中国兽药典 2015版一部抗生素部分

1、中国兽药典2015版宣贯 -抗生素部分内容一、附录 无菌检查法； 微生物限度检查法； 含量均匀度检查法； 效价测定法。二、中国兽药典2015版新增抗生素品种。三、中国兽药典2015版修订抗生素品种。四、标准物质通则和指导原则。一、附录无菌检查法总的修订原则： 照2015版中国药典（2015版CP）附录修定。2015版CP修改幅度较大。无菌检查内容与国外药典接轨。列表比较如下：一、附录无菌检查法 不同项 2010年版 2015年版1、试验环境万级环境下的百级单向流或隔离系统应在无菌条件下进行，试验条件必须达到无菌检查要求*2、试验员应具备微生物专业知识和培训删除此要求3、培养基(1) 硫乙醇酸盐

2、流体培养基(2) 改良马丁培养基 置23-28培养(3) 选择性培养基(4) 0.5%葡萄糖肉汤培养基(5) 营养琼脂培养基(6) 营养肉汤培养基(7) 改良马丁琼脂培养基(1) 硫乙醇酸盐流体培养基（FTG）(2) 胰酪大豆胨液体培养基（TSB） 置20-25培养(3) 中和或灭活用培养基（加了中和或灭火剂的FTG或TSB）(4) 0.5%葡萄糖肉汤培养基（和FTG、TSB一起 参与硫酸链霉素的无菌检查）(5) 胰酪大豆胨琼脂培养基(6) 沙氏葡萄糖肉汤培养基(7) 沙氏葡萄糖琼脂培养基*2015版CP中的药品微生物实验室质量管理指导原则指导意见 ：“应在B级背景下的A级单向流洁净区域内或隔

3、离系统进行”；2015版CP中的无菌检查用隔离系统验证指导原则中给出：“隔离器安装位置为D级洁净环境” (洁净环境级别参考药品现行版“GMP”分为A、B、C、D四个级别)。一、附录无菌检查法 不同项 2010年版 2015年版4、培养 基的灵敏度检查硫乙醇酸盐流体培养基金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌 （4种菌）（9支）枯草芽孢杆菌生孢梭菌 (2) 改良马丁培养基白色念珠菌黑曲霉 （2种菌）（5支）(3)菌液制备：0.9%无菌氯化钠溶液硫乙醇酸盐流体培养基生孢梭菌 金黄色葡萄球菌 （3种菌）（7支）铜绿假单胞菌(2) 胰酪大豆胨液体培养基枯草芽孢杆菌白色念珠菌 （3种菌)(7支)黑曲霉(3) 菌液制

4、备：pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液。5、方法适用性试验(1)名称的修订：方法验证试验(2)硫乙醇酸盐流体培养基接入小于100cfu的金黄色葡萄球菌大肠埃希菌 4种菌枯草芽孢杆菌生孢梭菌(3)改良马丁培养基接入小于100cfu的白色念珠菌黑曲霉 2种菌(4)培养时间 3-5天(1)改为：方法适用性试验(2)硫乙醇酸盐流体培养基中接入小于100cfu的金黄色葡萄球菌大肠埃希菌 3种菌生孢梭菌(3)胰酪大豆胨液体培养基接入小于100cfu的枯草芽孢杆菌白色念珠菌 3种菌黑曲霉(4)培养时间 不得超过5天一、附录无菌检查法注：10年版中药二部和一部的无菌检查方法一致， 15年

5、版建议中药也同样修订。不同项 2010年版 2015年版6、培养时间(1) 阳性对照 培养48-72小时(2) 转种的情况 细菌培养 2天、真菌培养 3天(1) 72小时内(2) 培养 3天7、试验用量(1)检验数量的修订检验数量是指一次试验用供试品最小包装容器的数量。除另有规定外，出厂产品按表1，上市产品监督检验按表2、表3 。表1、表2、表3中最少检验数量不包括阳性对照试验的供试品用量。一般情况下，如采用薄膜过滤法，应增加1/2的最小检验数量做阳性对照用；如采用直接加入法，应增加每种培养基中所接种的量做阳性对照用。(2) 检验量的修订检验量是指一次实验所用的供试品总量（g或ml）。除另有规

6、定外，每份培养基接种的供试品量按表2、表3规定。若每支（瓶）供试品的装量按规定足够接种两份培养基，则应分别接种硫乙醇酸盐培养基和改良马丁培养基。采用薄膜过滤法时，检验量应不少于直接接种法供试品的总接种量，只要供试品特性允许，应将所有容器内的全部内容物过滤。(3) 表2、表3的修订表2 液体制剂 检验量 +检验数量表3 固体制剂 检验量 +检验数量(1)检验数量的修订检验数量是指一次试验用供试品最小包装容器的数量。成品每亚批均应进行无菌检查。除另有规定外，出厂产品按表1，上市产品监督检验按表2、表3 。表1、表2中最少检验数量不包括阳性对照试验的供试品用量。删除该规定。删除原因：在阳性对照项已有

7、原则要求：“供试品用量同供试品无菌检查每份培养基接种的样品量。”(2) 检验量的修订检验量是指供试品每个最小包装接种至每份培养基的最小量（g或ml）。除另有规定外，供试品检验量按表3规定。如每支（瓶）供试品的装量按规定足够接种两份培养基，则应分别接种硫乙醇酸盐培养基和胰酪大豆胨液体培养基。采用薄膜过滤法时，只要供试品特性允许，应将所有容器内的全部内容物过滤。(3) 表2、表3的修订表2 为固体、液体 和医疗器具的检验数量表3为固体、液体 和医疗器具的检验量一、附录微生物限度检查法总修订原则：照2015年版CP药典附录修定CP2015版修改幅度较大，其内容与国外药典接轨。 2010版 2015版

8、 微生物限度检查法(1) 非无菌产品微生物限度检查： 微生物计数法(2) 非无菌产品微生物限度检查： 控制菌检查(3) 非无菌产品微生物限度标准一、附录微生物限度检查法 不同项 2010年版 2015年版1、试验环境万级环境下的百级应符合微生物限度检查的*微生物计数法2、计数方法(1) 平皿法 倾注法(2) 薄膜过滤法(1) 平皿法 倾注法 涂布法(2) 薄膜过滤法(3) 最可能数法（MPN法）3、目标检测菌细菌、霉菌及酵母菌需氧菌、霉菌和酵母菌4、培养基适用性检查菌种：大肠埃希菌金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌白色念珠杆菌黑曲霉(2) 培养基：细菌计数：营养琼脂培养基霉菌及酵母菌计数：玫瑰红钠琼脂

9、培养基和酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(3) 结果判定：被检培养基上的菌落平均数不小于与对照培养基上的菌落平均数的70%。菌种：铜绿假单胞菌菌金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌白色念珠杆菌黑曲霉(2)培养基：需氧菌总数：胰酪大豆胨琼脂培养基和胰酪大豆 胨液体培养基霉菌及酵母菌总数：沙氏葡萄糖琼脂培养基（含抗生素）和玫瑰红钠琼脂培养基(3)结果判定：被检培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5-2范围内。(4)增加了阴性对照 。*要求D级背景下的B级单向流空气区域一、附录微生物限度检查法不同项 2010年版 2015年版5、方法适用性试验名称的修订：计数方法的验证(2) /(3) 抗

10、菌活性的去除或灭活常用供试液的抑菌活性消除的方法培养基稀释法离心沉淀法薄膜过滤法中和法几种方法的联合使用(1) 名称改为：计数方法适用性试验(2) 增加了供试品微生物的回收方法(3) 抗菌活性的去除或灭活供试液接种后，按“微生物回收”规定的方法记性微生物计数。如试验组菌落数的值小于菌液对照组菌数值得50%，可采用下述方法消除供试品的抑菌活性。增加稀释液或培养基体积 加入适宜的中和剂或活灭活剂 采用薄膜过滤法 上述几种方法的可联合使用 删去了离心沉淀法6、供试品检查方法平皿法：倾注法薄膜过滤法(2) 培养条件营养琼脂培养基：30-35, 3天玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基：23

11、-28，5天方法平皿法：倾注法和涂布法薄膜过滤法MPN法：适用于含菌量较低的供试品需氧菌总数测定； 精确度不及薄膜过滤法和平皿计数法； 优点在于少量菌在经过增菌后进行直接观察结果， 通过查表得到计数结果； 该法不适合霉菌计数。(2) 培养条件胰酪大豆胨琼脂培养基：30-35, 3-5天沙氏葡萄糖琼脂培养基：20-25，5-7天(3) 增加了阴性对照7、计数标准菌数应：10cfu100cfu1000cfu10000cfu菌数应：101cfu 可接受的最大菌数为20102cfu 可接受的最大菌数为20015.0A+S=18.215.0不符合规定A+2.2S=19.315.0A+S=18.215.0

12、不符合规定B20131001101.7、101.6、102.1、101.8、102.0、102.0、101.8、101.4、102.0、102.1、101.4、101.8、101.2、101.8、101.3、100.9、100.8、100.8、102.0、101.2101.6%0.4492.42.6C2013100299.4、98.7、98.6、98.6、98.9、99.0、98.5、98.1、98.5、98.2、98.7、98.6、98.7、98.5、99.0、98.7、97.9、98.4、99.0、99.298.7%0.3642.02.1D20131001105.0、104.8、107.7

13、、107.7、107.1、107.2、106.6、106.2、105.7、105.7、106.9、106.8、107.1、107.0、107.4、107.8、106.1、106.1、106.1、106.1106.5%0.8648.18.4E2013101899.3、100.4、100.7、101.3、100.1、100.0、100.1、99.8、99.4、99.5、100.3、100.0、100.2、99.9、100.7、100.4、100.2、99.9、99.2、98.8100.0%0.5771.11.3F13100199.9、99.8、100.3、100.4、100.3、100.3、99.

14、9、99.4、99.9、100.4、99.6、99.7、99.9、100.0、100.2、99.8、99.9、99.7、100.0、99.6100.0%0.2870.60.6 一、附录含量均匀度检查法 举例2 模拟测定数据（%）参数 2010版 2015版90、90、90、90、90110、110、110、110、110A=0S=10.5A+1.8S=18.9 A+S=10.5应复试A+2.2S=23.1A+S=10.5应复试90、90、90、90、90、90、90、90、90、90110、110、110、110、110、110、110、110、110、110A=0S=10.2A+1.45S=

15、14.7小于15符合规定A0.25L A2+S2=1040.25L2=56.310456.3不符合规定一、附录抗生素微生物检定法抗生素微生物检定法是利用抗生素在低微浓度下有选择地抑制或杀死微生物的特点，以抗生素的抗菌活性为指标，来衡量抗生素中的有效成分效力的方法。抗生素微生物检定法可分为： （1）稀释法 （2）浊度法 （3）琼脂扩散法（管碟法和打孔法）。 目前各国药典通常采用后两种方法测定抗生素的效价。一、附录抗生素微生物检定法一、附录抗生素微生物检定法抗生素效价单位的确定由于抗生素生产工艺的复杂性（发酵、提取），早期的抗生素试制初期并非都能制备得到纯品，有些含有多种组份，有些已习惯上使用一种

16、效价单位，从生产及临床使用上考虑均不宜更改计量方法，因此造成目前抗生素效价单位有多种确定方法，大致可按单组分和多组分抗生素两大类来阐述。一、附录抗生素微生物检定法抗生素效价单位的确定单组分抗生素效价单位重量单位：以抗生素中所含特定的抗菌活性部分的重量计量效价单位。如：链霉素硫酸盐，活性成分为链霉素碱，则链霉素碱1g1单位，折算硫酸链霉素1mg=798单位。类似重量单位：以特定的纯抗生素制品盐的重量作为单位，其包括无效的部分（盐）在内。沿袭早期的用法，理论上是不合理的，目前兽药上只有盐酸四环素和盐酸金霉素2个品种。一、附录抗生素微生物检定法抗生素效价单位的确定特定效价单位：以特定的纯抗生素的某一

17、重量为1单位加以折算。例如：青霉素单位最初定为一个青霉素单位系在50ml肉汤培养基内完全抑制金黄色葡萄球菌生长的最小青霉素量。早期国际标准品青霉素G钠称重0.6g规定为1单位，即1667单位/mg。随着青霉素的纯化，青霉素G钠只需0.5988g即可。因此，第二次定为0.5988g为1单位。一、附录抗生素微生物检定法抗生素效价单位的确定多组分抗生素效价单位以其中单一组分的活性成分的重量确定效价单位。如庆大霉素含有C1、C1a、C2a、C2等多个组分，庆大霉素的效价单位以C1（C21H43O7N5）来计量，1g的C11庆大霉素单位。用这种方法确定效价单位在“溯源性”方面较为明确，这是目前鼓励采用的

18、方法。一、附录抗生素微生物检定法抗生素效价单位的确定多组分抗生素效价单位将多个抗生素组分按一定比例混合，以混合组分活性成分的重量确定效价单位。如螺旋霉素主要为含I、II、III三个组分的混合物，其效价单位定义为1g混合物50的组分I（C43H74N2O14）、25的组分II（C45H76N2O14）和25的组分III（C46H78N2O14）1螺旋霉素单位。多个抗生素组分不定比例的混合物，以混合组分活性成分的重量确定效价单位。如吉它霉素为含有A1、A3、A4、A5、A6、A7等的多组分抗生素，其效价单位定义为1g吉它霉素混合物（C3742H6169NO1415）1吉它霉素单位。此效价单位类似于

19、特定效价单位，其“溯源性”较模糊，目前不鼓励使用。一、附录抗生素微生物检定法抗生素制剂规格的表示：例如：盐酸土霉素 1g（ 100万单位) 青霉素钠 0.6g（ 100万单位)这里的g是指按实际效价单位折算的重量单位，并不是实际重量。 实际称取重量= 抗生素总单位/含量一、附录抗生素微生物检定法二剂量法原理 抗生素微生物检定法基于量反应平行线原理，因此供试品和对照品形成的对数计量-反应关系曲线应当相互平行。抗生素总量(效价)的对数lgM与所形成抑菌圈半径的平方r2呈直线关系 一、附录抗生素微生物检定法二剂量法同质性：效价测定的计算式，是假定两者剂量反应直线是互相平行的。非平行的计量-反应关系曲

20、线 一、附录抗生素微生物检定法管碟法测定中的影响因素抑菌圈圆正的控制滴加抗生素溶液从小管口或毛细滴管口溅出落在琼脂培养基表面上；小钢管二端面不够平、双碟底不平、制备琼脂培养基平板时，工作台不够水平，结果使培养基层厚度不均匀；双碟、小钢管、钢管放置器被微量抗生素（或其他杀菌剂）污染，使抑菌圈破裂；琼脂培养基上，小钢管彼此间隔距离太小而抑菌圈较大时，形成互相影响的卵圆形或椭圆形抑菌圈；双碟培养过程中，温度不均匀；底层平板上有冷凝水；培养基内有小凝块。一、附录抗生素微生物检定法管碟法测定中的影响因素抑菌圈边缘清晰度的控制试验菌种的纯化；培养基的质量；试验菌的菌龄和试验菌的菌量；双碟的培养时间；等等。

21、一、附录抗生素微生物检定法浊度法原理：是利用抗生素在液体培养基中对实验菌生长的抑制作用，通过测定培养后细菌浊度值的大小，比较标准品与供试品对实验菌生长抑制的程度，以测定供试品效价的一种方法，这种方法在国外普遍被采用。优点：检测快速，易于操作，扩散因素影响小，检测结果的正确程度和精密度都优于管碟法。一、附录抗生素微生物检定法 浊度法 缺点：对试验仪器的性能及试验器具的要求较高，如培养温度要求一致，比色管的清洁等。温度的均匀性直接影响试验菌的生长速率。美国药典35版中对管碟法的培养温度要求为0.5，而比浊法的温度要求0.1 ，更为严格。任何影响液体培养基内微生物生长的因素都会影响抗生素效价的测定。

22、适用范围小。并不适用于所有抗生素，需选择适宜的菌种来检测。一、附录抗生素微生物检定法浊度法一、附录抗生素微生物检定法浊度法注意事项玻璃容器与清洁 所用玻璃仪器，必须用硬质中性玻璃，软质玻璃易吸附抗生素。使用的移液管要求管壁不挂液；由于比浊法的灵敏度较高，所用比色皿的清洁更为重要，用清洗溶液洗涤浸泡后，必须用蒸馏水冲洗干净。菌液需新鲜配制 菌液最好当天制备，当天使用，若在冰箱放置一段时间后再使用，所测定的数据不稳定，误差大。因为菌液在放置一段时间后，部分细菌老化甚至死亡，从而影响试验时活菌的量，使结果产生偏差。试验用菌种 不宜超过5代 。一、附录抗生素微生物检定法浊度法测定注意事项菌液的浓度 菌

23、液过浓可使浓度-光吸收度不成直线关系；菌液过稀，则读数偏低，误差增大。分光光度计的最正确测量范围在36.8%T处，最好将吸光度控制在0.30.7范围内。温度 温度的恒定与均匀性直接影响试验菌的生长速率。培养用的试管厚度、玻璃质地应一致，否则会影响传热速度，同一批样品的各支培养管，应按正交拉丁方排列，以抵消各位置温度的差异。一、附录抗生素微生物检定法浊度法测定注意事项各种溶液的放置顺序 一、附录抗生素微生物检定法浊度法测定注意事项通气 各培养管静止培养时，试验菌慢慢沉降至底部，就会产生梯度的微生物生长区及代谢环境。培养基的上半部分为微亲氧性，底部为厌氧性，如采用振摇或搅拌培养法，增加氧的供应，可

24、促进生长。培养时间 培养时间的差异可导致误差。已接种试验菌种的培养基加至含有抗生素溶液的各支试管的次序有先后，抗生素与试验菌接触时间也存在着差异。含菌培养基从加第一支试管至加最后一支试管，在室温的时间也不同。要使每管尽量一致，最好将培养基冷却至4，然后种入试验菌种。二、新增品种增加四个抗生素品种（10个标准）：乙酰氨基阿维菌素：原料+注射液延胡索酸泰妙菌素：原料+可溶性粉+预混剂苄星氯唑西林：原料+注入剂硫酸头孢喹肟：原料 +注射用+注射液特点：均为兽用专用抗生素品种，充分体现兽药典的特色； 苄星氯唑西林注入剂，为兽用专用剂型，与药典附录配套。二、新增品种乙酰氨基阿维菌素乙酰氨基阿维菌素B1a

25、 ：R= C2H5 C50H75NO14 914.13乙酰氨基阿维菌素B1b：R=CH3 C49H73NO14 900.10为乙酰氨基阿维菌素B1a和乙酰氨基阿维菌素B1b的混合物。二、新增品种乙酰氨基阿维菌素乙酰氨基阿维菌素属大环内酯类体内外杀虫剂国内标准情况：兽药质量标准汇编中收载了乙酰氨基阿维菌素及其注射液的3个不同的质量标准，分别为644号、804号和942号公告。国外标准情况：美国药典收载该标准。结合国内标准、国外标准及产品特性修订此标准，充分体现该标准的适用性。二、新增品种乙酰氨基阿维菌素有关物质和含量测定方法：来源于USP方法同一色谱条件：用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1%

26、高氯酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速为每分钟1.5ml，按下表进行线性梯度洗脱；检测波长为245nm。理论板数按乙酰氨基阿维菌素B1a峰计算不低于4500，乙酰氨基阿维菌素B1a和B1b的分离度应大于3。 时间（分钟） 流动相A(%) 流动相B（%） 0 45 55 15 45 55 25 5 95 30 45 55 35 45 55二、新增品种乙酰氨基阿维菌素有关物质和含量测定方法：来源于USP方法根据USP标准，杂质A、乙酰氨基阿维菌素B1b、乙酰氨基阿维菌素B1a、杂质C+D和杂质E的相对保留时间为0.55、0.77、1.00、1.05和1.28。实际系统适用性溶液的图谱中，没有发

27、现有杂质A峰，B1b、乙酰氨基阿维菌素B1a、杂质C+D和杂质E的相对保留时间为0.77、1.00和1.05和1.29，但实验中发现，该相对保留时间并不固定，每次试验会有一定偏差。二、新增品种乙酰氨基阿维菌素有关物质和含量测定方法：来源于USP方法考虑到各企业生产工艺不同，导致其杂质不同，因此没有按相对保留时间逐一定位各杂质。只规定：单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积（1.0%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的5倍（5.0%）。系统适用性图谱二、新增品种乙酰氨基阿维菌素 对照品溶液的色谱图 max=245nm二、新增品种乙酰氨基阿维菌素参照USP增加了8氧代-B1a测定二、新增

28、品种乙酰氨基阿维菌素增加了残留溶剂测定综合各企业的生产工艺及企业标准，确定可能存在的溶剂为乙醇、乙腈与丙酮。乙醇、乙腈与丙酮 以二乙烯基-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为固定相的毛细管柱为色谱柱，初始温度为50，以每分钟2的速率升温至80，再以每分钟5的速率升温至220；进样口温度为170；检测器温度为170；出峰顺序依次为乙腈、乙醇、丙酮与二甲基甲酰胺，各峰之间的分离度均应符合要求。按外标法以峰面积计算，均应符合规定。二、新增品种乙酰氨基阿维菌素残留溶剂 乙腈、乙醇、丙酮对照品混合溶液色谱图二、新增品种延胡索酸泰妙菌素C28H47NO4SC4H4O4 609.82该标准合并了国内2个标准：山东

29、鲁抗和江苏赛奥生化有限公司；同时参照进口兽药质量标准和英国兽药典进行了修订。二、新增品种延胡索酸泰妙菌素比旋度原定加二氧六环溶解并定量稀释制成每1ml中含本品2mg的溶液，但旋光度均较小，测量误差大。根据企业建议修订为：稀释成每1ml中含本品5mg的溶液。厂家批号比旋度ATMF131223725TMF131223827TMF131223928B131104127131104226131104326C019813050682701981305101270198130510428二、新增品种延胡索酸泰妙菌素有关物质和含量测定：照EP方法色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲

30、醇-碳酸铵溶液取碳酸铵10g，加水800ml使溶解，加6高氯酸溶液（取高氯酸8.5ml，加水至100ml，摇匀）24ml，用水稀释至1000ml，摇匀，滤过-乙腈（492823）为流动相，柱温30，流速为每分钟1.2ml，检测波长为212nm。分别取延胡索酸泰妙菌素对照品和苯甲磺酰截短侧耳素对照品适量，用流动相溶解并稀释成每1ml各含0.08mg的混合溶液，作为系统适用性溶液；取系统适用性溶液20l，注入液相色谱仪，记录色谱图，泰妙菌素峰与苯甲磺酰截短侧耳素峰的分离度应大于2.0，理论板数按泰妙菌素峰计算不低于10000。二、新增品种延胡索酸泰妙菌素有关物质和含量测定延胡索酸和泰妙菌素色谱图二

31、、新增品种延胡索酸泰妙菌素有关物质和含量测定供试品色谱图欧洲药典杂质标准色谱图二、新增品种延胡索酸泰妙菌素有关物质和含量测定EP对各相对保留时间的杂质都有明确规定：供试品溶液色谱图中如有杂质峰，相对保留时间约为0.25、0.3、0.5、0.6、0.8、1.1、1.3、1.4和2.3的单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积（1.0%）。而实际考核9批样品在相对保留时间约为0.4普遍存在一个杂质峰，且该杂质峰的峰面积大于对照溶液的主峰面积的0.5倍。（见下表）鉴于样品的复杂性，相对保留时间一般情况下无法准确定位、最后定稿为：单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积（1.0%），各杂质峰面积的和不

32、得大于对照溶液峰面积的3倍（3.0%）。二、新增品种延胡索酸泰妙菌素有关物质和含量测定批号各相对保留时间杂质峰占对照品主峰面积的倍数0.250.30.50.60.81.11.31.42.30.4大于0.5倍的其它峰杂质和10.600.22/0.23/0.33无1.520.600.22/0.23/0.35无1.530.120.230/0.54/0.70无2.040.510.170.070.05/0.40/0.15/0.39无1.850.550.160.060.05/0.29/0.16/0.39无1.860.470.160.040.08/0.28/0.16/0.39无1.77/0.270.050.

33、16/0.09/0.160.130.32无1.48/0.20/0.43/0.16/0.23无1.29/0.040.060.21/0.40/0.20/0.09无1.1二、新增品种延胡索酸泰妙菌素延胡索酸测定取供试品约0.2g,精密称定，加50%乙醇溶液60ml溶解后，照电位滴定法（附录0701）用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于5.804mg的延胡索酸,滴定结果用空白试验校正。按干燥品计算，含延胡索酸应为18.6%19.4%（98%102%）。 延胡索酸与泰妙菌素1:1成盐，其理论含量为19.0%。鉴别 按上述HPLC方法，色谱图中出现延胡

34、索酸和泰妙菌素两个峰，因此可同时进行延胡索酸和泰妙菌素的鉴别。二、新增品种苄星氯唑西林原名：苄星邻氯青霉素，为氯唑西林的二苄基乙二胺盐。国内标准：原收录在兽药质量标准2003年版以及新颁布的兽药国家标准（化学药品、中药卷）第一册中，但原名为苄星邻氯青霉素注射液。国外标准：美国和英国药典中均已收录。中国兽药典2010年版第一次收入了乳房注入剂制剂通则，配合该制剂通则，2010版药典中就拟收入该品种，由于方法未研究充分，直至本版药典才完成。二、新增品种苄星氯唑西林氯唑西林含量测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1mol/L磷酸二氢钠溶液-乙腈（3：1），用磷酸调pH值至4.60.2为流动相；

35、检测波长220nm；柱温40。理论板数按氯唑西林计算不低于3000。二苄基乙二胺的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（端基封尾）；以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至5.1）-乙腈（87:13）为流动相；检测波长为220nm。理论板数按二苄基乙二胺峰计算不低于3000，拖尾因子应不得过2.0。二、新增品种苄星氯唑西林注意：二苄基乙二胺对色谱柱的要求较高，应采用端基封尾的色谱柱无菌检查是该品种的难点：苄星氯唑西林在水中不溶原料无菌检查：原标准：取本品约0.6g，加30%吐温80ml，摇匀，取1ml置含青霉素酶500万单位的瓶内，取1ml用薄膜过滤法

36、处理后，依法检查。问题：检查量太少，无代表性。USP34标准：将供试品加入青霉素酶和含0.5%吐温80的无菌培养基中，按直接接种法测定。问题：消耗大量酶，且接入培养基后，培养基混浊，无法观察。二、新增品种苄星氯唑西林无菌检查是该品种的难点：原料无菌方法 取供试品10g，加入无菌聚山梨酯80 10g，搅拌使供试品浸润。加无菌十四烷酸异丙酯50ml，混匀，转至500ml无菌分液漏斗中，充分摇匀，静置4分钟，缓慢排出下层沉淀，取全部上清液，加无菌十四烷酸异丙酯200ml，摇匀，经薄膜过滤法处理，每管培养基中加入不少于600万单位青霉素酶溶液，依法检查（附录1101），应符合规定。二、新增品种苄星氯唑

37、西林无菌检查是该品种的难点注入剂无菌 注入剂为灭菌油混悬液，辅料包括注射用油、单硬脂酸甘油酯等。按原标准取本品不少于2瓶，检查量太少，不符合要求。新无菌方法萃取离心与薄膜过滤相结合的方法。二、新增品种苄星氯唑西林无菌检查是该品种的难点注入剂无菌 取本品约100ml，加无菌十四烷酸异丙酯200ml，摇匀，再加无菌pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液400ml，充分振摇后，离心20分钟（每分钟3000转），取全部下层溶液，置无菌分液漏斗中，振摇，静置使油水明显分层，取全部水层，用无菌pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释至800ml；照薄膜过滤法处理，用含0.1%聚山梨酯80的无菌pH7.0氯化钠-蛋白胨缓

38、冲液为冲洗液，每张滤膜冲洗量为400ml，分8次冲洗后；再用0.9%无菌氯化钠溶液冲洗3次，每张滤膜每次冲洗量为50ml。每管培养基中加入不少于600万单位的青霉素酶溶液，摇匀，置37下作用1小时，依法检查（附录1101），应符合规定。二、新增品种苄星氯唑西林无菌检查是该品种的难点注入剂无菌测定时应注意：在弃去上层和中层的液体和药物时，用无菌一次性吸管紧贴离心管壁旋转一周，使黏贴在离心管壁的药物层脱离管壁，以便倒出，倒出时可以用吸管轻轻的往外剥离，以提高效率。在吹打液体混匀时，不要吹打高于液体并粘附于管壁的药物，使药物尽量去除干净。应充分清洗干净，为了防止残余抗生素干扰测定，还应加入中和用的青

39、霉素酶。二、新增品种头孢喹肟硫酸头孢喹肟是兽医专用第四代头孢类抗生素。本标准是对现有的7个部颁质量标准的统一。C23H24N6O5S2 H2SO4 626.61二、新增品种头孢喹肟晶型确认经热分析确认，该化合物不含结晶水。二、新增品种头孢喹肟有关物质色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.025mol/L高氯酸钠溶液-磷酸-乙腈（100012115）（用三乙胺调节pH值至3.6）为流动相；检测波长为270nm。取头孢噻肟约25mg，加流动相100ml使溶解，另取头孢喹肟约25mg，置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀；取5ml置25ml量瓶中，加上述头孢噻肟溶液1

40、 ml，用流动相稀释至刻度。取20l注入液相色谱仪，记录色谱图，头孢喹肟与头孢噻肟的分离度应大于1.0。取5,6,7,8-四氢喹啉对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含5g的溶液，量取20l，注入液相色谱仪，记录色谱图。二、新增品种头孢喹肟有关物质标准上写2,3-环己基吡啶，有标准上写2,3-环己烷吡啶，现统一修订为化学名称：5,6,7,8-四氢喹啉原7个部颁标准中描写5,6,7,8-四氢喹啉与头孢喹肟相对保留时间有0.20，也有0.3的，为准确定位并判断杂质峰，修订标准中增加5,6,7,8-四氢喹啉对照定位。随着样品溶液放置时间的增长，5,6,7,8-四氢喹啉峰面积会逐渐增大，为防

41、止样品溶液因放置而影响检测结果，增加：“临用现配”注意事项。另外实验单位在检测过程中采取4控温低温进样。二、新增品种头孢喹肟有关物质5,6,7,8-四氢喹啉对照溶液色谱图系统适用性色谱图头孢喹肟头孢噻肟三、修订品种序号 名称 修订情况1吉他霉素 修订【性状】，删除“味苦” 。吉他霉素预混剂增加了100g:30g（3000万单位）规格2伊维菌素注射液增加规格3红霉素1.增加附注：红霉素组分色谱图和各组分结构、名称、分子式。2.删去“红霉素维生素B、C组分”和“红霉素A组分”，合并为“红霉素组分”；3.单独列出“有关物质”项。4阿莫西林修订【检查】项下“阿莫西林聚合物”的计算方法。5纯化水修订【检

42、查】项下“微生物限度”6青霉素钠1.增加“附：有关物质色谱图和各杂质信息”；2.修订【检查】项下的“有关物质”注射用青霉素钠增加规格2.4 g（400万单位）三、修订品种序号名称修订情况7苯唑西林钠增加“附：杂质信息”注射用苯唑西林钠增加规格2.0g8乳糖酸红霉素修订【检查】项下“红霉素A组分测定法”的限度。88.0%59.1%9氟苯尼考修订【检查】项下“有关物质”氟苯尼考注射液增加规格10盐酸大观霉素盐酸林可霉素可溶性粉增加规格100g大观霉素10g（1000万单位）与林可霉素5g（按C18H34N2O6S计算）11注射用盐酸四环素1.修订【检查】项下“有关物质”：浓度由每ml含0.5mg改

43、为0.8mg；2.增加规格三、修订品种序号名称修订情况12盐酸多西环素片增加规格13氨苄西林钠修订【鉴别】项的红外14酒石酸吉他霉素可溶性粉15替米考星1.修订【鉴别】（1）、2.【检查】项下“有关物质”、3.【含量测定】替米考星预混剂修订【鉴别】替米考星溶液1.增加规格；2.修订【性状】16硫氰酸红霉素增加【检查】项下“红霉素BC组分及有关物质”、“硫氰酸盐”和“红霉素A组分”硫氰酸红霉素可溶性粉1.增加【检查】项下“红霉素A组分”，2.增加规格三、修订品种序号名称修订情况17硫酸卡那霉素修订【检查】项下“无菌”：薄膜过滤前的处理方法不同。18硫酸庆大霉素1.修订【性状】下的溶解性;2.【检

44、查】项下“硫酸盐”液相法改为滴定法、【检查】项下“有关物质”：总杂质限度5.0%4.5%；“庆大霉素C组分”：改变色谱条件等硫酸庆大霉素注射液1.修订【性状】;2.【有关物质】和“庆大霉素C组分”19硫酸链霉素修订【性状】：删去味微苦硫酸链霉素可溶性粉增加规格20氯唑西林钠修订【性状】：删去味苦三、修订品种替米考星本品为大环内酯类药物，抗菌作用与泰乐菌素相似，主要抗革兰氏阳性菌，对少数革兰氏阴性菌和支原体也有效。对胸膜肺炎放线杆菌、巴氏杆菌及畜禽支原体的活性比泰乐菌素强。95%的溶血性巴氏杆菌菌株对本品敏感。主要用于防治家畜肺炎、禽支原体病及泌乳动物乳腺炎。替米考星原料及3个制剂的标准在中国兽

45、药典一部（2005年版）中正式统一收录，美国药典中收载有替米考星原料及注射液的质量标准。三、修订品种替米考星替米考星反式异构体保留时间（min）替米考星顺式异构体保留时间(min)中监所对照品8.59.7企业A8.69.8企业B8.69.7企业C8.59.7【鉴别】 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液替米考星顺式异构体峰和反式异构体峰的保留时间应与对照品溶液两峰的保留时间一致。三、修订品种替米考星三、修订品种替米考星中国兽药典中收载的有关物质方法与最新版的USP35标准略有不同，主要体现在梯度洗脱过程中流动相比例的变化、相对保留时间的变化和增加了供试品溶液的使用期限规定。三、修订品种替米

46、考星 2010版兽药典 USP35流动相比例梯度洗脱：0-30分钟流动相A与B的比例从80:20线性变化到58:42梯度洗脱：0-30分钟流动相A与B的比例从82:18线性变化到60:40相对保留时间替米考星反式异构体（两个不完全分开的峰）的相对保留时间为0.8，替米考星顺式异构体的相对保留时间为1.0，替米考星顺式-8-差向异构体的相对保留时间为1.2。替米考星反式异构体（两个不完全分开的峰）的相对保留时间为0.9，替米考星顺式异构体的相对保留时间为1.0，替米考星顺式-8-差向异构体的相对保留时间为1.1。供试品溶液的使用期限规定无24小时内使用三、修订品种替米考星USP35CVP2010

47、企业进样次数最大单个杂质含量（%）总杂质含量(%)最大单个杂质含量（%）总杂质含量(%)A第1针1.69.21.69.2第2针1.69.11.69.4B第1针1.06.31.07.0第2针1.06.31.06.7C第1针2.17.52.17.3第2针2.17.52.17.5三、修订品种替米考星USP35CVP2010生产企业比较项目反式异构体顺式异构体顺-8-差向异构体反式异构体顺式异构体顺-8-差向异构体A保留时间9.3099.91110.8659.0999.96111.1069.3069.91110.8669.36710.24211.414相对保留时间0.91.01.10.91.01.1B

48、保留时间9.2629.87310.7999.1289.97711.0979.3149.92310.8648.7299.56010.644相对保留时间0.91.01.10.91.01.1C保留时间9.2909.89110.8389.51610.40311.6059.1189.71410.6469.52610.42211.651相对保留时间0.91.01.10.91.01.1三、修订品种替米考星时间（h）最大单个杂质峰面积总杂质峰面积最大单个杂质含量（%）总杂质含量(%)099148634056402.067.062100512336799012.087.63498531135518922.047

49、.36698572535988112.047.46898521635619302.047.391098487036191012.047.501298097835256372.037.311498962237128462.057.701699136636608532.067.591898572536096712.047.482099972836485852.077.562299711436860712.077.642499671536616502.077.59三、修订品种硫氰酸红霉素目前有4家原料生产厂，这次修订3家企业提供了原料。增加了“红霉素组分、有关物质和硫氰盐”的检查，使标准更严谨完善。

50、方法依据：2010版兽药典中红霉素组分和有关物质的液相色谱方法。 色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐溶液（取磷 酸氢二钾8.7g，加水1000ml，用20%磷酸溶液调节pH值至8.2）-乙腈（4060）为流动相；流速为每分钟0.81.0ml；柱温35；检测波长为215nm。取红霉素标准品适量，130加热破坏4小时，加甲醇适量（10mg加甲醇1ml）溶解后，用磷酸盐缓冲液（pH7.0)-甲醇（15:1）稀释制成每1ml中约含4mg的溶液，取20l注入液相色谱仪。三、修订品种红霉素（红霉素A组分）出峰顺序：红霉素C、红霉素A、杂质1、红霉素B和红霉素烯醇醚峰三、修订品种硫氰酸红霉素

51、生产企业生产批号取样量峰面积检测结果干燥品计（%）A130411-1110.09883278299382.26%87.7130508-1110.09825279296783.14%81.6130507-1130.09812279091183.20%88.2B1203502300.10694257594078.92%83.91203502500.10598254251978.60%83.51203502400.10581253874278.61%83.5C2013032380.09623250449185.27%90.62013032390.09634249839184.97%89.720130

52、32400.09651251241385.30%90.2原料红霉素A组分结果三、修订品种硫氰酸红霉素原料红霉素A组分限度依据：根据红霉素A的限度不得少于88.0%，按1:1硫氰酸成盐计，红霉素与硫氰酸红霉素的分子量分别为733.94和793.02，则红霉素A的理论限度应为：88.0%733.94/793.02100%=81.40%适当放宽限度为80.0%，各企业结果也均在此限度范围内。三、修订品种硫氰酸红霉素A/批号供试品溶液（峰面积）对照溶液峰面积（0.6倍）C峰B峰（0.7校正后）杂质1（0.15校正后）烯醇醚（0.09校正后）杂质总和最大杂质峰130411-1113780695392（1

53、4309）73439（6610）1139584736193656（56194）130508-1113910296531（14480）70442（6340）1168595130193160（55896）130507-1133691195403（14310）67860（6107）1001694657594814（56888）结论不符合规定原料红霉素B、C组分和有关物质结果三、修订品种红霉素B/批号供试品溶液（峰面积）对照溶液峰面积（0.6倍）C峰B峰（0.7校正后）杂质1（0.15校正后）烯醇醚（0.09校正后）杂质总和最大杂质峰1203502309609227796（19457）34901（52

54、35）97486（8774）7439839053108774（65264）1203502509790126757（18730）35499（5325）92651（8339）7480237543110956（66574）1203502409737127267（19087）35121（5268）90116（8110）7608937749106841（64105）结论符合规定原料红霉素B、C组分和有关物质结果三、修订品种硫氰酸红霉素C/批号供试品溶液（峰面积）对照溶液峰面积（0.6倍）C峰B峰（0.7校正后）杂质1（0.15校正后）烯醇醚（0.09校正后）杂质总和最大杂质峰20130323821169

55、13914（9740）109874（9889）257342573459153（35492）2013032392083912786（8950）105139（9463）236652366557765（34659）2013032401891512228（8560）107275（9655）246712467161842（37105）结论符合规定红霉素B、C组分和有关物质结果红霉素B、C组分和有关物质限度依据：与红霉素一致。三、修订品种硫氰酸盐红霉素企业ABC批号130411-111130508-111130507-113120350230120350250120350240201303238201303239201303240结果（%）6.696.576.556.936.976.976.666.526.58结论符合规定硫氰酸盐测定结果三、修订品种硫氰酸红霉素硫氰酸：测定方法：取本品约0.1g，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，精密量取2ml，置50ml棕色量瓶中，