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文档简介

1、如何从环境中分离厌氧固氮菌生物技术二班李宇杰1固氮菌的种类固氮菌厌氧兼性厌氧专性厌氧好氧固氮菌属 自生固氮菌红螺菌属着色菌属共生固氮菌根瘤菌属弗兰克氏菌属联生固氮菌固氮螺菌属拜叶林克氏菌属2一、接种 二、培养、观察 三、镜检 3一、接种1接种前，将灭过菌的、盛有无氮培养基的培养皿，放在37的恒温箱中一两天。随后，选取培养基上没有生长任何微生物的培养皿供实验用。2取10g土壤，放在无菌研钵中，注入5mL无菌水，并用无菌玻璃棒搅拌均匀，备用。3将接种环放在酒精灯的火焰上灭菌。略微打开培养皿盖，将接种环放在培养基边缘处冷却。然后，用接种环蘸取少许稀泥浆，轻轻地点接在培养基的表面上，共点接1520处(

2、注意：接种时手和衣袖不要碰到火焰，以免烧伤)。4二、培养、观察培养：将接过种的培养皿放入恒温箱内，在2830的温度下培养34d。观察：34d后，取出培养皿，仔细观察培养基上稀泥浆周围长出的培养物黏液。黏液初为无色透明，以后为乳白色，最后变成褐色，表明含有自生固氮菌。5三、镜检1制作临时涂片(1)用镊子从存放载玻片的酒精缸中夹取一片载玻片，将载玻片放在酒精灯火焰的上方缓缓烘烤，以便除去上面的酒精。将载玻片放在实验桌上，待载玻片冷却后，在载玻片的中央滴一滴无菌水。(2)在火焰旁，按照接种的要求，用灭过菌的接种环从培养基上挑取少许黏液，将黏液涂在载玻片上的水滴中，加1滴结晶紫染液，混合均匀，染色1min。(3)另取一片载玻片作推片。将推片自液滴左侧向右侧移动，使液滴均匀地附着在两片之间。然后，将推片自右向左平稳地推移(两片之间呈3045夹角)，推出一层均匀的菌膜。2干燥让临时涂片自然干燥(自生固氮菌的临时涂片不用加热固定，以免破坏荚膜)。3在显微

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