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文档简介
1、第35讲 微生物的培养与应用考点二 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数固必备知识提关键能力固必备知识一、统计菌落数目的方法1.显微镜直接计数法(1)原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。(2)方法:血细胞计数板法。(3)缺点:不能区分死菌与活菌。2.间接计数法(活菌计数法)(1) 原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的_,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少_。一个活菌活菌(2)计数规则:实验时,每一浓度至少涂布3个平板,以增强实验的说服力和准确性。选择菌落数在30300的平板进行活菌计数。二、土
2、壤中分解尿素的细菌的分离与计数项目内容实验原理(1)能合成_的细菌才能分解尿素(2)配制以_为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌数量统计(1)_法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板)(2)_实验流程土壤取样配制土壤溶液和制备培养基系列稀释涂布平板与培养菌落计数鉴定方法在培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变红, 升高,说明该细菌能分解尿素脲酶尿素显微镜直接计数稀释涂布平板法1.统计菌落数目一般用_法。2.统计菌落数目时,培养基表面生长的1个菌落,来源于样品稀释液中的1个活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在_的平板进行计数。3.从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计
3、算公式:每克样品中的菌落数=_。稀释涂布平板303004.设置重复组,增强实验的说服力与准确性。 1.利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是恰当的稀释度。 2.微生物的计数要求制作多个平板,且每个平板上能长出30300个菌落。 3.分离尿素分解菌运用了选择培养基,在所用的培养基中,尿素是唯一的氮源。 4.设置空白对照组的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。白僵菌高孢粉是一种高效的生物杀虫剂,应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子附着在寄主表皮、气孔或消化道上,遇适宜条件开始萌发,生出芽管。同时它会产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮,通
4、过芽管入侵虫体,在虫体内生长繁殖,消耗寄主体内养分,产生各种毒素,形成大量菌丝和孢子,布满虫体全身。请回答下列问题:(1) 从自然菌样中筛选较理想的生产用菌种的一般步骤是:采集菌样富集培养_性能测定。白僵菌的菌样应从_处采集。(2) 按功能分,分离白僵菌菌种的培养基属于_培养基。在配制白僵菌培养基时加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分,蔗糖属于_(营养物质)。(3) 白僵菌纯化培养常用的接种方法是_和_。(4) 分离与培养过程中,培养基和接种工具都要进行_处理,利用高温可以使微生物的_等物质发生变性。纯种分离感病昆虫选择碳源平板划线法稀释涂布平板法灭菌蛋白质和核酸解析 选择培养基用于选择分离菌种。蔗
5、糖属于微生物的碳源。微生物分离培养过程中,培养基、接种工具都要进行灭菌处理,其原理是高温使蛋白质、核酸变性,导致细胞失去活性。提关键能力考向 微生物的分离和计数 (2021聊城模拟)对某品牌的一次性口罩中的微生物进行检测,通过分析微生物的种类和数量来确定口罩的合格性。回答下列问题:固体4200不符合特殊营养物质不能区分死菌与活菌伊红美蓝解析 从功能上分析,由于培养基上加有伊红美蓝,可以鉴别出大肠杆菌的有无,所以属于鉴别培养基。其中需要进行灭菌处理的包括滤杯、滤膜和滤瓶,与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行,以防止杂菌的污染。鉴别滤杯、滤膜、滤瓶接种(4) 将大肠杆菌进行扩大培养时,用摇床振荡培养的目的是_。增大培养液中的溶氧量,使大肠杆菌与营养物质充分接触解析 用摇床振荡培养,可达到供应微生物所需氧气,同时使营养物质与大肠杆菌充分接触的目的,使大肠杆菌的繁殖速度加快。(5) 不同微生物培养的温度和时间往往不同,在培养箱中培养时,细菌培养温度_(填“高于”、“低于”或“等于”)霉菌培养温度,培养时间则_(填“长
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