不同植物激素对黄瓜子叶与下胚轴诱导愈伤组织及分化的影响了解组培苗驯化移栽方法掌握铁皮石斛人工种子制作2精选pptObjectives课程目标了解植物组织培养的基本原理及概念问题植物自然条件下的繁殖方法有哪些？种子繁殖无性繁殖3精选ppt问题植物自然条件下的繁殖方法有哪些？5精选ppt各种形态的种子4精选ppt各种形态的种子6精选ppt种子和果实的产生5精选ppt种子和果实的产生7精选ppt无性繁殖6精选ppt无性繁殖

2、8精选ppt植物组织培养的基本原理1902年，德国植物学家哈伯兰特细胞全能性的理论是植物组培的理论基础。1958年，美国植物学家斯蒂瓦特等人，用胡萝卜韧皮部的细胞进行培养，终于得到了完整植株，并且这一植株能够开花结果，证实了哈伯兰特在五十多年前关于细胞全能的预言。7精选ppt植物组织培养的基本原理1902年，德国植物学家哈伯兰特细胞全细胞的全能性1 什么是细胞的全能性？2 为什么细胞具有全能性？3 各细胞的全能性一样吗？8精选ppt细胞的全能性1 什么是细胞的全能性？2 为什么细胞具有全能性定义：1902年由Haberlandt提出，即：植物体的每一个具有完整细胞核的活细胞，都具有该植物所特有

3、的全部遗传信息，在适当的条件下，具有发育成完整植株的潜在能力。 20世纪80年代，每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息，在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同类型细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整再生植株。植物细胞的全能性（Totipotency）9精选ppt定义：1902年由Haberlandt提出，即：植物体的每一细胞全能性的相对性: 细胞全能性并不意味着任何细胞均可以直接产生植物； 动植细胞全能性的表现程度存在明显的差异。10精选ppt细胞全能性的相对性:12精选ppt细胞按照分裂能力分为三类:第一类：始终保持分裂能力。如茎尖、根尖及形成层细胞

4、；第二类：永久失去分裂能力的终端分化细胞。如筛管、导管、气孔保卫细胞等特化细胞；第三类：在通常情况下不分裂，但在受到外界刺激后可重新启动分裂的细胞。如表皮细胞及各种薄壁细胞。11精选ppt细胞按照分裂能力分为三类:第一类：始终保持分裂能力。如茎尖、根据细胞类型不同从强到弱: 营养生长中心形成层薄壁细胞厚壁细胞（木质化细胞）特化细胞（筛管、导管细胞）根据细胞所处的组织不同从强到弱： 顶端分生组织居间分生组织侧生分生组织薄壁组织（基本组织）厚角组织辅导组织厚壁组织12精选ppt根据细胞类型不同从强到弱:14精选ppt细胞全能性脱分化个体再生再分化细胞分裂 细胞全能性的实现是通过细胞脱分化和再分化实

5、现的。在大多数情况下，脱分化是细胞全能性表达的前提，再分化是细胞全能性表达的最终体现。13精选ppt细胞全能性脱分化个体再生再分化细胞分裂 细胞全能性的实二、植物组织培养技术1 培养条件14精选ppt二、植物组织培养技术1 培养条件16精选pptKNO3 1900 MnSO4.4H2O 22.3 NH4NO3 1650 H3BO3 6.2 KH2PO4 170 KI 0.83 MgSO4.7H2O 370 ZnSO4.7H2O 8.6 CaCl2.2H2O 440 Na2MoO4.2H2O 0.25 Na2.EDTA 37.3 CuSO4.5H2O 0.025 FeSO4.7H2O 27.8

6、CoCl2.6H2O 0.025 盐酸硫胺素（VB1） 0.1 烟酸 （VB5或VPP） 0.5盐酸吡哆醇（VB6） 0.5 肌醇 100 甘氨酸 2蔗糖 30000 琼脂 10000 2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D） 0.055 萘乙酸（NAA） 0.055 6-苄基腺嘌呤（6-BA） 0.0510MS培养基配方 单位（mg/L）15精选pptKNO3 190二、植物组织培养技术1 培养条件营养物质蔗糖无机盐维生素水有机物氨基酸细胞分裂素类植物生长调节剂生长素类赤霉素类无机物有机营养凝固剂琼脂环境条件温度湿度pH无菌光照一般控制在2328操作台、培养基、实验仪器等一般控制在7080% 一般

7、控制5.8 16精选ppt二、植物组织培养技术1 培养条件营养物质蔗糖无机盐维生素水有2 植物组织培养过程脱分化愈伤组织再分化根芽植物体离体的植物器官、组织或细胞（外植体） 胚状体17精选ppt2 植物组织培养过程脱分化愈伤组织再分化根植物体离体的植物器叶片接种到培养基上产生愈伤组织愈伤组织增殖愈伤组织开始分化愈伤组织分化出芽培养基中的试管苗植物组织培养过程示意图18精选ppt叶片接种到培养基上产生愈伤组织愈伤组织增殖愈伤组织开3 植物组织培养的概念 植物组织培养是利用植物体的离体器官、组织或细胞，无菌条件下在含有营养物质的培养基上，给予适宜的光照、温度、湿度等环境条件下进行人工培养，使其增殖

8、、生长、发育而形成完整的植株。19精选ppt3 植物组织培养的概念 植物组织培养是利用植物体的离体植物组织培养的几个概念愈伤组织 原指植物体受伤时产生于伤口周围的组织。现多指切取植物体的一部分，置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养，诱导产生的无定形的组织团块。主要由薄壁细胞构成。胚状体 指离体培养条件下，没有经过受精过程，但是经过了胚胎发育过程所形成的胚状类似物。培养基 供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。无菌操作 用于防止微生物进入培养基和植物体的操作技术称为无菌操作。植物激素 是由植物自身代谢产生

9、的一类有机物质，并自产生部位移动到作用部位，在极低浓度下就有明显的生理效应的微量物质，也被称为植物天然激素或植物内源激素。组培中常加入植物激素或人工合成激素类化合物调节器官分化。20精选ppt植物组织培养的几个概念愈伤组织 原指植物体受伤时产生于伤植物组织培养过程脱分化愈伤组织再分化根芽植物体离体的植物器官、组织或细胞（外植体） 胚状体21精选ppt植物组织培养过程脱分化愈伤组织再分化根植物体离体的植物器官、探究活动：探讨影响植物细胞脱分化和再分化的因素资料1 在快速繁殖颤杨时，如果我们将一个枝条平均分成三段，结果发现，靠近顶端的那一段枝条的侧芽离体培养时繁殖系数最高，中间的次之，基部的最低。

10、结论：外植体在植株上的着生位置对其脱分化及再分化有一定的影响。22精选ppt探究活动：探讨影响植物细胞脱分化和再分化的因素资料1结论探究活动：探讨影响植物细胞脱分化和再分化的因素资料2 在MS培养基中加入质量分数为0.5mg/L的6-BA和质量分数为0.5mg/L的NAA，可诱导胡萝卜形成愈伤组织； 在MS培养基中加入质量分数为2mg/L的KT（激动素）和质量分数为0.2mg/L的NAA，可诱导胡萝卜生出丛芽； 在MS培养基中加入质量分数为0.1mg/L的NAA，可诱导胡萝卜生根。结论：生长素及细胞分裂素的比例可影响细胞的脱分化及再分化。23精选ppt探究活动：探讨影响植物细胞脱分化和再分化的

11、因素资料2结论探究活动：探讨影响植物细胞脱分化和再分化的因素资料3 将外植体培养在黑暗条件下，10天左右即可形成高度液泡化的愈伤组织，但是若将外植体培养在光照条件下，发现细胞分化产生维管束等组织，而不形成愈伤组织。结论：愈伤组织的形成需要避光。24精选ppt探究活动：探讨影响植物细胞脱分化和再分化的因素资料3结论探究活动：探讨影响植物细胞脱分化和再分化的因素资料4 研究烟草组织培养时发现，烟草芽的形成以28为好，在12以下，33以上形成率均很低。结论：脱分化及再分化都需要在适宜的温度条件下进行。25精选ppt探究活动：探讨影响植物细胞脱分化和再分化的因素资料4结论一、培养基配制26精选ppt一

12、、培养基配制28精选ppt培养基的成分无机盐类维生素类氨基酸有机附加物糖类水琼脂植物生长调节物质27精选ppt培养基的成分无机盐类29精选ppt培养基配制程序配制母液（大量 微量 铁盐 有机 植物激素）加热溶解琼脂及糖加入各类母液定容调pH分装灭菌28精选ppt培养基配制程序配制母液（大量 微量 铁盐 有机 植物激素）3选修一教材相关问题组织培养过程中蔗糖的吸收方式？不耐高温的试剂如何添加到培养基中？为何铁盐母液单独配制？为何要调整pH？选修一菊花组织培养中芽诱导及生根培养基的差异？29精选ppt选修一教材相关问题组织培养过程中蔗糖的吸收方式？31精选pp蔗糖吸收1、高压灭菌水解2、细胞壁蔗糖

13、酶分解3、主动吸收30精选ppt蔗糖吸收1、高压灭菌水解32精选ppt过滤灭菌31精选ppt过滤灭菌33精选ppt铁盐母液铁盐母液制备：3价或2价铁盐分别加热溶解后混合定容 最终螯合铁大多以三价铁存在 。但植物细胞从EDTA吸收铁在细胞膜上由3价铁转化为2价铁。32精选ppt铁盐母液铁盐母液制备：3价或2价铁盐分别加热溶解后混合定容333精选ppt35精选ppt实验一：培养基配置花菜花茎段诱导培养基，黄瓜诱导愈伤及分化培养基1）：MS+NAA 0.2mg/L+6-BA 2.0 mg/L +30g/L 蔗糖+7g/L 琼脂粉， pH5.8 黄瓜诱导愈伤及分化培养基2）： MS+NAA 2mg/L

14、+6-BA 0.2mg/L +30g/L 蔗糖+7g/L 琼脂粉， pH5.8 每组配上述两种培养基各800ml ，每人准备5支试管倒第一种培养基，3支试管倒第二种培养基。步骤：1、在搪瓷量杯内加入500ml去离子水。2、称取800ml所需MS培养基粉剂置于搪瓷量杯中。3、加入所需植物激素母液。4、加入所需蔗糖及琼脂。5、置于电磁炉上加热至沸腾。6、定容至800ml。7、调节pH至5.8。8、试管分装。9、灭菌12115min。34精选ppt实验一：培养基配置花菜花茎段诱导培养基，黄瓜诱导愈伤及分化培植物再生植株的方式器官分化途径胚状体途径试管扦插途径35精选ppt植物再生植株的方式器官分化途

15、径37精选ppt外植体的成苗途径36精选ppt外植体的成苗途径38精选ppt来自于叶组织来源于根来源于维管组织来源于胚组织37精选ppt来自于叶组织来源于根来源于维管组织来源于胚组织39精选ppt器官分化途径烟草愈伤组织对不同生长素和细胞分裂素比值下不同的分化反应38精选ppt器官分化途径烟草愈伤组织对不同生长素和细胞分裂素比值下不同的外植体的成苗途径39精选ppt外植体的成苗途径41精选ppt40精选ppt42精选ppt愈伤组织来源的体细胞胚再生过程（间接体细胞胚发生）41精选ppt愈伤组织来源的体细胞胚再生过程（间接体细胞胚发生）43精选p直接体细胞胚发生42精选ppt直接体细胞胚发生44

16、精选ppt从一个细胞发育成一个植株43精选ppt从一个细胞发育成一个植株45精选ppt双子叶体细胞胚发育的三种形态A球形期B心形期C鱼雷期44精选ppt双子叶体细胞胚发育的三种形态A球形期B心形期C鱼雷期46精选试管外生根45精选ppt试管外生根47精选ppt芽-芽再生46精选ppt芽-芽再生48精选ppt节培养47精选ppt节培养49精选ppt小鳞茎、小球茎的诱导48精选ppt小鳞茎、小球茎的诱导50精选ppt微嫁接技术49精选ppt微嫁接技术51精选pptHorizontal genome transfer as an asexual path to the formation of ne

17、w speciesNarure 2014, Vol. 5 1 1, 232-23650精选pptHorizontal genome transfer as 51精选ppt53精选ppt52精选ppt54精选ppt53精选ppt55精选ppt54精选ppt56精选ppt影响愈伤组织形态发生的因素55精选ppt影响愈伤组织形态发生的因素57精选ppt浙江高考理综201056精选ppt浙江高考理综201058精选ppt培养基1）：MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂 PH=5.8培养基2）：MS+NAA2mg/L+6-BA0.2mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂 PH

18、=5.8实验三 不同植物激素对黄瓜子叶与下胚轴诱导愈伤组织及分化的影响一、实验目的1. 了解不同组织对相同激素配方的响应2. 了解不同激素对外植体愈伤组织及分化的影响二、实验原理同一植物不同组织诱导愈伤组织及其分化受外植体来源及培养基配方的影响。三、实验步骤1、在超净台上取无菌滤纸一张置于台面上，打开兰花培养瓶，用镊子夹取一幼苗置于滤纸上。2、用解剖刀切下子叶上部、下部及带子叶节的胚轴，分别接种于上述培养基中。子叶背面朝下，下胚轴斜插于培养基上。3、根据不同培养时间记录不同培养基上上子叶、下子叶及下胚轴愈伤组织发生情况及芽诱导情况制表并填写，同时拍照记录。57精选ppt培养基1）：MS+6-B

19、A2mg/L+NAA0.2mg/L+三、植物组织培养技术的应用1、植物的快速繁殖58精选ppt三、植物组织培养技术的应用1、植物的快速繁殖60精选ppt2、培育无病毒植株选取分生组织的生长点细胞（如茎尖）3、制造人工种子胚状体经特定的物质包被59精选ppt2、培育无病毒植株选取分生组织的生长点细胞（如茎尖）3、4、培育作物新品种单倍体育种培育转基因植物5、工厂化生产细胞产物60精选ppt4、培育作物新品种单倍体育种培育转基因植物5、工厂化生产细胞细胞悬浮培养植物细胞的悬浮培养（Suspension culture）是从愈伤组织的液体培养的基础上发展起来的一种培养技术，与用发酵罐培养微生物相类似

20、，用生物反应器进行植物细胞悬浮培养的理想状态。61精选ppt细胞悬浮培养植物细胞的悬浮培养（Suspension culCallus inductionSuspension initiation62精选pptCallus inductionSuspension ini细胞悬浮系的建立63精选ppt细胞悬浮系的建立65精选ppt原生质体培养与植物细胞工程植物细胞工程：以植物细胞为基本单位在体外条件下进行培养、繁殖和人为操作，改变细胞的某些生物学特性，从而改良品种加速繁育植物个体或获得有用物质的技术（百度百科） 64精选ppt原生质体培养与植物细胞工程植物细胞工程：以植物细胞为基本单位植物原生质体

21、（Protoplast）是被去掉细胞壁的由质膜包裹着的、具有生活力的裸细胞。65精选ppt植物原生质体（Protoplast）是被去掉细胞壁的由质膜包66精选ppt68精选pptMechanical method of protoplast isolation机械法分离原生质体67精选pptMechanical method of protoplasPrinciple steps in enzymatic isolation酶法分离原生质体示意图68精选pptPrinciple steps in enzymatic i过滤漏斗原生质体的纯化与培养69精选ppt过滤漏斗原生质体的纯化与培养71精

22、选ppt原生质体到细胞团过程70精选ppt原生质体到细胞团过程72精选ppt细胞团到愈伤组织至完整植株71精选ppt细胞团到愈伤组织至完整植株73精选ppt细胞融合技术（原生质体分离）72精选ppt细胞融合技术（原生质体分离）74精选ppt73精选ppt75精选ppt通过农杆菌侵染的转基因技术74精选ppt通过农杆菌侵染的转基因技术76精选ppt组织培养中次生代谢产物的获得75精选ppt组织培养中次生代谢产物的获得77精选ppt通过生物反应器大量生产毛状根76精选ppt通过生物反应器大量生产毛状根78精选ppt冰冻种质保存技术（悬浮细胞）77精选ppt冰冻种质保存技术（悬浮细胞）79精选ppt

23、1、用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织，下列叙述错误的是（ ）A 该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B 该愈伤组织的细胞没有全能性C 该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成D 该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构构习题B78精选ppt1、用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培习题B80精选2、将胡萝卜形成层的细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（ ） A 具有完整细胞核的细胞 B 一定的营养物质和植物激素C 离体状态 D 导入特定基因习题D79精选ppt2、将胡萝卜形成层的细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（3、在下列选项中，没有采用植物组织培养技

24、术的是（ ） A 利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株B 利用花药离体培养得到单倍体植株C 利用基因工程培育抗寒的番茄植株D 利用细胞工程培育“番茄马铃薯”杂种植株习题A80精选ppt3、在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的是（ ） 习题实验二 花菜花茎段的诱导81精选ppt实验二 花菜花茎段的诱导83精选ppt82精选ppt84精选ppt83精选ppt85精选ppt84精选ppt86精选ppt85精选ppt87精选ppt86精选ppt88精选ppt87精选ppt89精选ppt教材相关问题多少酒精消毒时间合理？带一片叶片意味着什么？菊花快繁是否一定经历愈伤组织阶段？88精选pp

25、t教材相关问题多少酒精消毒时间合理？90精选ppt2015年9月浙江省新高考测试卷89精选ppt2015年9月浙江省新高考测试卷91精选ppt2015年10月浙江省选考90精选ppt2015年10月浙江省选考92精选ppt浙江省2016年4月选考题91精选ppt浙江省2016年4月选考题93精选ppt三、试管苗驯化与移栽92精选ppt三、试管苗驯化与移栽94精选ppt试管苗的生态环境高温且恒温高湿弱光无菌气体环境93精选ppt试管苗的生态环境高温且恒温95精选ppt试管苗的特点叶片解剖结构：海绵细胞层增加而栅栏组织较差，表皮的蜡质层减少，气孔发育差且开关能力低下。生理：组培苗的气孔保卫细胞的含

26、钾量低，叶片的光合作用能力低。根系发育：一般无根毛或根毛发育极差，根系对基质的附着能力较差。抗性：抗病能力差，易感病死亡。由于试管苗的上述特点，因此幼苗移栽入土后极易失水死亡。94精选ppt试管苗的特点叶片解剖结构：海绵细胞层增加而栅栏组织较差，表皮试管苗的驯化驯化的目的，在于提高试管苗对外界环境条件的适应性，提高其光合作用的能力，促使试管苗健壮，最终达到提高试管苗的移栽成活率。驯化的原则，应从温度、湿度、光照及有无菌态等环境要素进行，驯化开始数天内，应和培养时的环境条件相似；驯化后期，则要与预计的栽培条件相似，从而达到逐步适应的目的。尽可能采用无糖培养技术。95精选ppt试管苗的驯化驯化的目

27、的，在于提高试管苗对外界环境条件的适应性96精选ppt98精选ppt97精选ppt99精选ppt被动式通气系统98精选ppt被动式通气系统100精选ppt主动式通气系统99精选ppt主动式通气系统101精选ppt涉及无糖培养技术的高考题2010浙江理综100精选ppt涉及无糖培养技术的高考题2010浙江理综102精选ppt铁皮石斛移栽与驯化101精选ppt铁皮石斛移栽与驯化103精选ppt102精选ppt104精选ppt103精选ppt105精选ppt日常管理灌溉：1、水质要求：如果用自来水必须提前一天接好自来水，暴晒 1 天，让氯气挥发出去。2、浇水时间：早上太阳照射前或晚上太阳照射后，最好

28、是早上。3、浇水量：一次性浇透，直至栽培盆底持续滴水。4、浇水方式：用喷雾器雾化浇水，主要把水分浇在叶面上而不是基质上。5、当苗存活后，大约到 23 个月可以适当多浇水。光照说明1、光照时间：光照时间和浇水量是相互作用的，如果基质浇水后不容易干，要适当增加光照时间，光照时间 25 个小时，视环境而定。2、光照环境：家庭种植最好放阳台（可以通风），但切记勿淋雨，阳台配置遮阴网或者透明塑料膜后（遮光率在 70%左右最佳）。3、环境选择：如果不能配置遮阴网或者透明塑料膜，最好选择阳光直射2-3 个小时，而不是放在阴暗处。这样有利于水分蒸发。104精选ppt日常管理灌溉：106精选ppt4、人工种子105精选ppt4、人工种子107精选ppt植物人工种子是指将植物离体培养中产生的胚状体，包裹在含有养分和具有保护功能的外种皮中，使其在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒。现在已经扩大到包括包裹芽体、小鳞茎等。人工种子与天然种子非常相似，都是由具有活力的胚胎，营养物（人工胚乳）和具有保护功能的外部结构（种皮）构