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文档简介
1、第十章 生物素-亲和素放大技术(Chapter 10 Biotin-Avidin Immune Amplification Technique)临床免疫学检验第十章 生物素-亲和素放大技术 生物素-亲和素系统(biotin-avidin system):是基于生物素和亲和素既能偶联抗原/抗体分子,又能偶联酶、荧光素等示踪物质。 BAS具有特异、敏感、稳定、灵活等多种优势,其高亲和力和多级放大效应,赋予传统标记免疫分析更高的检测敏感度。第一节 生物素-亲和素系统(Section 1 Biotin-Avidin System)一、组成常从含量较高的卵黄和肝组织中提取;又称维生素H;环为咪唑酮环,结
2、合亲和素;环为噻吩环,戊酸侧链末端羧基标记抗体或其他分子。1生物素(B)一、组成1生物素(B)第一节 生物素-亲和素系统一、组成又称抗生物素蛋白,常从卵白蛋白中提取;由4个相同亚基组成的四聚体,可结合4个亲和素分子的环;pH913中性质稳定、耐热、耐多种蛋白水解酶作用;链霉亲和素属弱酸性蛋白,分子结构中不含任何糖基,与固相材料、组织细胞基质非特异结合较低。2亲合素(A)第一节 生物素-亲和素系统二、特点极高的亲合力而呈现高度特异性和稳定性,明显降低或避免了非特异性结合。1高特异性第一节 生物素-亲和素系统二、特点1高特异性2高敏感性1:4生物素化形成许多“触手”的多价制剂,使整个反应体系出现多
3、级放大效应,赋予检测系统极高的敏感性。第一节 生物素-亲和素系统二、特点1高特异性2高敏感性3强稳定性高亲合力,解离常数很小,呈不可逆反应;酸、碱、变性剂、蛋白水解酶等不影响其结合;稳定性强,干扰因素少,提高检测的精密度。第一节 生物素-亲和素系统二、特点1高特异性2高敏感性3强稳定性4强实用性可与多种示踪物质联合,用于多种生物学反应体系;高工作效价,可降低抗体用量,节约成本;生物素化标记物稳定性好,有效期长。第一节 生物素-亲和素系统第二节 生物素-亲和素系统的应用(Section 2 Application of Biotin-Avidin System)一、应用于固相载体的包被环节第二节 生物素-亲和素系统的应用二、应用于检测系统的信号放大(一)生物素-亲合素-生物素模式(BAB)ABC-ELISA检测原理示意图第二节 生物素-亲和素系统的应用二、应用于检测系统的信号放大(二)生物素-亲合素模式(BA)LAB-ELISA检测原理示意图化学发光免疫测定的临床应用灵敏度高,特异性强;线性范围宽;标记物稳定,试剂有效期长;自动化程度高,检测菜单齐全。思考题1生物素和
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