同济医院检验科ISO15189体系文件2.15结合非结合胆红素（BuBc）测定VIP

1、同济大学附属同济医院检验科临检组干化项目操作指导书TJYYJYKLJ/GHZ215第2版标题： 结合非结合胆红素（BuBc）测定第2章 第15节第 PAGE 3 页 共2页1. 目的：保证结合非结合胆红素（BuBc）测定结果准确、可靠2. 适用范围：BuBc在全自动干式分析仪上的检测3. 项目名称：BuBc4. 检测方法：终点比色法（双波长）5. 检测原理：将一滴10l的患者样品滴于干片上，样品在分布层均匀扩散。在咖啡因和苯甲酸钠作用下，非结合胆红素脱离白蛋白。与结合胆红素一起穿国屏蔽层到达试剂层。由于屏蔽层能阻止分布层中潜在的干扰性复合物通过，使得蛋白质（包括白蛋白附着的Delta胆红素和血

2、红蛋白）、脂类和脂色素仍留在分布层。在试剂层，结合胆红素和非结合胆红素附着于阳离子媒染剂，使胆红素的吸收峰发生变化，克分子消光系数显著上升。与媒染剂结合的胆红素单葡萄糖醛酸和双葡萄糖醛酸，有确定的光谱并可定量测试。在波长400-420nm附近，Bu和Bc有相近的摩尔吸收率；而在460nm处，Bu的吸收率强于Bc。由于这个特殊的光谱特性，在这两个波长处（400nm和460nm）测反射光强度，就可以分别确定Bu和Bc的浓度。6. 试剂：6.1 检测试剂：6.1.1 品牌：美国强生6.1.2 货号：83830516.1.3 包装规格：300片/盒6.1.4 干片成分：反应成分：咖啡因，苯甲酸钠和媒染

3、剂。其它成分：染色剂，粘合剂，缓冲剂，表面活性剂，稳定剂和聚合物交叉连接剂。6.2 定标液：6.2.1 品牌：美国强生6.2.2 包装规格：KIT4干粉3ml/瓶；稀释液5ml/6.3 质控物：6.3.1 品牌：美国强生6.3.2 包装规格：V250质控品干粉3ml/瓶；稀释液5ml/瓶7. 仪器：VITROS2508 操作：测定波长 400nm和460nm 测试时间和温度 37约5分钟 样品量 10l 具体操作见：强生VITROS250全自动干式生化分析仪操作指导书（编号TJYYJYKLJ/YQZ406）9. 线性范围：0462mol/L10. 参考范围：成人：Bu：0-19umol/L，B

4、c：0-5umol/L 新生儿：Bu：10-180umol/L，Bc：0-10umol/L临床意义黄疸分为结合（Bu）与非结合（Bc）胆红素过高两类。溶血性病变，Gilbert综合症，Grigler-najjar综合症，新生儿黄疸、无效红细胞生成症以及药物，竞相与葡萄糖醛酸结合都可造成血浆中非结合胆红素升高。而一些肝胆疾病，包括肝内和肝外胆管阻塞、肝细胞损害、Dubin综合症和Roter综合症都可造成血浆中结合胆红素升高。新生儿胆红素，即结合（Bu）与非结合（Bc）胆红素之和，在患胎儿幼红细胞增多症（新生儿溶血病）时升高，该病症可造成新生儿初生1-2天内出现黄疸。其他包括生理性黄疸、血肿/出血、甲状腺机能不全、阻塞性黄疸，也会诱发新生儿黄疸。12. 标本要求：血浆（肝素锂抗凝，04真空采血管）13. 注意事项：13.1 血清中含有胆绿素、左多巴、甲氨蝶呤、呋喃妥因、哔多昔康、非那哔啶等会影响检验结果。 接受大面积照光治疗的患者，由于光合胆红素的形成会使Bc浓度升高。1