兽药残留检测技术应用现状及发展方向

1、兽药残留检测技术应用现状及发展方向1=-作者：程钊，曾俊敏，彭勇胜来源：现代食品2017年第7期摘要：兽药残留是一项与食品安全有关的重要问题，已经引起社会各界的广泛关注。能 够实现食品中兽药残留快速、简便、高灵敏度和高通量的兽药残留检测技术成为迫切需要。文 章对兽药残留检测常用方法和技术作详细概述，并展望未来发展方向。关键词：兽药残留；检测方法；筛查技术1兽药残留污染现状随着经济快速发展，人们生活水平不断提高，也越来越关注食品安全问题。近些年出现的 “速成鸡”“瘦肉精”事件等都使动物源食品（肉、蛋、奶、水产及其制品）中的兽药残留成 为人们关注的热点。目前，畜禽养殖和生产过程中使用的兽药种类非常

2、多，将兽药按照功能可 分为杀菌剂、糖皮质激素、生长促进剂、肾上腺受体激动剂、杀虫剂、镇静剂、B -受体激动 剂和雌性激素等；而兽用药按化学结构又可分为B-内酰胺类、氯霉素类、四环素类、大环内 酯类、氨基糖苷类、喳诺酮类、磺胺类和四环素类等。虽然兽药在预防治疗疾病、促生长和改善品质等方面发挥非常重要作用。由于养殖户缺乏 合理用药知识，在经济利益的驱使下，使兽药在养殖户养殖过程中存在误用或滥用违禁添加药 物以及大剂量用药，导致兽药残留在养殖产品体内，影响大家身体健康，成为人们公认的食品 安全问题。如何有效监管兽药的规范，快速准确检测动物源食品中兽药的残留，是当今社会关 注的重点问题。2兽药残留的检

3、测与筛查技术随着社会不断发展和科学技术不断进步，检测手段与技术也取得很大进步。相继出现高效 薄层色谱法、酶联免疫分析法、电化学法、毛细管电泳法、气相色谱法、液相色谱法、气相色 谱-质谱联用法和液相色谱-质谱联用法等。由于兽药残留检测属于痕量测定，再加上动物源 性食品的基质复杂性，对检测方法提出极高的要求。目前兽药残留检测筛查方法包括高效液相 色谱-紫外检测法、高效液相色谱-荧光法、高效液相色谱-质谱法、酶联免疫吸附法以及高 分辨质谱法等。2.1高效液相色谱-紫外检测法在液相色谱-质谱联用技术出现以前，高效液相色谱法是食品中兽药检测的最主要方法1。 同时我国也建立多个以高效液相色谱-紫外检测器的

4、检测方法，结合不同的前处理净化方法，检 测食品中兽药残留。二极管阵列检测器也属于紫外检测器，由于检测成本低，同时又具有选择 性好和灵敏度高的特点，适用范围非常广泛，用户数量庞大。郭萌萌2等采用高效液相色谱- 二极管阵列检测器测定动物源食品中的多种磺胺。但是方法主要用于喳诺酮类和磺胺类等兽药 残留的检测，对其他没有特定紫外或可见光吸收官能团的兽药则没有检测能力或灵敏度较低。 由于人们对食品中兽药残留的要求越来越高，高效液相色谱-紫外检测法的灵敏度也很渐渐不 能适应越来越严格的兽药残留限量的要求。在兽药残留分析检测过程中受复杂基质的干扰和影 响，从而造成假阳性结果的产生和定量分析不准确等。2.2

5、高效液相色谱- 荧光检测法高效液相色谱-荧光检测法相对高效液相色谱-紫外检测法而言，该方法在选择性、灵敏 度等方面都有很大提高。因此很多研究采用一种痕量检测方法。由于喳诺酮类具有荧光反应， 该方法通常被用来检测食品中的喳诺酮类药物残留，其他兽药则需要添加衍生步骤，过程复杂。 对大多数兽药而言，本身并不具有荧光反应，若要通过荧光检测器来检测，只有通过衍生化反 应后才能检测出来3，操作过程繁琐，因此在兽药残留的检测上受到很大限制。2.3液相色谱-质谱联用法随着质谱技术的发展以及液相色谱-质谱联用的出现，成为兽药残留分析领域最重要检测 手段。该方法同时具液相色谱的分离功能和质谱的准确定性定量功能，提

6、高检测的选择性和灵 敏度，同时也避免了假阳性结果的产生。在兽药检测领域中以LC-MS/MS应用最为广泛。2.4高分辨质谱法对低分辨率质谱而言，高分辨质谱是指能够提供更高的质量分辨率、质量准确度和扫描速 度的质谱。常见的高分辨质谱包括飞行时间质谱、四级杆-飞行时间质谱、傅立叶变换静电场 轨道阱质谱和傅里叶变换离子回旋共振质谱等。由于高分辨质谱在全扫描模式下不需要考虑目 标化合物的数量，能够筛查大量目标化合物，在实验室兽药多残留筛查与检测中应用很广泛。高分辨质谱用于兽药多残留的筛查主要有以下几种方式。通过三重四级杆质谱仪的过滤 与筛选功能，通过碰撞池中产生目标化合物的全扫描碎片信息，用于目标物的定

7、性和确认。碎 片离子信息会让人们得更多获得化合物的结构信息与定性信息，从而使化合物确证分析更加可 靠。采用源内碎裂离子作为辅助定性依据。液相色谱-飞行时间质谱通过碎裂电压优化使目 标分子均获得满意源内碎裂离子，对目标化合物定性分析，质量偏差05 mg/kg，方法定量 限在0.52 ug/kg4o相比较LC-MS和LC-MS/MS两种检测技术，四级杆-飞行时间质谱 在定性确证方面具有明显优势。基于色谱保留时间、精确质量数以及同位素分布等方式对目 标化合物定性测定。虽然现在在有毒有害物质的筛查方面，高分辨质谱仪是主要的研究方向和 手段，由于价格昂贵，限制该方法在现在检测实验室中的应用与推广。2.5

8、酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是目前化学分析检测方面的前沿技术，在组织化学与免疫荧光学的基础上 发展起来的一门科学。原理是通过在酶的高效催化作用下产生抗体抗原的免疫显色反应定性、 定量分析。由于待测物含量与免疫反应产生的颜色具有相关性，可以根据颜色深浅达到定性、 定量分析的目的。由于酶联免疫法具有灵敏、简便和易操作等特点，非常适用于批量样品的测 定，被广泛用于食品中兽药残留的定性、半定量和定量分析。毛丽莎5、沈美芳6等比较液 质联用法和酶联免疫法吸附法测定水产品中的氯霉素和动物源食品中B-受体激动剂，结果表 明可以先通过酶联免疫吸附法做定性筛查，然后再通过高效液相色谱-质谱联用法确认结构和 定量

9、分析。但是相比高效液相色谱-质谱联用法，酶联免疫吸附法操作更简便、成本低，更适 合大批量样品的筛查。酶联免疫吸附法虽然快速简便，但只能测定某种或某类物质，不能实现 多种目标化合物同时快速筛查。2.6 其他检测方法食品中兽药残留检测的方法有微生物法和生物传感器法等。微生物检测法是一种半定量筛 查方法，前处理简单，能分析大数量样品，更快检测待测样品中是否含有超标兽药。李娜7 等建立莫能菌素的微生物检测法。生物传感器是近年来发展起来的一项新型高效分析技术，具 有很好的特异性、灵敏度和准确性，具有价格便宜和操作简单省时等特点。3结语虽然目前我国兽药残留检测方法取得很大的进步，但仍然存在很多缺点与不足。不同的 兽药残留需要采用不同的前处理及检测方法，不但延长检测周期，效率不高，还增加了检测成 本和检测难度。对非检测项目的筛查能力不足。由于不同种类的兽药残留在前处理与检测方 法上存在很大不同，使检测只能检测规定的目标种类，而对样品中是否含有其他类型的非检测 项目的兽药残留，缺乏筛查能力，使食品安全监管存在隐患。由于动物源食品基质复杂，传 统方法前处理过程繁琐