生物选修一 专题五 DNA和蛋白质技术练习题

1、专题五DNA和蛋白质技术以下三图是提取和分离蛋白质实验中的有关示意图，甲图用于，目的是乙图分离蛋白质的方法为，是根据分离蛋白质的有效方法；丙图分离蛋白质的方法为，其中的加样孔法分离蛋白质完全取决于蛋白质分子的大小。abQ010丙乙操压透折袋、标准蛋口丰&詁提示透析去除样品中相对分子质量较小的杂质凝胶色谱法相对分子质量的大小电泳法SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳血红蛋白的提取和分离实验流程提取DNA常选用(A.猪血B.鸡血)，原因是提取血红蛋白常选用(A.猪血B.鸡血)，原因是洗涤红细胞所用溶液是，洗涤的目的是洗涤干净的标准是。释放血红蛋白所用溶液有，其作用是写出血红蛋白溶液离心分离的结果飆色所含樹履白

2、也脂宪物质将收集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析，透析的原理和目的分别是什么？提示(1)B猪血中红细胞不含有DNA,鸡血中红细胞含有DNAA猪血中红细胞不含有细胞核和各种细胞器，而是充满血红蛋白溶液，减少其他杂质的干扰生理盐水去除细胞表面的杂质蛋白,且保持红细胞不破裂上清液中没有黄色蒸馏水和甲苯蒸馏水的作用：使红细胞吸水破裂,释放细胞内的血红蛋白甲苯的作用：溶解细胞膜,有助于血红蛋白释放无色透明液体甲苯红色透明液体血红蛋白溶液暗红色沉淀红细胞破碎物血红蛋白是大分子物质,不能透过透析袋,这样可以去除样品中相对分子质量较小的杂质凝胶色谱柱操作分析凝胶色谱柱制作不规范对血红蛋白分离产生的影响：凝胶

3、色谱柱高度不足：凝胶装填得不够紧密、均匀:。装填凝胶柱时有气泡存在：凝胶色谱柱制作成功的标准是。提示(1)达不到分离效果会在色谱柱内形成无效的空隙,使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液的流动次序,影响分离效果搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果(2)红色区带在洗脱过程中均匀一致地移动4.随着人类基因组计划的进展和多种生物基因组测序工作的完成，人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。对蛋白质进行研究时，首先要获得纯度较高的蛋白质。下图1是某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”：实验准备配制缓样品处理洗

4、涤、蛋白质粗冲液血细胞悬液f破碎、离心等f分离透析f纯化、纯度鉴定凝胶色谱法、电泳等图1请回答下列有关问题：样品处理中红细胞的洗涤要用反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是。血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是，若要尽快达到理想的透析效果，可以(写出一种方法)。血红蛋白的纯化是通过法将相对分子质量大的杂质蛋白除去。电泳利用了待分离样品中各种分子的等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。解析(1)样品处理中红细胞的洗涤要用生理盐水反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红

5、细胞，破碎细胞的原理是渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破)。(2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是除去小分子杂质。(3)血红蛋白的纯化是通过凝胶色谱法除去相对分子质量大的杂质蛋白。(4)电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异，而产生不同的迁移速度，实现各种分子的分离。(5)由如图2可知携带者有2种血红蛋白，因为携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质。答案(1)生理盐水渗透(作用)原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破)(2)除去小分子杂质增加缓冲液的量或及时更换缓冲液(3)凝胶色谱(4)带电

6、性质以及分子大小、形状回答有关蛋白质分离和纯化的问题：(1)要获得血清蛋白的粗制品，必须将含有柠檬酸钠的血液进行处理，然后将装入透析袋中除去。(2)要获得血红蛋白，应如何破碎红细胞？下图为血清蛋白通过醋酸纤维薄膜的电泳图谱，你认为含量最多的蛋白质是，含负电荷最多的球蛋白是，相对分子质量最大的球蛋白是。(4)电泳是目前应用最为普遍的蛋白质的方法。答案(1)离心上清液小分子物质(2)加蒸馏水使其胀破(3)清蛋白a球蛋白y球蛋白(4)(分离)纯化红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，提取和分离血红蛋白。下图表示血红蛋白提取和分离

7、的部分实验装置，请回答下列问题：0D甲1|痿冲佯IJ|#|乙透析裳血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有功能。我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验，实验时加入柠檬酸钠的目的是。甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是;该操作目的是去除样品中。乙装置中，操作压一定，保证C溶液的流速(填“快”“慢”或“一定”)。TOC o 1-5 h z(3)用乙装置分离蛋白质的方法叫。最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行。还有同学将大肠杆菌破碎并提取得到大肠杆菌蛋白质，一同学利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的分子大小、以及分子的形状等。而另一位同学则利用乙图分离，待蛋白质接近色柱底端时，用试管连续收集流出液。先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是先收集到的蛋白质。解析(1)血红蛋白具有运输氧气的功能；在分离蛋白质的实验中，加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。(2)在血红蛋白的溶液中，加入适宜的磷酸缓冲溶液，可以除掉分子量较小的杂质；在利用凝胶色谱法分离蛋白质的时候，洗脱液的速度应当保持一定。(3)装置乙分离蛋白质的方法是凝胶色谱法。(4)最后用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳对血红蛋白进行纯度鉴定。(5)利用凝胶电泳进