药物分析知识总结

1、药物分析总结 方法：目视比浊。考前须知：平行试验盐酸（防止碳酸钢或磷酸锹等沉淀生成影响比浊），50ml供试品中含2ml稀盐酸。 供试品溶液不易溶解时，加入适量有机溶剂将药物溶解后再依法检查。供试品有色，使用内消色法解决。 三、铁盐检查法原理：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氟酸盐与作用生成红色可溶性硫氟酸铁配离子，与一定量标准铁溶液用 同法处理后进行比色方法：硫氟酸盐法（Chp、USP） BP采用弱基醋酸法条件：盐酸（防止三价铁离子水解），50nli含稀盐酸4nli为宜标准溶液：硫酸铁胺，并加入硫酸防止铁盐水解，50nli溶液中含10-50ug三价铁离子考前须知：过硫酸镀（氧化二价铁离子成三价铁离子，

2、防止由于光线使硫氟酸铁还原或分解褪色）葡 萄糖中用硝酸作氧化剂，但须加热煮沸除去过量硝酸。过量的硫氟酸筱，增加硫氟酸铁配离子稳定性, 消除其他酸根离子的干扰色调不一致或颜色较浅时，须加正丁醇或异戊醇提取比拟。疏基醋酸法（BP）：原理：疏基醋酸还原三价铁离子为二价铁离子，在氨碱性溶液中作用生成红色配位离子， 比色测定。（灵敏度高，但试剂贵）四、重金属检查法第一法：硫代乙酰胺法|,适用于溶于水，稀酸和乙醇的药物。原理是硫代乙酰胺在弱酸性条件（PH3.5醋酸盐缓冲液）下水解，产生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕 黑色的硫化物混悬液。考前须知： 标准铅溶液浓度 硫代乙酰胺试液（H2s试液：恶臭和毒性；

3、不稳定；易被空气氧化而析 出硫；浓度难以控制。）溶液的pHA pH在3.03.5时，呈色较完全；酸度增大，呈色变浅甚至不呈色；假设经强酸处理，需先加氨水至酚猷显中性，再加醋酸盐缓冲液。 供试品溶液有颜色时的处理a. 外消色法（I.稀焦糖溶液调节n.指示剂调节）b.内消色法 干扰物的排除方法a.供试品中微量高价Fe存在干扰：弱酸性溶液中Fe?一氧化H2s析出S,产生混浊影响检查.排除：加入抗坏血酸或盐酸羟胺使Fa?+还原为Fe2+。b.供试品为铁盐（大量的FeDFe”在HC1溶液中能形成配位化合物用乙配提取Fe，HCl -HFeCL2 （黄色） 水层加氨试液调至碱性，残存的Fe，可用KCN掩蔽，

4、按第三法检查.第二法：炽灼后的硫代乙酰胺法|,适用于含芳环，杂环及难溶于水，稀酸及乙醇的有机药物。原理：供试品先炽灼破坏后，使有机结合的重金属游离,.再按第一法检查.考前须知：a. HN03处理后，必须蒸干除尽NO. b.炽灼温度严格控制：500-6000 c.控制酸中重金属的 影响，对照品同法处理d,含钠盐或氟的有机药物在炽灼时改用的外烟或硬质玻璃(玛瑙)蒸发皿.第三法：硫化竭,适用于溶于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物。原理：在碱性介质中，以Na2s为显色剂，使Ph?与52作用生成PbS的混悬液，与一定量标准铅溶液经同 法处理所呈颜色比拟，不得更深.考前须知：Na2s对玻璃

5、有腐蚀性，久置产生絮状物,应临用新配.第四法：微孔滤膜法|,适用于重金属限量低的药物。五、碑盐检查法(1)古蔡氏法：原理金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量碑盐反响生成具挥发性的碑化氢，遇澳 化汞试纸，产生黄色至棕色的碑斑；试剂的作用：a. KI的作用一一还原剂：As“fAs,以增大AsL的生成速度.b.酸性SnCL的作用：还原剂(表现在2方面)I.将五价碑还原为三价珅(As*玲As：。II. 将KI被 氧化生成的L再还原为； SnC12与KI还可抑制镯化氢生成c. PbAcz棉花的作用排除硫化物的干扰(Img S2-)干扰物的排除：a.供试品是硫化物，亚硫酸盐，硫代硫酸盐。排除方法：加

6、入浓硝酸处理b.供试品是铁盐(Fe)Fe能消耗还原剂(KI、SnCl2),并能氧化种化氢.排除方法：先加酸性SnCL试液使Fe - Fe2+c.共价键结合的碑化物排除方法：进行有机破坏酸破坏法或碱破坏法(2)白田道夫法原理：SnCk在HC1中能将碑盐还原为棕褐色的胶态种，适用：对含睇药物中种盐的检查不能用古蔡氏法，需用白田道夫法.不受睇干扰弹灵敏度低。(3)二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag (DDC)法)本法不仅用于种盐的限量检查，而且可用作微量碑盐的含量测定.(4)次磷酸法原理 在盐酸酸性溶液中，次磷酸还原碑盐为棕色的游离碑特点：用于硫化物、亚硫酸盐以及含睇药物等种盐检查；不受sscVSb干扰

7、六、干燥失重测定法干燥失重(loss on drying)主要检查药物中的水分及其他挥发性物质。指药品在规定的条件下，经干燥后所减失的量，以百分率表示。恒重：连续两次干燥或炽灼后称重差异在0.3mg以下。（一）常压恒温干燥法:适用于受热稳定的药物方法：通常将样品置于相同条件下已干燥至恒重的扁形称量瓶中，再干燥箱中按规定的温度（105）恒温加热将样品干燥至恒重。考前须知：1）平铺厚度， 5 mm；疏松物质， 10 mm2）干燥时，瓶盖置于称量瓶旁，取出前盖上 3）含较多结晶水，在相对高温条件下，先除去局部水分4）含大量其他水分且熔点低，先在低温除去大量水分，或先减压干燥再恒温干燥;5）不易恒重药

8、物，一定温度和时间减少重量判断6）供试品为膏状物，取洗净粗砂粒和小玻棒干燥至恒重后用于搅匀和干燥（二）减压干燥法与恒温减压干燥法:适于熔点低、受热分解的供试品。1）采用减压干燥器（通常为室温）；或恒温减压干燥器（温度按各品种项下的规定设置）2）干燥剂：无水氯化钙、硅胶、或五氧化二磷，有时不用干燥剂。恒温减压干燥器中常用五氧化二磷。（三）干燥剂干燥法：适用于受热易分解或易升华的供试品。分类适用范围温度1）置于干燥器中，利用干燥剂吸收水分，干燥至恒重；常压恒温干燥法受热稳定的药物105 C减压干燥法与恒熔点低或受热分解60 C2）干燥能力：五氧化二磷 硅胶硫酸温减压干燥法的供试品考前须知：干燥剂干

9、燥法受热分解或易升华 的供试品常温1）使用五氧化二磷是需将干燥剂铺于培养皿中，置干燥器内；热分析法2）表层结块或出现液滴，应将表层刮去，加入新的再使用；弃去的五氧化二磷不可倒入下水道，应埋入土中，不重复使用;3）硫酸放于培养皿或烧杯中，可重复使用，将含水硫酸置于烧杯中加热冒白烟，在110约30min。（四）热分析法（热重分析TGA、差热分析DTA、差不扫描量热法DSC）七、水分测定法水分包括结合水和吸附水。药典收载赛休氏法和甲苯法。费休氏法可准确测定药物中的结晶水、吸附水和游离水。原理：碘将二氧化硫氧化为三氧化硫时，需要一定量的水分参与反响，根据消耗碘的量来测定水分的含量。水与费休氏试液摩尔比

10、：水：碘：二氧化硫：甲醇：此咤二1： 1： 1： 1： 3供试品中水分的含量（）=史萨X100%供试品中水分的含量（）=史萨X100%指示终点方法：Fisher试液颜色：淡黄色一一红棕色永停法 八、炽灼残渣检查法 炽灼残渣（residue on ignition）：有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，再经高温炽灼，所产生 的非挥发性无机杂质的硫酸盐。用于控制有机药物经炭化或挥发性无机药物中非挥发性无机杂质。考前须知：1）放入高温炉内之前，务必蒸发除尽硫酸，以免腐蚀炉膛;2）除尽硫酸蒸气，应低温加热，以防由于温度过高，影响测定结果；3）含氟样品采用箱用烟；4）炽灼残渣留作重金属检查是，温度

11、控制在500-600；恒重的第二次称重在继续炽灼30min后进行。 九、易碳化物检饕易炭化物（readily carbonizable substances）：指药物中存在遇硫酸易炭化或氧化而呈色的微量有机物 质。多为未知结构的化合物，用硫酸呈色的方法控制他们的含量。目视比色法。十、残留溶剂测定法I （检查方法：气相色谱法）分类毒性使用举例一类溶剂毒性较大，致癌， 对环境有害防止使用苯、四氯化碳二类溶剂有一定毒性限量使用乙睛、三氯甲烷、二氯甲烷、 嗽咤、四氢吠喃、甲苯三类溶剂危险性较小推荐使用乙酸、乙酸、乙酸乙酯、乙醇 、甲酸残留溶剂（residual solvents）：合成原料药、辅料或制

12、 剂生产过程中使用的，但在工艺中未能完全除去的有机溶 剂。毒性程度分四类：防止使用、限制使用、推荐使用、 其他溶剂。前3类按规定限量使用，第4类根据生产工艺 制定限度P129o（）色谱系统与系统适应性试验（System Suitability Tests； SSTs）以直径为0. 25-0. 18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为固定相，柱温为80-170；并符合下 列条件：用待测物的色谱峰计算的W应大于1000；内标物与待测物的两个色谱峰的伦1.5；每个标准 溶液进样5次，所得待测物与内标物峰面积之比的彩匹5%；假设以外标法测定，所得待测物峰面积的AS店10%（二）测定方法分类适

13、用范围笙一一毛细管柱顶空进样等被检查的有机溶剂数量少且极弟佑温法性差异较小的情况筐一件毛细管柱顶空进样程被检查的有机溶剂数量多且极弟一体序升温法性差异较大的情况十一、溶液颜第 第三法溶液直接进样法 殛溶液颜色（color of solution）检查药物中有色杂质，ChP采取三种检查方法（附录收载）（P134）： 标准比色液比色法； 分光光度法； 色差计法（可测大固体液体；定量；目视法难以判断时使用） 十二、溶液澄清度检查法澄清度（clarity of solution）检查药品溶液的混浊程度，可反响药物溶液中的微量不溶性杂质，主要用 于制备注射剂的原料药或注射剂检查。ChP中澄清度的检查法为

14、比浊法。第四章药物的含量测定方法与验证1、药物的含量：药物所含主成分的量，用于评价药物的质量。2、药典对药物的含量限度的表示方法：原料药：多以表示按原料药本身形式计算其含量：凡未规定上限的，药典凡例中规定，其含量上限不得超过101.0%。由于药物组成不定，需以另一种稳定形式计算含量制剂：制剂的含量限度表示方法有三种情况按标示量计算直接用%含量规定范围（主药含量微）以重量规定含量范围（多为复方制剂）第一节定量分析方法的分类与特点一、容量分析方法1、容量分析的化学反响必须满足的条件: 反响有一定的化学计量关系，且能定量完成反响速度要快必须有合适确实定滴定终点的方法 滴定分析法：酸碱滴定法；沉淀滴定

15、法；配位滴定法；氧化还原法；非水溶液滴定法等 2、特点：简便易行、耐用性高、结果准确：相对误差小于0.2%、专属性差（化学原料药的含量测定） 3、有关计算滴定度：指每1 ml规定浓度的滴定液相当于被测物质的量，以T表示，中国药T（mg/ml） = mx-xM b典以mg表示。4、含量计算药物的百分含=TxFWxlOO%（1）直接滴定法实际滴定度（或校正滴定度）T，的计算F=T*F尸二实际滴定液浓度（标定滴定液浓度）一规定滴定液浓度含量=祟-。%=-。%（2）间接滴定法1）生成物滴定法：供试品+试剂a化合物b；化合物b +滴定液c 化合物d计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量2）回滴定法（剩余滴

16、定法）原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定液A,使它和样品反响，等反响结束后，再用另一种滴定液B 来回滴剩余的滴定液A。（V F F ）XT不做空白的含量计算一 / xi%特点：A、B两种滴定液均需标定 做空白的含量计算方法 合4-%XT*/的。/特点：仅需标定滴定液B的浓度W二、光谱法紫外-可见分光光度法1、朗伯比耳定律（Lambert-Beer定律）：A=E*C*L：一定波长下，溶液浓度为1% （W/V）,液层厚度为1cm时，物质的吸收度-定量依据2、对溶剂的要求以空气做空白，测定溶剂加吸收池的吸收值，要求:220nm240nm A 0. 40 TOC o 1-5 h z 241nm

17、250nm0.20251nm 300nm0. 10300nm 以上0. 053、含量测定(Cl（1）对照品比拟法：供试品的浓度为:（2）吸收系数法：按规定方法配制供试品，在规定的波长及吸收厚度下，测定吸收度，计算再按在相同条件下，标准对照品测到的计算含量： 含量% =修：/ x 100%注意：此法对仪器要求高，必须注意校正和检定吸收系数100（3）计算分光光度法：一般不宜用作含量测定（当测定波长处于吸收曲线陡升或陡降部位时，对测定影响大）（4）比色法：供试品本身无吸收或有吸收但干扰大，可加入适当的显色剂后测定。影响因素多，应平行操作三、色谱法（一）高效液相色谱法 1、对仪器的一般要求：固定相种

18、类、流动相组成、检测器注意：使用G8时，流动相中含有的有机溶剂比例应不低于5 %；药典中规定的固定相种类、流动相组成及检 测器类型不能随意改变 2、系统适用性试验U7试验指标：理论塔板数n、别离度R、重复性（5次连续进样，RSDW2.0%）、拖尾因子（T） 7 詈3、测定法（大多采用峰面积法）（1）外标法：特点：简单，但要求进样量准确；操作条件稳定。 .Cf（2）内标法：特点：可防止因样品前处理及进样体积误差对结果的影响。供试品浓度Cx校正因子/=/1, Ar / /Cr（二）气相色谱法 1、对仪器的一般要求3色谱柱种类：毛细管柱或填充柱3 载气：氮气3检测器：氢火焰离子化检测器, 检测温度一

19、般高于柱温，不得低于150度。药典中规定的固定液品种、检测器类型及特殊指定的色谱柱材料不能随意改变2、色谱系统适用性试验：照HPLC项下3、测定方法：外标法；内标法；标准加入法4、注意：自动进样，内标或外标；手动进样，内标定量；顶空进样，标准加入法定量，消除基质效应的影响 四、含量分析方法的比拟容量分析：简便、准确、耐用性好，相对误差在0.2%以下适用于对准确度和精密度要求高的供试品测定。专属性差光谱分析：简便、快速、灵敏，相对误差在2%5%,适用于对灵敏度要求高、样本量大的供试品测定。专属性稍差色谱分析：灵敏度及专属性高，适用于复杂的供试品测定。定量时需要对照品第二节样品分析的前处理方法、不

20、经有机破坏的分析方法: （一）直接测定法：金属原子不直接与碳原子相连的含金属有机药物；某些CM键结合不牢固的有机金属药物 （二）水解法1、酸水解法：水难溶的含金属的有机药物2、碱水解法：适用范围：含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物，如卤素和脂肪碳链相连。3、还原法：含碘有机药物二、经有机破坏的分析方闵:适用于金属原子与碳原子结合牢固的有机金属药物，使有机结合状态的金属及卤素转变为可测定的无机化 合物，再选用适当的方法测定。（一）湿法破坏凯氏定氮法：将含氮药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药物分子中有机结构被氧化分解（消解）成二氧化碳和水， 有机结合的氮转变为无机氮，与过量硫酸结合成硫酸氢铁

21、，经氢氧化钠碱化后释放氨气，随水蒸气储出，用硼 酸溶液或定量酸滴定液吸收后，滴定。（二）干法破坏1、高温炽灼法：将有机物灼烧灰化使有机结构分解而待测元素转化为无机元素或可溶性无机盐 限制：对于含易挥发性金属（如汞、碑等）有机药物不适用特测元素吸收液氟侬水氯假*-NaOHW澳单质浪、澳化氢水一 NaOH-SOz饱和溶液碘单质碘、少产、 产、J i硝酸银法：P, zk-NaOH-SO2饱和溶液间接碘量法t水一NaOH溶液硫三氧化硫浓“5 一水液硒Se5（少量 SeOJ硝酸溶液2、氧瓶燃烧法（Oxygen Flask combustion method）：将有机药物在充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧

22、，有 机结构分解为CO?和乩0,用适当的吸收液吸收待测元素（已转化为不同价态的氧化物），以供待测元素的检 查或定量测定用。特点：适用于分析含卤素、硫、磷等有机药物;简便、快速、破坏完全右图为吸收液的选择第三节药物质量标准分析方法的验证目的：证明所采用的分析方法适相应的检测要求，方法验证过程和结果均应记载在药品标准起草和修订说明中 用途：药品质量标准起草时，分析方法需经验证；药物合成方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证需验证的分析工程：1.鉴别试验2.杂质定量或限度检查3.原料或制剂中有效成分含量测定4.制剂中其它 成分（降解产物、防腐剂等）的测定5.溶出度、释放度等

23、功能检查中的溶出量等的测试方法药品质量标准分析方法验证内容有：准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定 量限、线性、范围和耐用性一、准确度accuracy表示分析结果与真实值接近的程度。准确度一般以百分回收率表示。1.含量测定方法的准确度（1）原料药的含量测定（2）制剂的含量测定回收率 100%加入量回收率% =100%加入:回收率吟测考式”制剂各组分不能获得制剂各ta分X1OO%2、杂质定量测定的准确度：可向原料药或制剂中加入量杂质进行测定 3、数据要求：在规定范围内，至少用9次测定结果进行评价。例如制备3个不同浓度的样品，各测定3次4、要求：（1）加入的对照品浓度应

24、为高、中、低三个浓度，每个浓度测定三次,UV 和 HPLC 法：98%102%（3）容量分析法：99. 7%100. 3%二、精密度precision是指在规定的条件下，同一个均匀样品，经过屡次取样测定所得结果之间的接近程度。（一）精密度的表示方法：可用偏差、标准偏差或相对标准偏差（变异系数）表示.偏差：测量值与平均值的差称为偏差，用D表示。偏差越大，精密度越低。（d =测量值一平均值）.标准偏差：是偏差平方的统计平均值，又称为均方根偏差。当测定次数n为有限次时，标准偏差（s）.相对标准偏差（RSD）变异系数，通常用百分数表示（二）重复性、中间精密度和重现性.重复性：在规定的范围内，至少用9次

25、测定结果进行评价（三个不同浓度的样品，各测定3次）.中间精密度.重现性.准确度和精密度的关系三、专属性specificity指在其他组分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在的情况下，采用的方法能准确 测定出被测物的特性。四、检测限（LOD） limit of detective指试样中被测物能被检测出的最低量或浓度，是一种限度试验的参数.非仪器分析目视法：用浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。2,信噪比法：用于能显示基线噪音的分析方法。一般以信噪比为3或2：1时相应浓度或注入仪器的量来确 定检测限。五、定量限（LOQ） limit of quantitation指样品中被测物能

26、被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准 确度和精密度。定量限常用信噪比法来确定（信噪比为10:1）定量限与检测限的区另！I：定量限规定的最低测得浓度应该符合一定的精密度和准确度的要求六、线性：线性系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。用高浓度的贮备液经精密稀释，进行测定，至少制备5份或5份以上不同浓度的测定液。七、范围：范围是指能到达一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间 八、耐用性robustness典型的变动因素有：被测溶液的稳定性，样品提取次数，时间等第六章芳酸及其酯类药物分析一、结构与性质1、酸性：具-COOH。酸性受苯环、

27、一COOH和其它取代基的相互影响。取代基位置：邻位一0H取代酸性强，能 与邻位一COOH形成分子内氢键。水杨酸阿司匹林苯甲酸.水解性：ASA、双水杨酯及其制剂应检查水杨酸，对氨基水杨酸钠和贝诺酯检查间氨基酚和对氨基酚。. UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环，有UV和IR特征吸收。.芳伯氨基和酚羟基特性：二、鉴别试验鉴别实验特征结构备注与三氯化铁反应显色水杨酸、酚羟基阿司匹林、双水杨酯、二氟尼柳：均 通过产生水杨酸与三氯化铁反响显色。此罗昔康、美洛昔康的烯醇式羟基具有酚羟基的性质缩合反响二苯甲酮结构酸性条件下与二硝基苯崩缩合产生橙色偶氮化合物重氮化一偶合反响具芳伯氨基或潜在芳伯氨基结构酸性条

28、件生成对氨基酚，亚硝酸钠/碱性B-蔡酚氧化反响甲酚酸钠的硫酸溶液，与重辂酸钾试液 呈深蓝色，随即变为棕绿色。呻喋美辛的硫酸溶液，与重辂酸 钾共热呈紫色。水解反响阿司匹林与碳酸钠试液加热水解得到 水杨酸钠及醋酸钠，加过量稀硫酸酸化 后，生成白色水杨酸沉淀，有醋酸臭气与氢氧化钠煮沸，水解得水杨酸 盐，加稀酸酸化析出白色水杨酸 沉淀，在醋酸铁溶液中可溶。特征元素反响氯元素、硫元素双氯芬酸钠与碳酸钠炽灼灰化美洛昔康中硫元素的鉴别光谱法紫外可见；红外2U;测定鼠x：儿汨；吸光度法；吸光度比值法；在Amax处测定供试液 的百分吸收系数色谱法TLC ：比移值HPLC：供试品保存时间，对照品保存时间三、特殊杂

29、质及其检查方法绪论药物待检杂质方法备注阿司匹林游离水杨酸HPLC有关物质HPLC双水杨酯游离水杨酸比色法1药品:用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应证或者功能主治，用法用 量的物质。.药物分析(pharmaceutical analysis)：是利用分析测定手段,开展药物的分析方法，研究药物的质量规律， 对药物进行全面检验与控制的科学。.国家药品质量标准是由国家食品药品监督管理局公布的中华人民共和国药典和药品标准。.中华人民共和国药典Ch.p；美国药典(USP)；美国国家处方集(NF)；英国药典(BP)；日本药局方(JP)； 欧洲药典(Ph. Eur)；国际药典(

30、Ph. Int)；5,药品非临床研究质量管理规定(GLP)；药品生产质量管理规范(GMP)；药品经营质量管理规范(GLP)；药品临床试验质量管理规范(GCP)；分析质量管理(AQC)； ICH第一章药品质量研究内容与药典概况第一节中国药典的内容与进展.中国药典Chinese pharmacopoeia,Ch. P。是国家对药品质量级检验方法所做的技术规定。是药品研制， 生产，经营，使用和监督管理等均应遵守的法定依据。.中国药典(2010版)分为一部、二部、三部，一部收载药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂、单 味制剂等。二局部收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品以及药用辅料。三部收载生

31、物制品。2015版分为一部、二部、三部、四部。第四部制剂通那么、通用检测方法和指导原那么。.中国药典的内容A凡例general notice：解释和正确使用中国药典进行质量检定的基本原那么，并把与正文品种、附录 及质量检定有关的共性问题加以规定，防止在全书中重复说明。B正文monographs：为所收载药品或制剂的质量标准。主要包括药品性状、鉴别、检查、含量测定、类别、 剂量、作用和用途。C附录apendices：包括制剂通那么、通用检测方法、指导原那么D索引：中文、英文.中国药典设计原那么:使用平安、疗效可靠、工艺合理、质量可控、标准完善第二节药品质量研究及内容1.药品标准：系指根据药物自身

32、的理化性质与生物学特性，按照批准的来源，处方，生产工艺，贮藏条件等 所制定的，用以检测药品质量是否到达用药要求病衡量其质量是否稳定均一的技术规定。甲芬那酸2, 3一一二甲基苯胺GC可引起高铁血红蛋白症、对中枢神经及肝脏有危害。限量0.01%有关物质HPLC单一杂质限量0.现；杂质总量为0.5%一氟尼柳有关物质A正相TLC自身对 照法极性较小的杂质，单一杂质限量为0.5%有关物质B反相HPLC极性较大杂质，各面积和为0.5%蔡普生6-甲氧基一2-奈乙酮 及其他有关物质HPLC对乙酰氨基酚对氨基酚和有关物质对氯苯乙酰胺四、含量测定（一）酸碱滴定法.直接滴定法：在中性乙醇中，以酚酰为指示剂，摩尔比为

33、1:1乙醇：溶解ASA；防止ASA在水溶液中滴定过程易水解。中性乙醇：对指示剂而言为中性，可消除滴定误差本法缺乏专属性，易受水杨酸和醋酸的干扰，不适用于沐阳算含量过高的试样。.剩余量滴定法：美洛昔康在甲醇、乙醇及水中极微溶或者几乎不溶，在丙酮中微溶。所以ChP使用定量过量 的氢氧化钠滴定液溶解后，再用盐酸滴定液回滴剩余的氢氧化钠。.水解后剩余滴定法利用阿司匹林酯结构在碱性溶液中易于水解的特性，加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加 热使酯键水解，剩余的氢氧化钠滴定液用硫酸滴定液回滴定.两步滴定法：用于：阿司匹林片/肠溶片的含量测定第一步：NaOH滴定所有的酸（ASA, CA, TA, SA, Hac

34、）消除干扰；第二步：水解后剩余滴定5、非水溶液滴定法：此洛昔康具有叱噬环，显碱性，可在冰醋酸溶液中用高氯酸滴定液滴定。（二）UV直接紫外分光光度法：贝诺酯的测定：原料药（对照品比拟法）；片剂（吸收系数法）CPC-UV 法：（三）HPLC色谱条件:色谱柱38；流动相为乙月青-四氢吠喃-冰醋酸-水（20:5:5:70）；检测波长276nm系统适用性试验:n3000； Aspirin与水杨酸钠的R1. 5第十一章抗生素类药物第一节概述1、抗生素质量特点：化学纯度低、活性组分易变异、产品稳定性差、杂质多2、抗生素的质量标准：a、规定抗生素药物的杂质检查工程和含量测定方法b、规定测定操作步骤, 使操作方

35、法统一，以保证测定结果的可靠性。3、ChP的抗生素分析工程：（一）、鉴别试验一一用化学方法或生物学方法证明是何种抗生素。官能团显色：特殊基团的反响光谱法:UV、IR、NMR特征吸收色谱法：TLC、HPLC 保存行为生物学法：抑菌实验 抗菌能力一限制杂质，保证平安性工程指标影响稳定性的指标:结晶性、酸碱度、水分（干燥失重）.杂质指标:有机杂质：残留溶剂、有关物质；无机杂质：溶液的颜色、澄清度；炽灼残渣、重金属。.临床平安性指标:异常毒性、细菌内毒素、热原、降压物质、无菌（三卜含量测定（或效价测定）测定有效组分的量，保证药物的有效性。1 .微生物学检定法2.化学及物理化学法3.抗生素活性表示法（理

36、论效价法）第二节B-内酰胺类抗生素.分子中均含有小内酰胺环的抗生素。分类：青霉素族 头抱菌素族.都具有游离竣基和酰胺侧链。.手性：青霉素分子：3个手性碳原子（C3、C5、C6）,头抱菌素分子：2个手性碳原子（C6、C7）o酰胺基上R和R1不同，构成不同的青霉素族和头抱菌素族药物。自内酰胺环：易降解，可利用降解产物进行鉴别和含量测定。芳环侧链：具有紫外吸收，可进行鉴别和含量测定定性定量分析羟后酸铁反响区分6 -内酰胺类与其他类抗生素一一B -内酰胺类的特征反响 区别一些青霉素和头抱菌素茸三酮反响具a-氨基的小内酰胺抗生素的反响双缩胭反响具类似肽键（-CONH-）结构的田内酰胺抗生素的反响。使碱性

37、酒石酸铜盐还原 显紫色。阿莫西林、氨苇西林钠旋光性手性碳原子:一、鉴别试验1.B-内酰胺类抗生素：包括青霉素（母核为6-氨基青霉烷酸，含有三个手性碳原子）和头抱菌素（母核为7- 氨基头抱菌烷酸，含有两个手性碳原子）。1）性质：A酸性:pKa在2.5-2. 8之间。B旋光性。C溶解度：青霉素的碱金属水溶液遇酸成为白色沉淀其余 的碱金属盐易溶于水，有机碱盐难溶于水，易溶于甲醇等有机溶剂。D紫外：青霉素族分子中母核局部无共扼 体系，但侧链酰胺基上取代基有苯环等共朝体系。EB-内酰胺环的不稳定性：四元环张力大，酰胺键易水解。 干燥条件下较为稳定，室温条件下密封保存可储存3年以上，但水溶液不稳定，随PH

38、和温度而有很大变化。 2）鉴别实验：A色谱法。B光谱法。C呈色反响：a羟肪酸铁反响：青霉素及头泡菌素在碱性中与羟胺作用，内酰胺环破裂生成羟肪酸，在稀酸中与高铁离子呈色。b类似肽键反响：取代基有Q-氨基酸结构，可显双 缩腺和芾三酮反响。3）含量测定：A高效液相色谱法（外标法）；B生物样品中B-内酰胺类抗生素的分析；2.氨基糖昔类抗生素：链霉素、庆大霉素1）结构：链霉素：一分子链霉胭与一分子链霉双糖胺（链霉糖+N-甲基-L-葡萄糖胺）。巴龙霉素：巴龙胺+巴 龙二糖胺。庆大霉素：绛红糖胺+脱氧链霉胺+加洛糖胺2）鉴别试验：A、苛三酮反响：ChP用于硫酸核糖霉素、硫酸庆大霉素、硫酸小诺霉素的鉴别，具有

39、羟基胺类和a-氨基酸性 质，与带三酮缩合成蓝紫色化合物。B. Molisch试验：具有五碳糖或六碳糖结构的氨基糖昔类经酸水解，在盐酸作用下脱水生成糠醛或羟甲基糠 醛，遇到a-蔡酚或；t酮显色。C、N-甲基葡萄糖胺反响（Elson-Morgan反响）：如链霉素中的N-甲基葡萄糖胺，硫酸新霉素、硫酸巴龙霉素 中的D-葡萄糖胺，在碱性溶液中与乙酰丙酮缩合成叱咯衍生物，与对二甲氨基苯甲醛的酸性醇溶液反响，生 成樱桃红色缩合物。D、麦芽酚（Maltol）反响：链霉素的特征反响，在碱性溶液中，链霉糖经分子重排使环扩大形成六元环，然 后消除N-甲基葡萄糖胺，在消除；链霉服生成麦芽酚，麦芽酚与高铁离子在微酸性

40、溶液中形成紫红色配位化 合物。E、坂口 （Sakaguchi）反响：为链霉素水解产物链霉服的特有反响，本品水溶液加氢氧化钠试液，水解生成链 霉胭，和8-羟基喳琳（或a-蔡酚）分别同次澳酸钠反响，其各自产物再相互作用生成橙红色化合物。F、硫酸盐的反响 G、色谱法：薄层色谱、高效液相色谱法 H、光谱法：红外、紫外3）特殊杂质的检查：A、链霉素杂质为链霉素B （甘露糖链霉素），杂质来源于中间体，采用薄层色谱法测定。B、庆大霉素的组分测定（HPLC法）：ChP采用蒸发光散射检测器测定。4）含量测定：微生物检定法、高效液相色谱法第十二章.片剂的检查A常规检查法：a重量差异，指按规定称量方法测得片剂每片的

41、重量与平均片重之间的差异程度。b崩解时限：固体制剂在规定介质中，以规定的方法进行检查崩解溶散并通过筛网所需时间的限度。B含量均匀度检查：指小剂量或单剂量的固体制剂、半固体制剂和非均相液体制剂等每片（个）含量符合标示 量的程度。C溶出度的检查：药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。D释放度检查：第一法用于缓释和控释制剂的测定；第二法用于肠溶制剂；第三发用于透皮贴剂。.注射剂的检查：注射液的装量检查、注射用无菌粉末的装量差异检查、澄明度检查、热原或细菌内毒素检查、 无菌检查、不溶性微粒的检查。.药物制剂中常见附加剂的干扰与排除片剂中常见赋形剂的干扰与排除：A、糖类：赋形剂中含有

42、淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等，他们水解后均生成葡萄糖具有还原性，干扰氧化还原滴 定。所以氧化还原测定药物时，在选择含糖类附加剂片剂的含量测定方法时，应防止使用氧化性强的滴定剂, 同时应用阴性对照品做试验，假设阴性对照品要消耗滴定剂，说明附加剂对测定有干扰。B、硬脂酸镁：是片剂常用的润滑剂，是以硬脂酸镁和棕桐酸镁为主要成分的混合物，一方面可以镁离子可干 扰配位滴定法，使测定结果偏高（可以选用合适的指示剂或掩蔽剂排除干扰），另一方面硬脂酸根离子可干扰 非水滴定法，消耗高氯酸，使结果偏高（排除方法有提取别离法、碱化后提取别离法、加入无水草酸的醋酎溶 液法、水蒸气蒸出后滴定法）。注射剂中常见赋形剂的干扰与

43、排除A、抗氧剂：常见抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、维生素；干扰氧化还原法，维 生素C干扰紫外分光光度法；排除方法有加入掩蔽剂法（加丙酮、加甲醛）、加酸分解法、加弱氧化剂氧化法、 利用主药和抗氧剂紫外吸收光谱差异进行测定。B、溶剂油：注射用植物油（麻油、茶油、核桃油），排除方法有有机溶剂稀释法、萃取法、柱色谱法。2、药品标准的内涵包括：真伪鉴别、纯度检查、品质要求；决定了药物的平安性、有效性、质量可控性。第三节药品质量研究的内容(五)性状 记载药品的外观、质地、断面、臭、味、溶解度以及物理常数等，在一定程度上反映药品的质量特性。(1)外观是对药品的色泽、外表感官的描述。(

44、2)溶解度是药品的一种物理性质。药品的近似溶解度以以下名词术语表示:极易溶解 系指溶质lg(ml)能在溶剂不到1ml中溶解；易溶 系指溶质lg(ml)能在溶剂1不到10ml中溶解；溶解 系指溶质lg(ml)能在溶剂10不到30nli中溶解；略溶 系指溶质lg(ml)能在溶剂30不到100ml中溶解；微溶 系指溶质lg(ml)能在溶剂100、不到1000ml中溶解；极微溶解 系指溶质lg(ml)能在溶剂1000不到10 000ml中溶解。几乎不溶或不溶系指溶质lg(ml)在溶剂10 000ml中不能完全溶解。溶解度试验法：除另有规定外，称取研成细粉的供试品或量取液体供试品，置于25七2七一定容量

45、的溶 剂中，每隔5分钟强力振摇30秒钟；观察30分钟内的溶解情况，如无目视可见的溶质颗粒或液滴时，即视为 完全溶解。(3)物理常数包括相对密度、馄程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、吸收系数、碘值、皂化值和酸值等； 其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也可反映药品的纯度，是评价药品质量的主要指标之一。(六)鉴别：一般鉴别、专属鉴别实验(七)检查：对药物的平安性、有效性、均一性与纯度等方面进行试验分析。(十二)检验方法和限度原料药的含量：未规定上限时，不超过101. 0%制剂的含量限度范围一般时95. 0%-105. 0%(十三)标准物质标准品与对照品均由国务院药品监督管理部门指定的单位制备、标

46、定和供应。标准品指用于生物检定、抗生素 或生化药品中含量或效价测定的标准物质，按效价单位计，以国际标准品进行标定；对照品除另有规定外,均 按干燥品进行计算。指采用理化方法进行鉴别、检查、含量测定和校正仪器性能时所用标准物质，按纯度计。(十四)计量1、滴定液和试液的浓度，以mol/L (摩尔/升)表示者，其浓度要求需精密标定的滴定液用“XXX滴定液 (YYYmol/L)”表示；作其他用途不需精密标定其浓度时用“YYYmol/L XXX溶液”表示，以示区别。2、温度：水浴温度除另有规定外，均指98100； 0室温(常温)系指1030；回 放冷 系指放冷至室温3、符号“表示百分比，系指重量的比例；但

47、溶液的百分比，除另有规定外，系指溶液100ml中含有溶质假设 干克；乙醇的百分比，系指在2CTC时容量的比例。此外，根据需要可采用以下符号:回（g/g）表示溶液100g中含有溶质假设干克;团% （ml/ml ）表示溶液100ml中含有溶质假设干毫升;0 % （ml/g） 表示溶液100g中含有溶质假设干毫升;0 % （g/ml） 表示溶液100ml中含有溶质假设干克。ppm表示百万分比，系指重量或体积的比例。ppb”表示十亿分比，系指重量或体积的比例。溶液后记示的“（1-10）”等符号，系指固体溶质L 0g或液体溶质L 0ml加溶剂使成10nd的溶液；未指 明用何种溶剂时，均系指水溶液；两种或

48、两种以上液体的混合物，名称间用半字线“一”隔开，其后括号内所 示的“：”符号，系指各液体混合时的体积（重量）比例。4、液体的滴，系指在2CTC时，以1.0ml水为20滴进行换算。5、乙醇未指明浓度时，均系指95% （ml/ml）的乙醇。（十五）精确度1、试验中供试品与试药等“称重”或“量取”的量，均以阿拉伯数码表示，其精确度可根据数值的有效数位 来确定，如称取“0.1g”系指称取重量可为0. 060. 14g；称取“2g”，系指称取重量可为1.52. 5g；称取 “2.0g”,系指称取重量可为1.952. 05g；称取“2.00g”,系指称取重量可为L 995为005g。“精密称定”系指称取重

49、量应准确至所取重量的千分之一；“称定”系指称取重量应准确至所取重量的百分之一；“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精确度要求；“量取”系指可用量筒或按照量取体积的有效数位选用量具。取用量为“约”假设干时，系指取用量不得超过规定量的10%。2、恒重，除另有规定外，系指供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在0.3mg以下的重量；干燥至恒重的 第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1小时后进行；炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼30 分钟后进行。3、试验中规定“按干燥品（或无水物，或无溶剂）计算”时，除另有规定外，应取未经干燥（或未去水、或 未去溶剂）的供试品进行试

50、验，并将计算中的取用量按【检查】项下测得的干燥失重（或水分、或溶剂）扣除。 4、试验中的“空白试验”，系指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法操作所得的结果;【含量测定】中的“并将滴定的结果用空白试验校正”，系指按供试品所耗滴定液的量（ml）与空白试验中所 耗滴定液量（ml）之差进行计算。5、试验时的温度，未注明者，系指在室温下进行；温度高低对试验结果有显著影响者，除另有规定外，应以 250c2为准。（十六）试药、试液、指示剂试药西指供各项试验用的试剂，但不包括各种色谱用的吸附剂、载体与填充剂。除生化试剂与指示剂外，一般 常用化学试剂分为基准试剂、优级纯、分析纯与化学纯。试验用水

51、，除另有规定外，均系指纯化水。酸碱度检查所用的水。均系指新沸并放冷至室温的水。第二章药物的鉴别试验药物鉴别试验identification：是根据药物的分子结构、理化性质、采用化学、物理或生物学的方法来判断 药物的真伪。第一节药物鉴别的工程一、性状：放映药物特有的物理性质1、外观：药物的外表感官和色泽。包括药品的聚集状态、晶形、色泽、臭、味等。2、溶解度：在一定程度上反映了药物的纯度、晶形或粒度。3、物理常数：熔点、比旋度、吸收系数二、一般鉴别试验general identification test：是指依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过 化学反响来鉴别药物的真伪。只能证实是某一

52、类药物，而不能证实是哪一种药物。有机氟化物氧瓶燃烧得不，与茜素氟蓝、硝酸亚钾在ph4. 3溶液中形成蓝紫色络合物有机酸盐类水杨酸盐+三氯化铁，中性条件得红配位物，弱酸性时得紫色配位化合物+稀盐酸，析出白色水杨酸沉淀，沉淀在醋酸铁试液中溶解酒石酸盐中性供试品+氨制硝酸银，水浴加热形成银镜芳香伯胺类十稀盐酸/亚硝酸钠/碱性b蔡酚，形成橙黄到猩红色的沉淀托烷生物碱类水解生成食着碱，经发烟硝酸加热处理变成三硝基衍生物，与K0H醇溶液反响形成醍类化合物（紫色）vitali反响无机金属盐镇盐+过量的NaOH溶液加热分解产生氨臭，遇湿润红色石蕊试纸变蓝，能使硝酸亚 汞试液湿润滤纸变黑无机酸根氯化物+稀硝酸+

53、硝酸银，产生白沉，加氨试液溶解，再加稀硝酸，沉淀又生成十等量二氧化镒+硫酸，缓慢产生氯气，能使湿润碘化钾试纸变蓝硫酸盐+氯化领，产生白沉，在盐酸或硝酸中不溶（加盐酸不产生沉淀）+醋酸铅，产生白沉，加醋酸铁/氢氧化钠溶解硝酸盐十等量硫酸，混合冷却后，沿管壁加硫酸亚铁，使成两层液，接界面显棕色+硫酸与铜丝加热产生红棕色蒸汽+高镒酸钾试液，紫色不褪去（与亚硝酸盐区别）三、专属鉴别试验：是证实某一种药物的依据，他是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学的 特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反响，来鉴别药物的真伪。第三节鉴别方法对于化学药物常用鉴别方法：化学法、光谱法、色谱法、生物学法。对于中

54、药材及其提取物和制剂常用：显微鉴别法盒特征图谱或指纹图谱鉴别法。一、化学鉴别法呈色反响酚羟基一三氯化铁；芳伯胺一重氮偶合反响；托烷生物碱一vitali反响；肾皮质激素一 四氮嗖反响；含翔基结构一苯肺反响；氨基酸一芾三酮；氨基醇一双缩版沉淀生成反响 丙二酰腺类的硝酸银反响；氯化物的银盐沉淀；还原性基团（异烟跳）的银镜反响；GCS 生成氧化亚铜红色沉淀；苯甲酸盐类的三氯化铁反响；利多卡因与重金属离子的沉淀； 含氮杂环类的生物碱沉淀剂；磺胺类药物的铜盐反响。荧光反响硫酸奎宁的稀硫酸溶液；氯普塞顿+稀硝酸；VB1的硫色素反响气体生成反响 含胺类、酰月尿类、酰胺类药物+强碱溶液加热，产生氨气含硫类药物+

55、强酸容液加热，产生硫化氢气体含碘有机药物，直火加热，产生紫色碘蒸气含乙酸酯盒乙酰胺类的药物经硫水解后加乙醇可产生乙酸乙酯的香味使试剂褪色Vc的二氯靛酚反响；氧烯洛尔的高镒酸钾反响；司可巴比妥钠的碘试液反响测定生成物的熔点：操作繁琐费时应用少二、光谱鉴别法 UV IR NIR AAS NMR MS XRD三、色谱鉴别法TLC HPLC GC四、显微鉴别法：主要用于中药及其制剂的鉴别五、生物学法：利用药效学和分子生物学等有关技术来鉴定药物品质，主要用于抗生素、生化药物以及中药鉴 别。按鉴定目的和对象不同，分为：免疫、细胞生物学鉴别法、生物效价测定法、纯指标测定法、DNA遗 传标记鉴别法、mRNA差

56、异显示鉴别法。第三章药物的杂质检查第一节药物的杂质与限量L药物的纯度Purities：药物的纯洁程度2.杂质impurities：药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。简言之:任何影响药品纯度的物质。江药物的纯度与试剂的纯度：共同点一一均规定所含杂质的种类和限量。不同点：药物纯度从用药平安、有效和对药物稳定性等方面考虑，只有合格品和不合格品.试剂纯度是从杂质可能引起的化学变化对使用的影响以及试剂的使用范围和使用目的加以规定，它不考虑杂杂质的种类一般杂质和特殊杂质按来源分类工艺杂质、冷解杂质.反响物和试剂中混入的杂质核秦性分类套性杂质和信号杂质按理化性质 有机

57、杂质、无机杂质、或曾 分类流剌杂质的种类一般杂质和特殊杂质按来源分类工艺杂质、冷解杂质.反响物和试剂中混入的杂质核秦性分类套性杂质和信号杂质按理化性质 有机杂质、无机杂质、或曾 分类流剌质对生物体的生理作用及毒副作用化学试剂一一一般分为4个等级（基准试剂、优级纯或特种试剂（光谱纯、色谱纯、农药残留检测级）、分析纯和化学纯）生 杂质的来源与种类：p98生产过程中或贮存过程中引入5.杂质的种类一般杂质：自然界分布广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容 易引入的杂质，它们含量的高低与生产工艺水平密切相关。所以 也常称为信号杂质。包括：氯化物、硫酸盐、重金属、种盐、酸碱度等（收载于附录中）特殊杂质：是指

58、在特定的药物生产和贮藏过程中引入的杂质，也称有关物质。这类杂质随药物不同那么不同。口杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量,通常用百分之几或百万分之几来表示。P100杂质限量的计算：嬴二率心嬴控制方法：限量检查法（对照法、灵敏度法、比拟法）；定量测定法对照法：取一定量的被检测杂质标准液和一定量供试品溶液，在相同条件下处理，比拟反响结果，以确定 杂质含量是否超过限量。该法应该注意平行原那么，即供试溶液和对照溶液应在完全相同的条件下反响。如 加入的试剂、反响的温度、放置的时间均应相等，这样的结果才有可比性。灵敏度法：在供试品溶液中加入一定量试剂，在一定条件下反响，不得有正反响出现。比拟法：取供试品一定量依法检查，测定特定的杂质参数，与规定的限量相比，不得更大。第二节杂质的检查方法一、杂质的研究规范.药物杂质检查的主要依据：药物于杂质在物理性质或化学性质上的差异。.一般杂质收载于附录中；特殊杂质收载于正文中