同济医院检验科ISO15189体系文件22血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）测定

1、同济大学附属同济医院检验科生化组项目操作指导书TJYYJYKSH/XMZ122第2版标题：血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）测定第章 第22节第 PAGE 4 页 共 NUMPAGES 4 页1. 目的：保证HDL-C检测结果准确、可靠2. 适用范围：HDL-C在全自动生化分析仪上的检测3. 项目名称：HDL-C4. 检验方法：均相酶比色法原理：样品和加入试剂R1（缓冲液），在硫酸镁的存在下，葡聚糖硫酸盐与LDL、VLDL及乳糜微粒选择性地形成水溶性的复合物，不能被PEG修饰的酶催化。加入试剂R2（PEG修饰的酶/4-氨基安替比林/缓冲液）启动反应：通过氨基（约40%）和PEG结合的胆固醇酯

2、酶与胆固醇氧化酶测定HDL-胆固醇的胆固醇浓度。 PEG-胆固醇酯酶HDL-胆固醇酯 + H2O游离胆固醇 + RCOOH胆固醇酯被定量地解离为游离胆固醇和脂肪酸。 PEG-胆固醇氧化酶HDL-胆固醇 + O2 4胆甾烯醇 + H2O2在氧的存在下，胆固醇被胆固醇氧化酶氧化为4胆甾烯醇和过氧化氢。 过氧化物酶2H2O2 + 4-氨基安替比林 + HSDA + H2O + H+ + H2O 醌亚胺（紫蓝色）+ 5H2OHSDA=N-（2-羟基-3-磺丙基）-3，5-二甲氧基苯胺钠在过氧化物酶的作用下，激发过氧化氢与4-氨基安替比林和HSDA反应，形成紫蓝色的醌亚胺。显色强度直接和HDL-胆固醇浓

3、度呈比例，比色检测。6. 试剂：6.1 检测试剂：6.1.1 品牌：罗氏6.1.2 货号：03045935 1226.1.3 包装规格：R1：654ml + R2：620ml6.1.4 试剂组成：R1: 葡聚糖硫酸盐/缓冲液MOPS（3-吗啉代丙烷磺酸）缓冲液：19.1mmol/L，pH7.0；葡聚糖硫酸盐：0.5g/L；硫酸镁：8.1 mmol/L ；HSDA：0.96mol/L；抗坏血酸氧化酶：3KU/L； 过氧化物酶：10KU/L；防腐剂R2 : PEG修饰的酶/4-氨基安替比林/缓冲液PIPES哌嗪N，N-双（2-乙磺酸） 缓冲液：9.9mmol/L，pH7.0；PEG-胆固醇酯酶：0

4、.2kU/L ；PEG-胆固醇氧化酶：7.6kU/L； 过氧化物酶：20kU/L； 4-氨基安替比林： 2.46mol/L；防腐剂6.2 标准品：罗氏C.F.A.S. Lipids 混合定标液7. 仪器：HITACHI 7180 生化分析仪8. 操作：自动生化分析仪测定，具体参数见附录。 线性范围：0.08 3.12 mmol/L 参考范围：0.8 1.8 mmol/L临床意义：流行病学与临床研究证明，HDL-C与冠心病发病成负相关，HDL被认为是一种抗动脉粥样硬化的脂蛋白,冠心病的保护因子。HDL-C低于0.9mmol/L是冠心病危险因素，HDL-C增高，被认为是冠心病的“负”危险因素。HD

5、L-C下降也多见于脑血管病，糖尿病，肝炎，肝硬变等患者。高TG血症往往伴以低HDL-C。肥胖者HDL-C也多偏低。吸烟可使HDL-C下降，饮酒及长期体力活动会使HDL-C升高。12. 标本要求：12.1 受检者应在禁食至少12小时后抽血，24小时内不饮酒。抽血前应有2周时间保持平时饮食习惯，近期内体重稳定，无急性病，外伤，手术等意外情况，妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月，查血才能反映其基本血脂水平，注意有无应用影响血脂药物，还应注意采血季节，血脂水平与季节性变动，在抽血前24h内不作剧烈运动。12.2 静脉采血除非是卧床的患者，一般在采血时取坐位，体位影响水分在血管的分布，应此影响血脂水平。12.3 抗凝剂：多用血清作血脂分析，如用血浆，多选EDTANa2抗凝（1mg/ml血）。12.4 标本处理：放置时间不得超过3小时，血清必须吸出，暂存4冰箱至少可稳定7天13. 注意事项：13.1 血清在室温下放置时，各类脂蛋白之间还会进行脂质交换，游离Chol不断酯化，故须及时测定否则应低温保存。13.2 在血清严重混浊时，可用生理盐水将血清作1：