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文档简介

1、微生物的培养技术及应用1.什么是培养基2.培养基的作用一、培养基的配制 人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质即培养基。用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢产物。液体培养基:按物理性质划分固体培养基:3.培养基的类型固体培养基液体培养基有无 凝固剂琼脂实验室常用的固体培养基是琼脂固体培养基扩大培养、工业生产纯化(分离)、鉴定、活菌计数、保藏菌种合成培养基、天然培养基、半合成培养基(举例:牛肉膏蛋白胨培养基)按组成成分划分注意:人工合成的培养基,培养基成分明确(第1个);含化学成分不 明确的天然物质(后2个)拓展:培养基的类型之其他划分方式2.鉴别培养基:用于鉴

2、别不同类型的微生物加入青霉素的培养基:不加氮源的无氮培养基:不加含碳有机物的无碳培养基:加入伊红美蓝的培养基:加入刚果红的培养基:按功能划分1.选择培养基:将某种类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。拓展:培养基的类型之其他划分方式分离酵母菌、霉菌等真菌分离固氮菌分离自养型微生物鉴别大肠杆菌鉴别纤维素分解菌加入酚红指示剂的培养基:鉴别尿素分解菌碳源、氮源、水、无机盐碳源无机碳源:CO2、CO32-、HCO3-有机碳源:牛肉膏、蛋白胨等氮源无机氮源:NH4、NO3-有机氮源:牛肉膏、蛋白胨、尿素等注意:有些含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等4.培养基的成分a.基

3、本成分自养微生物异养微生物乳酸杆菌:需要在培养基中添加维生素霉菌:需将培养基pH调至酸性细菌:需将培养基pH调至中性或弱碱性厌氧生物:提供无氧条件b.特殊需求在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求,培养基的成分举例如下:是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。二、无菌技术获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。消毒灭菌1. 消毒与灭菌的概念接种室、接种箱或超净工作台可用紫外线照射30min 100煮沸5-6 min 62-65下煮30 m

4、in或80-90处理30s-1min2.常用的消毒方法用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源等煮沸消毒巴氏消毒化学药剂消毒紫外线消毒160-170的热空气中加热2-3h。常用于玻璃器皿和金属器具。常用于接种工具,如接种环、接种针、涂布器等,以及试管口、瓶口等的灭菌。3.常用的灭菌方法利用高压蒸汽进行灭菌。高压蒸汽灭菌效果最好,100 kPa、121下维持15-30 min,常用于培养基、无菌水等的灭菌。高压蒸汽灭菌干热灭菌灼烧灭菌1)实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒2)培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌特别提醒:a.做好消毒与灭菌工作后,要注意避免已经灭菌处理的

5、材料用具与周围的物品相接触.b.为避免周围环境中微生物的污染,接下来的许多操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。4.消毒和灭菌工作主要包括两个方面某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的培养基上轻轻按一下;然后用肥皂将该手洗干净,再将5个指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下;将这两个培养皿放入37恒温培养箱中培养 24h 后,发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。请分析回答下列问题。练习 不能;用75%酒精等进行皮肤消毒;实验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。 (1)这个实验中哪些材料用具需要进行灭菌处理?培养皿、培养基(2)从实验结果来看,洗手后我们就能进行无菌操

6、作了吗?操作时,我们可以 采用什么方法来避免手上微生物的污染?三、微生物的培养微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。(一)微生物纯培养的步骤菌落:单菌落:获得单菌落的方法:(二)菌落分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。稀释涂布平板法、平板划线法1)灭菌:培养基(高压蒸汽灭菌)、培养皿(干热灭菌)2)倒平板:待培养基冷却至50左右,在酒精灯火焰附近倒平板1.制备培养基计算称量溶解灭菌倒平板(三)方法步骤分区划线法连续划线法聚集的菌群连续划线稀释分散单个细胞菌落生长繁殖2.

7、接种和分离微生物1)过程 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后,可以分离得到单菌落。平板划线接种法的划线方式1.灼烧接种环,直至接种环金属丝烧红。2.在火焰旁冷却接种环,拔出酵母菌培养液试管的棉塞。 3.试管口通过火焰。 4.在火焰附近用接种环蘸取一环菌液。 5.试管口通过火焰,并塞上棉塞。 6.将皿盖打开一条缝隙,将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划3-5条平行线,盖上皿盖。7.灼烧接种环,待其冷却后,从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作,作第三、四、五次划线。2)平板划线法的具体操作警示: 在实验室中,切不可饮食,离开实

8、验室时一定要洗手,以防止被微生物感染。使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境。第1区划线接种环灭菌第2区划线接种环灭菌第3区划线接种环灭菌接种环灭菌123453)平板划线法注意事项注意: 右图在5个区域划线,接种环灼烧灭菌共6次。接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次.划线首尾不能相接每次划线前接种环进行灭菌划线后,培养皿倒置培养(1)在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?(2)在做第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?答:以免接种环温度太高,杀死菌种。答:线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细

9、菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。思考1 为什么要将平板倒置(背诵)?思考2 为什么要同时放入未接种的平板?既可以防止培养基表面的水分挥发;又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。作对照,该培养皿无菌落说明培养基没有污染。3.培养微生物完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,将接种后的平板和一个未接种的平板倒置,放入28左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养24-48 h。 特征:大小、形状、隆起程度、颜色等功能:鉴定菌种的重要依据单个微生物固体培养基上大量繁殖子细胞群体菌落在相同培养条件下,同种微生物表现出稳定的菌落特征 1配制

10、培养基时,应根据微生物的种类调整培养基的pH(2020浙江卷)()2倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上()3为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落()4培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊的物质() 5消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害() 6无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌() 7.(2020山东新高考质量测评联盟联考)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,无菌技术围绕着如何避免杂菌污染展开。请分析下列操作中错误的是() A倒平板后,对空白培养基进

11、行培养,可检测培养基是否被污染 B接种箱或超净工作台在使用过程中,可用紫外线照射30 min,进行灭菌 C. 若培养皿底和壁交界处存有培养基,不宜用此培养基培养大肠杆菌 D高压蒸汽灭菌时,不能直接关闭排气阀进行加热灭菌D 8.(2020江苏卷)为纯化菌种,在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌,培养结果如图所示。下列叙述正确的是()A倒平板后需间歇晃动,以保证表面平整B图中、区的细菌数量均太多,应从区挑取单菌落C该实验结果因单菌落太多,不能达到菌种纯化的目的D菌落周围的纤维素被降解后,可被刚果红染成红色B 可以在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少破坏DNA结构消毒液9(2018全国卷)在生产、

12、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题:(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具 (填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是 。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能 。在照射前,适量喷洒 ,可强化消毒效果。 (4)水厂供应的自来水通常是经过 (填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是 。氯气未将锅内冷空气排尽10(2019全国卷)回答下列与细菌培

13、养相关的问题。(1)在细菌培养时,培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是 (填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH,其原因是 。硝化细菌在没有碳源的培养基上 (填“能够”或“不能”)生长,原因是 。(2)用平板培养细菌时一般需要将平板 (填“倒置”或“正置”)。蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源倒置(3)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是 。(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过 处理,这种处理可以杀死丢弃物中所有

14、的微生物。在一定的培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征灭菌微生物的选择培养尿素分解菌案例:尿素(CO(NH2)2)含氮量高,化学性质稳定,是一种重要的农业氮肥,尿素施入土壤后,被某些细菌分解成NH3,NH3再转化成NO3-、NH4+等才能被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶、脲酶催化尿素分解产生NH3 , NH3可作为细菌生长的氮源1. 如果让你配置一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?2. 该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点 设计一种选择培养基,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来这种培养基与普通培养

15、基相比,只是用尿素作为唯一氮源,培养基的其他营养成分基本相同一、微生物的选择培养尿素分解菌对土样充分稀释后,将菌液涂布到制备好的选择培养基上,即稀释涂布平板法。1g土壤中有多少能分解尿素的细菌?分离:获得分解尿素的细菌的纯培养物计数:测定分解尿素的细菌的数量稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。注意:稀释度足够高时,能在培养基表面形成单个菌落。包括系列稀释(梯度稀释)和涂布平板两个步骤1. 稀释涂布平板法一、微生物的选择培养尿素分解菌葡萄糖10.0g尿素1.0gKH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO47H2O0.

16、2g琼脂15.0g蒸馏水1000ml制备选择培养基(尿素为唯一氮源)制备牛肉膏蛋白胨培养基A.空白对照,不接种,证明培养基无污染B.接种无菌水,证明培养基无污染,实验操作符合无菌操作要求C.接种细菌,通过比较细菌数目,证明选择培养具有选择作用1)培养基的制备对照作用思考:为什么还要制备牛肉膏蛋白胨培养基?一、微生物的选择培养尿素分解菌组别具体组别具体操作作用实验组实验组1涂布接种的选择培养基实验组2涂布接种的选择培养基实验组3涂布接种的选择培养基实验组4涂布接种的牛肉膏蛋白胨培养基对照组对照组1不涂布接种的选择培养基对照组2不涂布接种的牛肉膏蛋白胨培养基实验结果注意:本实验实验组和对照组设计如

17、下:三次重复排除偶然因素对实验结果的影响,用以分离并计数能分解尿素的细菌。实验组4与实验组1 、2、3组对比用以验证选择培养基是否具有选择作用。对照组1与实验组1 、2、3组对比用以验证选择培养基中是否含有杂菌。对照组2与实验组4 对比用以验证牛肉膏蛋白胨培养基中是否含有杂菌。实验组1、2、3分离得到尿素分解菌的单菌落; 第4组得到多种菌落; 第5、6组正常情况下无菌落。铲取土样,将样品装入纸袋中将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀,制成菌液。2.稀释涂布平板法的操作过程1mL11090mL无菌水1107110511061103110211041mL1mL1mL1mL9mL无

18、菌水1mL1)梯度稀释取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中,依次等比稀释。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌取0.1mL菌液,滴加到培养基表面。将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。将涂布器放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后,再进行涂布。用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀。2)涂布平板注意:各梯度分别涂布3个平板(重复实验)1个不涂布作空白对照。注意:多余的酒精在烧杯中滴尽,然后再放在火焰上灼烧。3)菌落培养恒温培养箱稀释103倍稀释104倍稀释105倍空白对照细菌一般稀释倍104、105、106 待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板倒置,放入

19、30-37的恒温培养箱中,培养1-2d。不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般在30-37的温度下培养1-2d。一般来说,在相同的培养条件下,同种微生物表现出稳定的菌落特征,如形状、大小和颜色等。每隔24h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。3)菌落培养4)菌落鉴定a.原理: b.方法:CO(NH2)2+H2O脲酶CO2+2NH3分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,使培养基的碱性增强 。脲酶催化尿素分解成氨培养基碱性增强 酚红变红脲酶阳性伊红美蓝培养基:鉴定大肠杆菌。原理:代谢产物与伊红美蓝结合 菌落呈深紫色并带

20、有金属光泽。拓展13. 微生物的数量测定(1)稀释涂布平板法(2)显微镜直接计数法a.选择30-300个菌落的平板进行计数;b.每个稀释度至少取3个平板取其平均值;c.统计的菌落往往比活菌的实际数目低;d.统计的结果一般用菌落数而不是活菌数;e.恰当的稀释度、涂布是否均匀是成功统计菌落数目的关键。因为当两个或多个细胞连在一起长成一个菌落,平板上观察到的只是一个菌落。分析实验结果时,要考虑重复组结果是否接近,如果相差太大,意味着操作有误,需重新实验。稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外,也常用来统计样品中活菌的数目。(1)稀释涂布平板法1)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,

21、来源于样品稀释液中的一 个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。2)计数原则恰当的稀释度、涂布是否均匀是成功统计菌落数目的关键。3)如何从平板上的菌落数推测出每克(每ml)样品中的菌落数? 统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板菌 落数的平均值,然后按公式进行计算。每克样品中的菌落数(CV)MC代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml),M代表稀释倍数。 两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释 倍数为106的培养基中,得到以下两种统计结果。 1.甲同学在该浓度下涂布了一个平板,统计

22、的菌落数为230。 2.乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板,统计的菌落数分别为21、 212、256,该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。 你认为这两位同学的作法正确吗?如果有问题,错在哪? 甲:没有重复实验(至少涂布3个平板) 乙:其中一个平板计数结果与其他两个相差太大,操作过程可能出现了错误。练习1某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234,那么每克样品中的细菌数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml)。( ) A. 2.34108 B. 2.34109 C. 234 D. 23.4 B每克样品中含菌数= 稀释倍数某一稀释度下平板上平均

23、菌落数 n涂布平板时所取稀释液的体积 V(每毫升原液含菌数)练习21)原理 利用细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。2)方法 用计数板计算。(边线上的遵从计上不计下,计左不计右)3)缺点 a.不能区分死菌与活菌。 b.不适于对运动细菌的计数。 c.个体小的细菌在显微镜下难以观察。(2)显微镜直接计数 在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时,A同学从对应的106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落,但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落,分析其原因。原因:(1)土样不同(2)培养基污染或操作失误小结:通过这个事例可以看出,实验结果要有说服力

24、,对照的设置是必不可少的。方案一:由其他同学用与A同学相同土样进行实验。如果结果与A同学一致,则证明A无误;如果结果不同,则证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。方案二:将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染。解决方案思考1在以尿素作为唯一氮源的培养基中分离出的微生物都是能分解尿素的吗? 不一定。因为有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物进行生长繁殖。思考2(4)选择培养基四种常见制备方法或实例 1选择培养基可以鉴定某种微生物的种类()2从物理性质的角度看,选择培养基多属于固体培养基()3只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素()4筛选能分解尿

25、素的细菌所利用的培养基中,尿素是唯一的氮源() 5分解尿素的细菌在分解尿素时,可以将尿素转化为氨,使得培养基的pH降低 ()6在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变蓝,则说明筛选到分解尿素的细菌()7显微计数法所计数的既有活菌也有死菌()8涂布平板法计数的应为活菌数,但实际的活菌数可能少于计数的菌落数() 9.(2020天津红桥区一模)咔唑(含N有机物)具有潜在致癌性,且结构稳定难以清除。为了获得高效降解咔唑的微生物,研究人员设计了如图所示的实验方案。下列针对该方案的表述错误的是()A油田淤泥样品需要作灭菌处理B该方案中的添加CNFM的培养基是典型的选择培养基C平板培养是为了筛

26、选出目标微生物D咔唑浓度最低的摇瓶内为目标微生物A 10.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题:(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生 。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是 ,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是(答出两点即可) 。脲酶分解尿素的细菌是异养型生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料 (2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择 (填“尿素”“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是 。(3)用来筛选分

27、解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有 (答出两点即可)。尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH的稳定11.(2021广西柳州模拟)泡菜的制作离不开乳酸菌,某研究人员用泡菜滤液为材料分离纯化乳酸菌。已知培养基由于添加碳酸钙而呈现乳白色,乳酸能溶解碳酸钙。请冋答问题: (1)在培养乳酸菌的过程中除了满足乳酸菌对营养物质的需求,还必须提供 环境。在纯化、分离时,应该挑选出 的菌落作为初筛菌种。(2)研究人员取10 mL泡菜滤液稀释104倍,然后分别取0.

28、1 mL涂布在3个培养基上,在适宜条件下培养一段时间后,平板上长出菌落的数目分别为130、136和121,则每1 mL该泡菜滤液中活菌落为 个。此外, 也是测定微生物数量的常用方法。无氧周围有透明圈显微镜直接计数1.29107微生物的鉴定培养纤维素分解菌1.请思考与“纤维素分解菌分离、鉴定”相关的问题。(1)自然界中纤维素分解菌大多分布在 的环境中。从该环境取回的土样中含有多种微生物,该兴趣小组可在培养基中加入 来帮助筛选纤维素分解菌。若下图为培养结果,应选择的菌株为 (填“菌”“菌”或“菌”)。富含纤维素刚果红菌(2) 对筛选得到的微生物还需进一步纯化培养以增加菌种的数量,为方便后续的计数,

29、宜采用的纯化方法是 ,此法中使用的接种工具为 。(3)从土壤中分离分解纤维素的微生物所使用的培养基,纤维素是唯一的碳源,同时加入了刚果红,请问从用途的角度分析,该培养基既属于 ,又属于 。(4)当要计数样品的活菌数时,须选择菌落数为 的平板进行计数,以保证结果准确。稀释涂布平板法涂布器选择培养基鉴别培养基30300?思考: 人、兔、牛谁能利用纤维素?为什么? 因为在草食性动物的消化道内共生有分解纤维素的微生物,这些微生物产生的纤维素酶分解纤维素;蘑菇自身产生纤维素酶分解纤维素; 兔、牛、蘑菇能利用纤维素,而人的消化道内没有这些微生物。(一)纤维素(1)基本单位: 。 土壤中某些微生物能够产生纤

30、维素酶,把纤维素分解为葡萄糖,后再利用。一. 基础知识葡萄糖1纤维素酶是一种 ,一般认为它至少包括三种组分,即 。复合酶C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶(二)纤维素酶取二支20mL的试管,编号甲乙各加入一张滤纸条各加入pH4.8,物质的量浓度0.1mol/L的醋酸醋酸钠缓冲液11ml和10ml 甲 乙在乙试管中加入1mL纤维素酶两支试管固定在锥形瓶中,放在140r/min的摇床上振荡1h结果:乙试管的滤纸条消失讨论:乙试管的滤纸条为什么会消失?甲试管的作用是什么?纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶/Cx酶葡萄糖苷酶?实验:证明纤维素酶分解纤维素的实验(三)实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养

31、基挑选菌落在什么样的环境取样?根据:微生物对生存环境的要求,到相应环境中去找;实例:树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等。讨论:如果找不到合适的环境,可以将滤纸埋在土壤中,将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋在土壤中多深?将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中。10cm左右的腐殖土壤中土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落 培养的目的? 选择培养基的特点?目的:增加纤维素分解菌的浓度1、纤维素分解菌选择培养基属于_(固体、液体)培养基,原因是_【资料二】选择培养阅读资料二“选择培养基”,回答以下几问题:液体没有添加琼脂2、该培养基对微生物_(具有/不具有)

32、选择作用。如果具有,其选择机制是_ 具有 以纤维素为主要碳源,能分解纤维素的微生物可以大量繁殖;培养基组成纤维素粉5gNaNO31gKCl Na2HPO47H2O KH2PO4 MgSO4 7H2O 0.5g 1.2g0.9g0.5g酵母膏0.5g水解酪素0.5g溶解后,蒸馏水定容至1000mL酵母膏:提供碳源、氮源、生长因子水解酪素:提供碳源、氮源其他微生物也能在该培养基中生长繁殖。起到“浓缩” 作用!3、你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用?提示:自变量为培养基的种类,即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选

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