检验中心培训课件10 蒋玲丽-临床PCR实验室常见问题及整改措施 上海市临床检验中心

1、临床PCR实验室常见问题分析及整改措施上海市临床检验中心 蒋玲丽2019.3.25人员资质督察内容存在问题整改措施1.负责人应至少具有中级专业技术职称、 1.未取得上岗证的 1.及时参加培训医学检验或相关专业背景。有从事分子诊断工作的经历。2.操作人员应具备相关资质并经过有资质的培训机构培训合格取得上岗证后方可上岗。至少具有 2 名本单位在职检验/检查人员。人员独立操作；取得上岗证；2.病人报告单上的 2.规定报告审核检测人员和审核人 操作规程。员与实际不一致；3.试剂公司人员参与检测。3.签发分子病理报告的医师应至少具有中级病理学专业技术职务任职资格，并有从事分子病理工作的经历。至少1名。4

2、.签发分子遗传报告的医师应至少具有中级遗传学专业技术职务任职资格，并有从事分子遗传工作的经历。至少1名。2人员能力评估督察内容存在问题整改措施1.应每年评估员工 1.缺培训计划或 1.制定培训制度，每年制定针对性培训的工作能力。对新进员工在最初 6 个月内应至少进行 2次能力评审，保存评估记录。针对性计划。计划，培训并记录。2.培训形式可以多样：讲座、自学、观看示例、现场检测。3.效果评估形式：口头提问、笔试、现场操作演示、合格证、培训小结。2.缺培训记录或效果评估记录 。3.缺新进人员岗前培训记录。2.当职责变更时，或离岗 6 个月以上再上岗时，或政策、程序、技术有变更时，应对员工进行再培训

3、和再评估，合格后才可继续上岗，并记录。4.制定员工能力评审内容和方法,定期评审员工的工作能力，并保存胜任的证据：直接观察常规工作过程和程序、直接观察设备维护和功能检查、监控检验结果的记录和报告过程、核查工作记录、评估解决问题的技能、检验特定样品（留样等）。4.再上岗缺再培训和再评估记录。5.缺员工能力评审记录。3人员管理督察内容存在问题整改措施应建立全部人员相 1.实验室技术人员档案 实验室应分册建立技术关的教育背景、专 内容过于简单：只有学 人员技术档案，档案至业资格、培训、经 历、职称、PCR上岗证 少应包括以下内容：历及能力记录档案。 书复印件。教育和专业资质、 证书或执照的复印件 、以

4、前的工作经历、 岗位描述、 新员工入岗前介绍、岗位培训、能力评审等资料，并定期更新。2.未及时更新。4设施和环境条件督察内容存在问题整改措施应实施安全风险评估， 有些临床实验室没有限制措施， 安装门禁或贴标识加以限如果设置了不同的控 可以随意出入。制区域，应制定针对性的防护措施及合适的警告。制和控制；非检测人员进出登记。5设施和环境条件督察内容存在问题整改措施1.涉及基因扩增检验的 缓冲间大门敞开；部分缓 1. 实验时随手关门冲间相通；物品交叉使用实验室分区。2.开展下一代测序2.缓冲间相同的实验室应封锁通道（NGS）技术的实验室设置遵循 “工作有序、互不干扰、防止污染”的基本原则。3.开展孕

5、妇外周血胎儿游离DNA产前筛查与诊断的实验室，标本制备区不能与其他项目的标本制备区共用。3.各区物品可粘贴区域标识。注明科研未根据项目相应增加区域 根据使用技术的要求相应增（如杂交法和芯片法等； 加区域新项目如NIPT、药物）试剂准备区形同虚设（无 试剂分装应在试剂准备区操作移液器等）未安装冲眼器或不能正常 II区安装冲眼器并保证正常4.分子病理实验室应设置独立的标本前处理区，包括切片区和脱蜡区。出水移动紫外车缺或已坏未及 各实验区配备移动紫外车并时更换 保证正常使用状态使用状态67实验时不关门8增加项目后增加区域9NIPT项目增加区域10样本污染？生物安全？11储存设施督察内容存在问题整改措

6、施用以保存临床样品和 1.冰箱温度记录无范围或范围 1.根据试剂储存要求设置范围。试剂的设施应设置目 设置不合实际。标温度和允许范围，并记录。实验室应有温度失控时的处理措施并记录。2.未真实记录或记录不正确。 2.根据温度计显示温度真实记录。超过范围及时处理。12冰箱温度范围不合适13冰箱温度记录依据不合适；无范围。14不能满足试剂储存15设施维护和环境条件督察内容存在问题整改措施不同的实验区域 1.清洁用具混用，无标识。 1.各区清洁用具做好标识。应当有其各自的 2.无相应的消毒记录。 2.配备相应的消毒用品（消毒清洁用具以防止 3.有记录无相应的消毒用品。 片、酒精等）。消毒后做好记交叉污

7、染。工作结束后应立即对工作区进行清洁，必要时进行消毒及去污染。录。16设施维护和环境条件督察内容存在问题整改措施应依据所用分析 1.无温湿度范围。设备和实验过程 2.未实时记录。的要求，制定环设计合适的表格并记录境温湿度控制要求并记录。应有温湿度失控时的处理措施并记录。17温度25湿度50%无温湿度范围18设施维护和环境条件督察内容存在问题整改措施分子检验各工作区域应有明确的 实验室检验流 1.文件规定流向要求。标记。进入基因扩增实验室各工 程设计满足单 2.实际操作按规定操作。作区应按照单一方向进行，即试 一方向要求但剂贮存和准备区样品制备区 实际操作未满扩增区扩增产物分析区。不同 足要求。

8、的工作区域宜使用不同的工作服（如不同的颜色）。工作人员离开各工作区域时，不应将工作服带出。19设备管理应保存主要设备的档案，档案内容应包括：设备标识、型号、序号或其它唯一性识别、到货日期和投入运行日期、目前放置地点、接收时的状态、仪器使用说明书或其存放处、证实设备可以使用的设备验证报告、校准和/或检定报告、维护、损坏、故障或维修的记录。20仪器名称制造商名称设备型号出厂编号实验室设备编号接受日期接收状态启用日期目前放置地点本次校准日期校准单位下次校准日期迄今所进行的维护今后维护计划备注建议仪器接收时建立档案21设备督察内容存在问题整改措施从事RNA检测，宜配备70的冷 1.标本制备区未使 根据

9、项目要求选冻设备。需要时，配备高速冷冻离 用含滤芯吸头。用设备耗材，做心机。 标本制备区使用的一次性加样器吸头应带有滤芯。PCR试验用容器应可密闭，不同工作区域内的设备、物品不能混用 。组织标本前处理区的设备通常应包括切片机、裱片机、切片刀、电热恒温箱、脱蜡缸、水化缸及HE染色缸等。好设备区域标识。2.采用有粉手套。3.部分可移动小设备不同区域混用。4.RNA检测项目未配备冷冻离心机。222324科研仪器明确标识25仪器明确标识状态26设备校准和计量溯源督察内容存在问题整改措施实验室应建立设备的校准程 1.缺校准程序。 1.根据仪器的实际使用要序，相应程序中至少应包括 或缺校准详细 求，制定实

10、际使用量程的需校准的设备、校准单位、 内容。检定或校准计划，并写入校准周期、校准参数、校准参数符合相关检验目的和要求等内容。需内部比对、校准的辅助设备，实验室宜根据国家计量部门或生产厂商的规定制定比对或内部校准操作规程和要求。SOP中。2.缺年度校准计划。2.制定内部比对操作规程，并可实施。包括比对结果的判读等。3.缺内部比对操作规程。3.根据程序每年制定校准计划。27设备校准和计量溯源（外部校准）督察内容存在问题整改措施应按国家法规要求对强检设 1.仪器投入使用前未进行校 1.校准SOP中制定仪器校准参数、校准周期、判断标准备进行检定。准或未定期校准或部分未校应定期对测序仪、基因扩增仪、杂交

11、仪、加样器、微量分光光度计、温度计、恒温设备、离心机和生物安全柜等进行校准。有合格的校准报告，并对校准参数实施评估。当校准给出一组修正因子时，应确保之前的校准因子得到正确更新。2.校准未覆盖检测量程（移液器、恒温金属浴）2.实验室检测人员提出校准要求3.校准不符合要求设备仍使用3.实验室审核校准报告4.校准报告中数据错误未发4.尽量提供原始数据，尤其是有些厂家校准或检定的仪器。现5.未引用校准因子（例温度计、恒温金属浴）6.缺原始记录（扩增仪）28注1：测序仪校准参数宜至少包括：缓冲液液路、光路、反应温度。注2：扩增仪校准参数宜至少应包括：温度示值误差、温度均匀度、平均升温速率、平均降温速率、

12、样本示值误差和样本线性，技术性能指标应满足JJF1527-2015聚合酶链反应分析仪校准规范的要求。注3：高速冷冻离心机校准参数宜包括：转速和温度（适用时）。注4：恒温金属浴的校准宜包括：温度示值误差和温度均匀度，并覆盖常用的检测温度。注5：移液器的检定应包括：容量允许误差和测量重复性，计量性能要求应符合JJG646-2006移液器检定规程的规定。29如何判断符合不符合！？30容量允许误差（%）容量允许误差（%）标称容量 检定点（l） （l）标称容量 检定点（l） （l）重复性（%）重复性（%）0.10.5120.020.012.020.012.012.020.012.08.010.010.0

13、6.0212.08.04.012.08.04.08.04.03.08.04.03.06.04.02.06.04.02.04.02.01.54.02.01.5201020210.2110.06.0254050102552526.00.5110.06.02040554.0112.08.06.054.0255010108.04.031容量允许误差（%）容量允许误差（%）标称容 检定点量（l） （l）标称容量 检定点（l） （l）重复性（%）重复性（%）10508.03.02.04.02.01.54.02.01.53.02.01.54.01.51.02.01.01.02.01.01.01.51.01.

14、01005002.01.01.01.51.00.51.00.50.61.00.60.61.00.50.51.50.50.20.50.20.20.50.20.210001002002503001002010002501002002525005000125025005001252505025005000100050001000015030010000JJG646-2006检定规程有允许范围的要求，应写入SOP！32金属浴校准报告33金属浴校准报告34移液器校准在100 l ，500 l和1000 l三个校准点的准确度和精确度完全一致！校准数据不真实！35一个医院两次的校准报告！校准数据不真实！36

15、不符合校准报告未经分析，并仍在使用。37授权了经销，但未授权校准资质。38设备校准和计量溯源（内部比对）督察内容存在问题整改措施分析设备和 1.无相应的内部比对操作规 1.完善操作规程2.保留用于比对的仪器的校准报告并保证校准合格，并在比对时引入校准因子。3.用于比对的仪器应覆盖需要比对仪器的量程。4.内部比对记录信息最少应包括：比对设备编号、 用于比对设备的校准信息（校准日期、校准有效期、校准单位）、比对时间、标准设备实测数据、比对设备实测数据、判断标准、结论、比对人、比对日期、科室负责人。辅助设备的内部校准应符合 CNAS-CL 31内部校准要程2.用于比对的仪器未校准（移液器-无相应校准

16、过的天平；温度计-无相应校准过的温度计）求。3.用于比对器具量程不适合4.无记录、记录信息不全或记录不真实5.比对时未引入比对器具的校准因子。39用于比对的温度计量程不合适！40仪器编号？人员？标准？41仪器编号重复？记录可靠性？42用于比对的温度计在比对-20时应该引入校准因子！43用于内部温度计校准44比对设备编号比对环境记录详细的比对记录原始信息记录比对结论比对日期、比对人员、科室负责人等45设备维护与维修督察内容存在问题整改措施设备故障后，应首先分析故障原 1.缺部分仪器 根据仪器说明书制定每台仪器因，如果设备故障可能影响了方 的保养计划 的保养计划，并写入SOP中，法学性能，故障修复

17、后，可通过 2.缺维修后验 并编入使用记录表中。合适的方式进行相关检测验证 证。（a） 可校准的项目实施校准验证，必要时，实施校准；（b） 质控物检验，其检验结果在允许范围内；（c） 与其他仪器或方法比对。（d） 以前检验过的样品再检验。留样再测判断标准：按照项目稳定性要求选取最长期限样品。定性项目：选择阴性和弱阳性样品各1份，测量结果与预期结果一致。定量项目：选取5 份样品，覆盖测量区间，至少 4 份样品测量结果偏倚7.5%。46试剂耗材管理督察内容存在问题整改措施实验室应对新批号或同一批号不同货运号的试剂和关键耗材进行验收，验收试验至少应包括：（a） 外观检查：肉眼可看出的，如包装完整性、

18、有效期等；试剂及耗材存在过期根据使用数量订购试剂未对耗材进行质检或质检 进行耗材抑制物质检（除非不完整 标明不含抑制物）（b） 性能验证：通过实验才能判断的，如试剂的核酸提取效率和核酸扩增效率、 试剂的批间差异、关键耗材的抑制物等。1.未对不同试剂批号进行 1.不同批次试剂需要质检质检2.采用临床标本质检2.使用质控品质检3.质检后应有判断规则进行3.质检后不知道如何判断 判断47注：试剂性能验证记录应能反映该批试剂的核酸提取效率和核酸扩增效率。一般情况下，临床实验室在新批号试剂或关键耗材使用前，应验 证试剂批间差异和耗材的抑制物，符合下列要求即可视为满足要求。用于定性检验的试剂，选择阴性和弱

19、阳性的样品进行试剂批号验证。用于定量检验的试剂，应进行新旧试剂批间的差异验证，选取 5 个旧批号检测过的样品，覆盖测量区间（包括阴性、临界值、低值、中值和高值），至少 4 个样品测量结果偏倚 7.5%，其中阴性和临界值样品必须符合预期。耗材的抑制物验收（除非已标明不含抑制物）：对关键耗材应检测是否存在核酸扩增的抑制物，选取 5 个旧批号检测过的样品，覆盖测量区间（包括阴性、临界值、低值、中值和高值），至少 4 个样品测量结果偏倚 7.5%，其中阴性和临界值样品必须符合预期。48标明不含抑制物的请供应商提供证明文件，可不进行耗材抑制物质检！4950采用试剂盒标准品进行试剂质检！51频繁入库耗材，

20、又不真实记录。52样品采集和运送督察内容存在问题整改措施1.应规定分子诊断样品留取的具体要求，如： 1.操作规程未涉及所有样品类型的细化操作规程，规定不同类型样品的要求（包括血液、分泌物、痰液等）使用无 DNase 和/或无 RNase 的一次性密闭容器；正确使用抗凝管：通常全血和骨髓样品应进行 采集和运送抗凝处理，EDTA 和枸橼酸盐为首选抗凝剂，不使用肝素抗凝（核酸提取采用吸附法而不受肝素干扰时除外）；用于 RNA（如 HCV RNA）扩增检测的血样品宜进行抗凝处理，并尽快分离血浆，以避免 RNA的降解；如未作抗凝处理，则宜尽快分离血清。分泌物、拭子、肿瘤组织等样品留取的注意事项等。要求2

21、.RNA样本未及时分离血清（操作规程未规定时间）2.样品运送应符合相关时间、温度、生物安全的要求5354试剂盒都简单提供样本采集要求，但不会提到验收和拒收的具体标准！实验室应根据实际情况制定标准！55样品接收督察内容存在问题整改措施当标本验收不合格，如患者识别或样品 1.接收标本时标本 1.应记录收到标本识别有问题、运送延迟或容器不适当导 状态信息记录不完 的日期和时间，同致样品不稳定、样品量不足，样品对临 善（尤其是独立实 时应记录标本接收床很重要或样品不可替代，而实验室仍 验室）时的详细状态选择处理这些样品，应在最终报告中说明问题的性质，并在结果的解释中给出警示（适用时）。示例：脑脊液、关

22、节腔穿刺液等。基于组织/细胞学形态基础的分子检测项目应由具有病理诊断资质的医师确认样品是否满足检测要求。2.分泌物标本、分 2.实验室应确定标子病理标本缺验收 本是否符合检测要记录求, 拒收标本原因要明确3. 拒收原因缺定期分析及整改措施 3.拒收原因定期评4.检测前、后标本 估，制定切实可行放置同一冰箱，未 的整改措施，提高标识区分工作效率4.标本分区放置，或用标识加以区分56样品分区放置并加以标识！57样品接收督察内容存在问题整改措施所有取自原始样品的部分样品应可明确追溯至最初的原始样品 。标本检测全过程包括核酸提取、扩增、产物分析、保存等应能溯源至原始标本。分子病理检测项目在检测过程中应

23、以病理号作为原始标本、取材标本（包埋盒）、蜡块或切片的唯一性标识。孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查与诊断的实验室其采血管应当有唯一编号，该编号应当与知情同意书、检测申请单和临床报告单编号一致。原始记录、样本保 无论采用何种方法保证标本的唯一编号。存及在操作过程中部分未使用唯一编号；留存标本未使用唯一编号58样本留存无唯一编号59标本号不唯一，除非有可以证明溯源性的措施！60HPV分型原始数据保存61检验方法的验证与确认检查方法存在问题整改措施检查方法学 1.缺操作规程1.完善操作规程验证操作规程2.如对试剂或方法进行重要修改，应对所采用的试剂或方法进行性能验证，实验室应独自完成验证试验，并选择

24、有资质的实验室比较。定量：精密度、正确度、线性范围、检出限等2.更换仪器只做部分项目的验证；验证参数不全、标本数量不足。3.参比方法选择有缺陷，无法比较4.试剂性能更换未做验证（如定量改为定性、标本类型更换）新开展项目或仪器、试剂、方法更新时，应有方法学验证的实验记录定性：精密度、 特异性、准确度（方法学比较或与金标准比较）等5.不是实验室完成如开展分子诊断自建项目，应有程序评估并确认精密度、正确度、参考范围、可报告范围、分析灵敏度、分析特异性等分析性能符合预期用途，必要时还需进行临床验证。确认结果应经过实验室负责人审核并签字。62整改措施注1.性能验证参考文件 -美国临床和美国国家临床实验室

25、标准协会（CLSI）文件CLSI EP5-A2定量测量方法的精密度性能评价CLSI EP9-A2用患者样本进行方法学比对及偏倚评估CLSI EP15-A用户对精密度和准确度性能的核实指南CLSI EP6-A定量测量方法的的线性评价：统计方法注：性能验证过程中所有的检测数据均为一个独立测试的结果，不能采用提取好的DNA或RNA进行评估63实验室根据实际使用情况选择并进行验证！64室内质控1督查内容存在问题整改措施应制定室内质量控制程序如检测过程中对被检基因组DNA质量有规定时，应符合制造商规定的要求， 目)。并保留 DNA 质量评价记录。1.室内质控未覆盖全 1.规定每个项目的室内质控操作规程。

26、部项目(尤其定性项2.初审实验室方法学 2.质控品应监控对用于基因突变检测的石蜡包埋样品， 验证时有时不做室内应有病理医师从组织形态学对肿瘤细 质控。核酸提取、扩增、产物分析等标本胞的存在与否及其数量进行评价，并 3.采用提取好的DNA或 检测全过程。决定是否需要对肿瘤细胞进行富集。 RNA或试剂盒提供的质当分子诊断结果与临床和其他实验结 粒作为室内质控，未果不符时，应记录并分析原因，适当 监控核酸提取、扩增时采取纠正措施。整个过程。65室内质控2督查内容存在问题整改措施定性检测项目，每次实验应设置阴性、 1.不是每次实验都做 理解室内质控的弱阳性和/或阳性质控物。 室内质控。 作用；每次实验

27、如为基因突变、 基因多态性或基因 2.质控物未覆盖阴性、 都宜做室内质控。型检测，则应包括最能反映检测情况 弱阳和强阳。基因突的突变或基因型样品，每批检测的质 变未覆盖多型别。控至少应有一种基因突变或基因型，并建议在一定周期内涵盖所有基因突变或基因型 。并在操作规程中详细规定质控品设置。定量检测项目，每次实验应设置阴性、弱阳性和阳性质控物。66不做室内质控，只做标准品。67室内质控3督察内容存在问题整改措施质控规则应确保试验的稳定性和检验结 1.未及时判断；未及 实验室应根据统计果的可靠性。 时分析失控或分析流 学质控方法建立检定量检测项目质控图应包括质控结果、 于形式。 测项目的控制限。质控

28、物名称、浓度、批号和有效期、质 2.实验室未根据统计 并及时分析。控图的中心线和控制界线、分析仪器名 学质控方法建立实验 实验室应根据统计称和唯一标识、方法学名称、检验项目 室自身检测项目的控 学质控方法建立检名称、试剂和校准物批号、每个数据点 制限。的日期和时间、干扰行为的记录、质控人员及审核人员的签字、失控时的分析测项目的控制限。并进行累积评价。结果有效性判断未关 结果有效性判断除注标准曲线的相关系 室内质控结果在控数或内参是否满足试 外，还应满足试剂处理程序和纠正措施等。定性检测项目阴阳性符合预期。检测项目结果有效性判断除室内质控结果在控外，还应判断相关参数是否满足试剂说明书的要求。剂说

29、明书的要求。说明书的要求 。68结果有效性判断！69室内质控失控分析流于形式！70低值质控偏倚15.29%2017年第二次室间质评五个项目中有一个不符合，1721标本我室结果4.16，低于平均值4.7，检测结果偏低，可能是耗材方面原因，更换耗材后看能否提高扩增效率 2017.10HBVDNA低值数据偏低，可能为耗材原因，更换后看能否提高效率2017.171次数32斜率阈值相关系数 扩增效率-5.10-4.1258.9048.330.9739 57.06%0.9895 74.87%标准曲线不符合！3672次数24斜率相关系数扩增效率-3.35-3.38-3.210.99890.99940.998

30、498.84%未及时输入软件就不能2597.63% 及时发现失控！26104.89%73室内质控失控处理及原因分析多种因素可导致出现失控，这些因素包括：操作失误，试剂、校准物、质控物失效、仪器维护不良以及采用不当的质控规则和太小的质控限范围，一个分析批测定的质控物数不当等。寻找失控原因和处理的步骤如下：重新测定同一质控物新开一瓶质控物进行仪器维护或更换试剂重新校准请专家帮助注：如是真失控，在查出原因进行纠正后，应重新检测患者标本后发出检测报告。74弱阳性样本常见的失控原因核酸提取中的随机误差。如核酸提取中的丢失、有机溶剂的去除不彻底、标本中扩增抑制物的残留等。仪器的问题。如扩增仪孔间温度的不均

31、一性、孔内温度与所示温度的不一致性等。试剂的问题。如Taq酶和/或逆转录酶的失活、探针的纯度及标记效率和核酸提取试剂的效率等。阴性样本常见的失控原因主要为扩增产物的“污染”和/或临床标本的核酸提取过程中发生的标本间的交叉 “污染”。75室间质评督察内容存在问题整改措施应按照 CNAS-RL02能力验 1. 未签字。每次反馈结果应仔细对待签字确认，并分析室间质评反馈结果，对不合格项目，应及时查找原因，采取纠正措施。证规则的要求参加相应的能力验证/室间质评。 应保留参加能力验证/室间质评的结果和证书。实验室负责人或指定人员应监控室间质评活动的结果，并在结果报告上签字 。2.室间质评结果原因分析流于

32、形式，缺乏针对性。76室间质控失控处理及原因分析收集和审核数据：书写误差的检查质控记录，校准状况及仪器性能的检查如可行时，重新分析原来样品和计算结果评价该分析物实验室的历史检测性能问题分类书写误差方法学问题技术问题室间质量评价样品的问题室间质量评价的评价问题经调查后无法解释的问题77无室间质评项目的替代方案督察内容存在问题整改措施对没有开展能力验证/室 1. 未比对。 1. 对无室间质评的项目应间质评的检验项目，应 2.选择比对实验室无相 规定比对程序（包括比对实通过与其他实验室比对 关资质；比对样本不合 验室、样本数、样本浓度）。的方式确定检验结果的 适。2.应使用临床标本监测检测3. 样本

33、为非原始标本， 全过程。而是提取产物。可接受性3.确认结果并分析。4.未分析结果。应满足如下要求：规定比对实验室的选择原则；样品数量：至少 5 份，包括正常和异常水平或不同常见基因突变或基因型；频率：至少每年 2 次；判定：80%符合要求。分子病理、药物基因组学、产前筛查与诊断100%符合。结果不一致时，应分析原因，并采取有效的纠正措施，及时评估纠正措施有效性。78AB定量和定性比对？79检验结果的可比性督察内容存在问题 整改措施实验室使用两套及以上检测系统检测 1.未做验 1.同一个项目尽量同一项目时，应有比对数据表明其检证；固定在一个检测系测结果的一致性，比对频次每年至少1 次，样品数量不

34、少于 20，浓度水平应覆盖测量区间；计算回归方程，系统误差应7.5%。2.验证标 统上；每年至少1本量不足 次，每次至少20个3.未做人 样本。浓度覆盖测应定期（至少每年 1 次，每次至少 5 员比对。 量范围，计算回归份临床样品）进行检验人员的结果比方程，系统误差应小于7.5%。2.人员比对应写入操作规程。对、考核并记录。比对结果至少 4 个样品测量结果偏倚7.5%，其中阴性和临界值样品必须符合预期。80结果复核督察内容存在问题整改措施应制定定性检测项目临界标本 无复检制度, 应在操作规程中详细规的复检制度，复检范围和结果报告规则遵从试剂说明书规定的要求。NGS检测显示为影响临床决策的核酸变异结果，在签发报告之前，需要另外采用备选方法（如Sanger测序、SNP芯片等）对其进行确认。未按实际规定 定;进行复检 仔细审核报告，符合复检范围的进行复检并记录。81临床样品的储存、保留和处置督察内容存在问题整改措施原始样品、核酸提取物 1.操作规程未规定保存时 1.操作规程应详细规定；和/或核酸扩增产物应规 间；样品保存时间短于规 标本应按相关规定保存定保存期，便于复查。