鸭疫里默氏杆菌病

1、鸭疫里默氏杆菌病 一、命名与历史 1904年Riemer等最早报道了鹅发生本病并称之为“鹅渗出性败血症”； 1932年Hrndrickson等在美国纽约州长岛鸭群中发现本病，并首次分离到病原，当时称为“新鸭病”或“鸭疫综合症”; 1952年Dougherty等经过病理学检查后将该病命名为“鸭传染性浆膜炎”， 1977年Leibovitz等建议使用“鸭疫巴氏杆菌感染”这一名称。 我国郭玉璞等于1982年在北京 首次发现此病。 对该病进行大量研究后，郭玉璞等建议将该病称之为鸭疫里默氏杆菌病为宜，不宜再使用鸭传染性奖膜炎这一病名，因为出现传染性浆膜炎的疾病有多种，如大肠杆菌病、鸭沙门氏杆菌病、鸭衣原

2、体病等，因此，还是以病原菌定病名为宜。 二、分布 加拿大、西班牙、新加坡、 泰国、澳大利亚、日本、挪威以及前苏联相继报道有该病的流行，至今世界各地几乎都有本病的发生。 近年来，我国学者在福建、广东、四川、湖北、江苏、浙江、台湾等地也先后分离到RA。 三、流行特点与危害 RA主要感染鸭并引起发病，不同 品种的鸭北京鸭、樱桃谷肉鸭、番鸭、 半番鸭、康贝尔鸭等均能发生此病；也能感染鸡、鹅、野鸭，但很少见。 主要侵害17周龄雏鸭，1周龄以内的雏鸭因有母源抗体而很少发病，种鸭及成年鸭不易感，但也可感染、带菌及排菌。 通过污染的饲料、饮水、尘土、 飞沫等，经呼吸道、消化道或皮肤的 伤口(尤其是足蹼部皮肤)

3、而感染。 急性经过可引起雏鸭大批死亡，耐过者发育迟缓，增重缓慢，饲料报酬下降；慢性经过患鸭主要表现为脑膜炎症状，导致残鸭和僵鸭。 耐过鸭生长不良，增重缓慢，失去饲养价值. 该病能在发病场持续存在，加上本病难于根治，给养业造成严重的经济损失。本病发生与鸭龄的大小、饲养管理的 好坏、不良应激因素或其它病原感染 有一定的关系，死亡率一般在5%一75%。 如在卫生条件差，饲养管理不善、或雏鸭转换环境、气候骤变、受寒、淋雨，及有其它疾病(如番鸭花肝病、禽大肠杆菌病、禽出败等)混合感染时，更易引起本病的发生和流行，死亡率往往可高达90%以上。 四、病原学 （一）分类地位 1932年Hrndrickson等

4、首次分离和鉴定了致病细菌，并称之为鸭疫斐佛氏菌(Pfeifferella anatipestifer); 1954年Bruner等发现该菌与莫拉克氏菌属中的细菌有较多共同之处，因此建议采用鸭疫莫拉克氏菌(Moraxella anatipestifer ); 后来根据形态和染色特征，将其命名为鸭疫巴氏杆菌； 德国学者Piechulla等(1986)根据 DNA结合、甲基萘醌类和分支脂肪酸 的产生，首次提出将该菌列为黄杆菌/噬纤维菌属。 随着分子生物学的发展，Segers等(1993)分析了该菌的各种表型参数和基因型特征，建议将其归列为黄杆菌/噬纤维菌rRNA同源群，并建议将其独立成一属，为纪念在

5、1904年最早发现鹅感染本菌的Riemer氏，遂将本菌的属名定为Riemerella，代表种即为Riemerella anatipestifer 并已获得公认。（二）形态结构 RA为革兰氏阴性小杆菌，无芽孢， 不运动，单个散在，少数成双；大小为0.30.5m0.76.5m，偶见个别呈长丝状，瑞氏染色可见部分菌体为两极着色；经印度墨汁负染可见荚膜。 (三)超显微结构 RA的周边荚膜是一电子透明层， 细菌胞壁为1条电子致密层，细胞膜 有3层结构，外层与内层呈电子致密层，细胞膜与细胞层之间有一明显的间隙，在菌体周边有圆形或卵圆形空泡状结构，位于菌体一端。 部分、型RA顶端或侧面有12个与菌体相连的芽

6、状赘生物，有的能从菌体上脱落下来。 (四)培养特点 RA可在巧克力琼脂、胰酶大豆琼脂、 LB培养基等固体培养基和含有丰富血清的液体培养基上生长； 在普通琼脂和麦康凯琼脂上不能生长，这可作为区别诊断的依据； CO2能使RA生长更加旺盛，因此初次培养宜在CO2培养箱或烛缸内培养。 445都可生长，37生长最佳。（五）菌落特点 CO2培养箱或烛缸中，经37培养 2448h，RA生长最佳，菌落呈圆形、稍突起、表面光滑、透明，直径12mm，迎光观察均发绿色，若继续培养，菌落稍大。 据报道，不同血清型的RA生长速度有所差异，10型RA生长最快，培养7h即可长成，2型最慢。 在含有血清的肉汤或胰酶酵母肉汤中

7、，培养48小时，可见上下一致轻微浑浊，管低有少量沉淀。（六）理化特性 通常认为RA不发酵糖类，也有 报道某些菌株可以分解葡萄糖、麦芽糖、果糖。大多数菌能缓慢液化明胶、凝固血清和鸡蛋，石蕊牛奶无变化，不还原硝酸盐，不产生硫化氢，吲哚、西蒙氏柠檬酸盐、丙二酸盐、苯丙氨酸、脱氨酶、KCN和脲酸阴性，接触酶、精氨酸双水解酶和氧化酶阳性。但较为一致的报道是不产生硫化氢、西蒙氏枸椽酸盐利用阴性，不能还原硝酸盐，过氧化氢酶阳性 。 在室温下，绝大多数的细菌 在固体培养基上存活不超过34天；4条下在肉汤培养物中可存活23周。 邓治邦等实验证明，4保存14天的肉汤菌液，其致病力下降50%以上，26天后则完全丧失

8、致病力。（七）血清型 1、血清型 RA的血清型分型最早由Harry(1969)提出。迄今为止，已公认的RA有21个血清型（l21型）。但Pornpen等对20型提出质疑，认为其不属于RA。 RA各血清型之间缺乏交叉保护的能力，但Loh等认为12型抗血清与16型抗原之间存在110的交叉凝集价。 目前，我国已报道的有血清1、2、 3、4、5、 6、7、 8 、10、11、13、14、15型和4个未定名型。 2、分型方法 （1）凝集试验：易出现非特异性反应，而将RA菌体洗涤后作为凝集抗原，即可减少非特异性反应。 （2）琼脂扩试验：特异性反应更弱，但将琼脂凝胶沉淀试验抗原适当稀释能解决这一问题。 ()

9、 试管凝集：较费时，但可以对RA血清进行定量测定。 Pornpen Pathanasophon等发现10型RA菌株存在不同的亚型。 亚型的分类更有利于解释目前同型血清疫苗难于控制RA流行的现象. 但亚型的定型方法还有待进一步改进. 3、血清亚型 (八) 分子生物学 Subramaniam等对4株RA编码16SrRNA的基因序列进行了比较分析，发现同源性差异仅为0.5-1.0%，经限制性酶切片段长度多态性分析(RFLP)表明即使是同一血清型的不同RA菌株16 SrRNA基因仍有差异。 Bin Huang等应用重复序列PCR对35株RA进行了DNA指纹图谱分析，发现即使同一血清型的RA菌株其DNA

10、指纹图谱也所不同。 1998年Chang等首次报道了RA株 的质粒DNA结构。他们对从台湾地区 分离到的60株鸭和鹅的分离株进行的研究表明，60%的分离株有一个质粒，12%的分离株有两个质粒，5%的分离株有三个质粒。3.9kb的质粒pCFC1含有四个开放阅读框架(ORF)，其中两个ORF VapD1、VapD2编码RA的毒力相关类蛋白基因。 1999年他们又报道了大小为5.6 kb 的第二质粒pCFC2的全序列。pCFC2有三个ORF，VapD1、RepA3和插入序列(ISRa1)。ISRa1编码毒力相关类蛋白基因，并且是第一次确定在革兰氏阴性细菌中存在的插入序列。 随着对RA质粒的分布及其作

11、用的逐步了解，更能解释RA菌株在致病力、免疫原性上的差异。 五、临床症状 最常见的症状是精神沉郁，眼和鼻有浆液性或黏液性分泌物，严重时堵塞鼻孔，张口呼吸；排绿色稀粪，双脚软弱无力，行走不稳，伏地不起；临死前出现神经症状如头颈震颤，角弓反张，抽搐，阵发性痉挛。慢性经过患鸭主要表现为脑膜炎症状，导致残鸭和僵鸭。六、病理变化 病变最明显之处表现为纤维素性心包炎、气囊 炎、肝脏炎。纤维素性渗出物多时，可使心外膜与心包膜粘连，难以剥离。气囊混浊增厚，有纤维素性渗出物附着，呈絮状或斑块状。肝脏表面覆盖的纤维素性膜呈灰白色或灰黄色，厚薄不均，易剥离多数病例有不同程度肝肿大，质脆。 胆囊往往肿大，充盈着浓稠的

12、胆汁。 中枢神经系统感染可出现脑膜充血出血，脑 组织 水肿。 少数病例可见输卵管炎，即输卵管膨大，内有干酪 样物质蓄积。 七、诊断技术 1、RA分离培养初步诊断：临床症状、病理变化，结合菌落生长 特征、鉴别培养、抹片镜检、生化特点。进一步确诊：血清学方法。从死亡鸭的脑、心血、肝脏、脾脏和胆囊均易分离到RA，且脑组织的分离率最高。 （1）玻片凝集试验 适宜大量菌株的分型鉴定，但易出现非特异性反应。 （2）试管凝集试验 可以对RA血清进行定量测定，但比较费时。 （3）琼脂扩散试验 也有非特异性反应出现，只不过其特异性反应更弱。 、血清学技术 （4）间接血凝试验（5）间接ELISA （6）间接免疫荧

13、光抗体试验（7）直接荧光抗体检测法（8）间接免疫酶组织化学法 、PCR技术 目前，运用分子生物学方法检测RA的报道较少。 国内胡清海等根据 已发表的鸭疫里默氏杆菌15型CVL110/89株编码42-kDa主要外膜蛋白的基因序列设计并合成一对引物，建立了PCR方法，适用于，2，6，10，14，15等血清型RA的检测；并能直接从病料中检出RA。4、鉴别诊断：大肠杆菌病沙门氏菌病衣原体八、防制1、一般措施(1)加强饲养管理，喂以优质全价的饲料，保证能满足 其生长需要，以增强雏鸭的体质。(2) 适当调整鸭群的饲养密度，做好保暖、防湿和通风 工作，尽量减少受寒、淋雨、驱赶、日晒及其它不良因素的影响。(3

14、) 不从本病流行的禽场引进种蛋和雏禽，采用全进全 出的饲养管理制度。(4)注意环境卫生，及时清除粪便，防止尖刺物刺伤脚蹼；(5)对于发病的禽场，应对禽舍、场地及各种用具进行彻底、严格的清洗和消毒。必要时应当全场停养24周。2、疫苗接种（1）灭活苗 单一的灭活苗：油乳剂灭活苗、铝胶灭活苗、蜂胶灭活苗； 油乳剂疫苗：免疫后10天就能产生较好的免疫力(75%)，免疫 15天后就能产生坚强的免疫力(100%)。 蜂胶疫苗：一免后7天开始产生免疫力，10天后可达70%的保 护率，15天后能产生较好的免疫力（80%）。 铝胶苗：铝胶苗保护力出现慢（20天后达75%），且在二免 后才能获得较高的保护率。 二