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文档简介
1、基因分子生物学实验一一的染色原理溴化乙锭(,)为芳香族荧光化合物,是一种高度灵敏的嵌入性荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸。是一种核酸染料,常在琼脂糖凝胶电泳中用于核酸染色;是一种强的诱变剂,可能也是一种致癌物或致畸剂。与核酸的作用原理:这种扁平分子可以嵌入核酸双链的配对的碱基之间,在紫外线激发下,未与核酸结合的溴化乙锭可被激发出橙红色萤光。在与或双股结合时,萤光强度会增强倍,使得核酸电泳后的胶片可以辨识核酸的相对位置。在核酸分子中,分子插入到两层碱基对之间,发出红色荧光。在凝胶中加入终浓度为|J的,可以在电泳过程中随时观察核酸的迁移情况,这种方法使用于一般性的核酸检测。问题讨
2、论i溴化乙锭在琼脂糖凝胶电泳中先加与后加的区别?先加,染色与电泳同时进行:加在胶里总体积小,所以比较方便节省;会导致胶的整体背景稍微高些,比较暗;长时间、长距离的电泳先加的话,信号强度会相应下降;不宜用于核酸分子大小的确定和定量。原因分析:带正电荷,中和核酸分子的负电荷,同时由于的他的嵌入增加了核酸分子的刚性,使迁移速率减慢,故不宜用于凝胶电泳测定核酸分子的大小。另外,由于在凝胶中,游离的分子向负极泳动,会使样品中前后各带染色不均匀,影响定量。后加,染色在电泳完成后:.可以减少污染,无背景色,图较漂亮;相对浪费时间。2废物的如何处理?废物的处理如下:对于含量大于的溶液,可如下处理:将溶液用水稀释至浓度低于;加入一倍体积的,混匀,再加入等量的,混匀,置室温数小时;加入一倍体积的/混匀并废弃。含量小于的溶液可如下处理:按的量加入活性炭,不时轻摇混匀,室温放置用滤纸过滤并将活性
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