生物科技行业病原微生物试验室生物安全

1、培训教材实验室生物安全相关法律法规和标准沅江市疾控中心沈吟二零年三月十八日病原微生物实验室生物安全相关法律法规和标准实验室生物安全防护的发展二十世纪五十年代，美国在开展生物武器、化学武器的实验室研究中，为了防止生物因 子（病原微生物）和化学毒剂泄漏逃逸到实验室外环境，研制了一系列的防护装备和设备，如 高效粒子空气过滤器、生物安全柜等；建设了 BSL 3实验室和BSL 4实验室等。 实验室生物安全防护的发展 实验室生物安全法律法规和标准的发展 实验室获得性感染的调查 美国实验室生物安全专家 Sulkin and Pike调查了 5000多个实验室，发现： 累计实验室相关感染 3921例； 病原微

2、生物实验室获得性感染的病原微生物有： 肝炎、布氏菌病、肺结核、野兔热（士拉弗氏菌卜斑疹伤寒、委内瑞拉马月西炎 （Venzuelan Equine Encephalitis） 实验室获得性感染原因 在3921例实验室感染中，对导致感染的原因分析发现： 低于20%的实验室获得性感染与已知的事故有关； 80%与实验室工作人员暴露与感染性气溶胶有关。 80%是不明原因的感染。20%感染的原因是明确的。其中80%是由工作人员操作失误引起的；20%是由设备故障引起的。实验室获得性感染原因在3921例实验室感染中，对导致感染的原因分析发现：导致感染最多的4种实验室事故溢出和泼洒；针头和注射器；锐器、碎玻璃；

3、动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤。案例一新加坡实验室人员感染 SARS（2003年） 案例二国内实验室人员感染 SARS（2004年）早在1979年，美国实验室生物安全专家Pike在他的一篇评论中指出：生物安全知识、防护技术和设备对防止大多数实验室感染的发生是非常有用的”。病原微生物危害和生物安全定义为了避免微生物和医学实验室中有害或有潜在危害的生物因子对人、环境和社会造成的危害或潜在危害，而采取的防护措施（硬件）和管理措施（软件），达到对人、环境和社会的安全防护目的。 什么是实验室生物安全？ 当标准实验室操作或操作程序不能有效控制生物因子可能带来的相关危害时，必须采取其他的措施来弥补。 必要

4、的措施实验室设施(工程特点);安全设备和管理措施等硬件和软件病原微生物实验室生物安全相关法规和指南世界卫生组织(WHO)早就认识到生物安全是一个重要的国际性问题，在1988年就出版了实验室生物安全手册(Laboratory Biosafety Manual )第1版。该手册鼓励各国接受和执行生物安全的基本概念，并鼓励针对本国实验室如何安全处理致病微生物制订操作规 范。1993年第2版，2004年第3版。在2004年的第3版中，阐述新千年所面临的生物安全和生物安全保障问题。在下列几 个方面增加了新的内容：危险度评估、重组 DNA技术的安全利用以及感染性物质运输。世 界上最近发生的事件表明，由于蓄

5、意滥用和排放微生物因子和毒素，公共卫生正受到新的威胁。因此，第3版也介绍了生物安全保障的概念一一保护微生物资源免受盗窃、遗失或转移，以免因微生物资源的不适当使用而危及公共卫生。主要内容有：微生物危险度评估基础实验室一一一级和二级生物安全水平 防护实验室三级生物安全水平 最高防护实验室一一四级生物安全水平 实验动物设施实验室/动物设施试运行指南实验室/动物设施认证指南实验室生物安全保障的概念生物安全柜安全设备实验室技术意外事故应对方案和应急程序消毒和灭菌感染性物质的运输生物安全和重组 DNA技术危害性化学生物安全官员和安全委员会后勤保障人员的安全培训规划1983年第1版:最早提出了把病原微生物和

6、实验室活动分为四级的概念。1993年第3版:着重描述了微生物实验室标准操作、实验室设计和安全设备的不同组合，形成14级的实验室生物安全防护等级，并依据微生物对人的危险程度分为四级。1999 年美国生物安全协会 (American Biological Safety Association, ABSA)、根据近年 发生的一些新情况，如新出现的传染病、生物恐怖活动、BSL-3和BSL-4实验室的设计、病原微生物的国际运输等问题，在第3版的基础上进行了必要的修改和新的补充，出版了微生物和生物医学实验室的生物安全第4版。在生物危害委员会的建议下，加拿大于1990年出版了第一版实验室生物安全指南，并成立

7、了实验室疾病控制中心联合工作组。工作组为那些从事研究或开发目的而进行人类病原体的单位提供相应等级的实验室 设计、建设和在其中工作的人员培训的技术资料，这种技术资料的重点是有关细菌、病毒、 寄生虫、真菌和其他对人类有致病作用的感染性病原体的实验室生物安全防护措施。2004年第三版修订稿正在征求公众和使用单位的意见。2004年第三版的主要内容包括：生物安全（包括危险等级、防护等级、危险评价、 生物安全官员和生物安全委员会）、感染材料的处理、实验室设计和物理防护要求、微生物 大规模生产的操作标准和物理防护要求、实验室动物的生物安全、从事特殊危害工作的生物安全指南的选择、消毒、生物安全的使用、感染性病

8、原体进出口的生物安全等。中华人民共和国传染病防治法在第二十二条中，对与病原微生物有关的疾病预防控制机构、医疗机构的实验室和从事病原微生物实验的单位的生物安全管理作了规定，要求这些单位应有符合国家规定的条件和技术标准，建立严格的监督管理制度，对传染病病原体样本按照规定的措施实行严格监督管理，严防传染病病原体的实验室感染和病原微生物的扩散在第二十六条中，规定了对病原微生物菌（毒）种的管理，要求国家建立传染病菌种、毒种库。对传染病菌种、毒种和传染病检测样本的采集、保藏、携带、运输和使用实行分类管 理，建立健全严格的管理制度。对可能导致甲类传染病传播的以及国务院卫生行政部门规定 的菌种、毒种和传染病检

9、测样本，确需采集、保藏、携带、运输和使用的，须经省级以上人 民政府卫生行政部门批准。具体办法由国务院制定。在第五十三条中，对与生物安全有关卫生监督作了明确规定，包括监督管理者的职责和管理范围。其中，县级以上人民政府卫生行政部门对传染病防治工作监督检查，对疾病预防控制机构和医疗机构的监督检查内容包括与生物安全有关的传染病菌种、毒种和传染病检测样本的采集、保藏、携带、运输、使用等。省级以上人民政府卫生行政部门负责组织对传染 病防治重大事项的处理。在第五十四条中，明确了监督检查的权力。 县级以上人民政府卫生行政部门在履行监督 检查职责时，有权进入被检查单位和传染病疫情发生现场调查取证，查阅或者复制有

10、关的资料和采集样本。被检查单位应当予以配合，不得拒绝、阻挠。医疗废物管理条例第一章总则中明确表述了医疗废物的定义，医疗废物是指医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。另外，明确了国家推行医疗废物集中无害化处置以及各级人民政府卫生行政主管部门和环境保 护行政主管部门在医疗废物过程中的职责。第二章医疗废物管理中一般规定了医疗卫生机构和医疗废物集中处置单位应建立、健全医疗废物管理责任制，防止因医疗废物导致传染病传播和环境污染事故；禁止任何单位和个人转让、买卖医疗废物；禁止邮寄医疗废物、禁止通过铁路、航空运输医疗废物。第三章医疗废物管理中

11、规定了医疗卫生机构应当及时收集本单位产生的医疗废物，并按照类别分置于防渗漏、防锐器穿透的专用包装物 或者密闭的容器内，医疗废物专用包装物、容器，应 当有明显的警示标识和警示说明；医疗卫生机构产生的污水、传染病病人或者疑似传染病病人的排泄物，应当按照国家规定严格消毒，达到国家规定的排放标准后，方可排入污水处理系统。第四章医疗废物的集中处置规定中明确了从事医疗废物集中处置活动的单位，应当向县级以上人民政府环境保护行政主管部 门申请领取经营许可证；医疗废物集中处置单位应当按照环境保护行政主管部门和卫生行政主管部门的规 定，定期对医疗废物处置设施的环境污染防治和卫生学效果进行检测、评价。第五章监督管理

12、规定中明确了卫生行政主管部门、环境保护行政主管部门履行监督检查职责时，有权采取实地检查和调查取证、查阅或者复制医疗废物管理的有关资料、 采集样品、责令违反本条例规定的单位和个 人停止违法行为、查封或者暂扣涉嫌违反本条例规定的场所、 设备、运输工具和物品和对违 反本条例规定的行为进行查处的措施。病原微生物实验室生物安全管理条例第一章总则，对条例的编制目的、 适用对象、实验室和病原微生物的定义、管理者作了规定。明确指出：国家对病原微生物实行分类管理，对实验室实行分级管理； 国家实行统一的实验室安全标准。实验室应当符合国家标准和要求； 实验室的设立单位及其主管部门负责实验室日常活动的管理，承担建立健

13、全安全管 理制度，检查、维护实验设施、设备，控制实验时感染的职责。对病原微生物的采集、运输、保藏也作了明确的规定。采集应当具备以下条件：L具有与采集病原微生物样本所需要的生物安全防护水平相适应的设备；.具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员；.具有有效的防止病原微生物扩散和感染的措施；.具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段。运输：省内运输高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本，应当经省级以上人民政府卫生 主管部门或兽医主管部门批准。跨省运输，由出发地的省、自治州、直辖市人民政府卫生主管部门或兽医主管部门 进行初审后，分别报国务院卫生主管部门或兽医主管部门批准。跨国运输，按照卫生部和国家质

14、检总局关于加强以用特殊物品出入境管理卫生检 疫的通知进行管理。保藏：由国务院卫生主管部门或兽医主管部门指定的菌（毒）种保藏中心或者专业实验室（保藏机 构）、承担集中储存病原微生物菌 （毒）种和样本的任务。第二章病原微生物的分类和管理，对病原微生物的危害程度进行了分类。其中，病原微生物的危害程度的分类为四类第一类危害程度最高，第四类为危害程度最低第一类和第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物”在分类这一点与 WHO、欧盟、美国、加拿大等不一致，应引起注意。第三章实验室的设立与管理，根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，并依照实验室生物安全国家标准的规定，将实验室分为一级、二级、三级、四级。

15、以BSL-1、BSL-2、 BSL-3、BSL-4表示仅从事体外操作的实验室；以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示从事动物活体操作的实验室一级：适用于操作在通常情况下不会引起人类或动物严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物；二级：适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、 动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效的治疗和预防措施的微生物。三级：适用于操作能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物、动物与动物间传播的微生物。四级：适用于操作能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国

16、尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。规定了新建、改建、扩建三级、四级实验室或者生产、进口移动式三级、四级实验室应当遵守下列规定：符合国家生物安全实验室体系规划并依法履行有关审批手续；经国务院科技主管部门审查同意；符合国家生物安全实验室建筑技术规范；依照中华人民共和国环境影响评价法的规定进行环境影响评价并经环境保护主管部门审查批准。三级、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动应当具备下列条件：实验目的和拟从事的实验活动符合国务院卫生主管部门或者兽医主管部门的规定；通过实验室国家认可；具有与拟从事的实验活动相适应的工作人员；工程质量经建筑主管部门依法检测验收、合格。一级、二级实验室不得从事高致病性

17、病原微生物实验活动。第四章实验室感染控制，规定了对实验室活动的管理要求，实验室工作人员的医学 监督，发生实验室泄漏和感染事故时的报告、处置和控制等。第五章监督管理，对监督管理的职责、范围和权力作了规定，明确了县、省和国家各级卫生主管部门、兽医主管部门、环境保护主管部门对病原微生物实验室监督、检查和处理的职责，同时也接受社会合公民的监督。第六章是法律责任，对违反本条例的各种病原微生物实验室生物安全管理的单位和当事人的行为应追究其责任， 造成严重后果的还追究其刑事责任；对各级卫生主管部门、 兽医主管部门、环境保护主管部门的监督管理不到位，应承担相应的责任，并接受相应的处理，造成严 重后果的还追究其

18、刑事责任。实验室生物安全通用要求2008修订版，GB19489-2008 , 2008年12月26日由中华人民共和国国家质量监督检验检 疫总局、中国国家标准化管理委员会发布。2009年7月1日正式实施。本标准代替 GB19489-2004 ,主要变化如下：对标准要素的划分进行了调整，明确区分了技术要素和管理要素；删除了 2004年版的部分术语和定义；修订了 2004年版的部分术语和定义；增加了新的术语和定义；删除了危害程度分级。修订和增加了风险评估和风险控制的要求；修订了对实验室设计原则、设施和设备的部分要求；增加了对实验室设施自动控制系统的要求；增加了对从事无脊椎动物操作实验室设施的要求；增

19、加了对管理的要求；删除了部分与 GB19781-2005医学实验室生物安全要求重复的内容；增加了附录A、附录B和附录Co实验室生物安全通用要求分为七个章节，规定了对不同生物安全防护级别实验室的设施设备和安全管理的基本要求： 推荐性条款标准白第 3.1.10/6.3.1.5/6.3.10.4/6.3.10.5/6.5.1.4/6.5.1.9 条； 其余为强制性条款。实验室设计原则及基本要求见5.15.19章节实验室设施和设备具体要求见6.16.4章节第七章节管理要求中对组织管理、管理责任、个人责任、管理体系文件及文件控制、安全计划及安全检查、 不符合项的识别和控制、纠正措施、预防措施、持续改进、

20、内部审核、管理评审提出了明确 要求，同时对实验室人员、活动及材料实施设备的管理等都提出了具体要求。对管理人员和技术人员的要求：实验室或其母体组织应有明确的法律地位和从事相关活动的资格。管理人员应具备专业教育背景，熟悉国家相关政策、法规、标准，熟悉所负责的工 作，有相关的工作经历或者专业培训，熟悉实验室安全管理工作，定期参加相关的培训或继续教育。实验室技术人员从事相关的实验室活动时应有相应的资格，必须进行上岗培训，培训内容包括：实验室管理体系培训，安全知识及技能培训，实验室设施设备（包括个体防护装备）的安全使用，应急措施与现场救治等；并定期考核和评估。实验室生物安全通用要求资料性附录附录A实验室

21、围护结构严密性检测和排风HEPA过滤器检漏方法指南附录B生物安全实验室良好工作行为指南附录C实验室生物危险物质溢洒处理指南生物安全实验室建筑技术规范卫生部颁布的配套法律法规微生物和生物医学实验室生物安全通用准则可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定（中华人民共和国卫生部令 第45号，自2006年2月1日起施行）。人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法人间传染的病原微生物名录（卫科教发200615号）自2006年1月11日颁布。卫生部颁布的配套法律法规微生物和生物医学实验室生物安全通用准则该通用准则是以美国 CDC/NIH微生物和生物医学实验室的生物

22、安全第四版为蓝本 制定的。基本内容包括：生物安全防护的基本原则、实验室的分类、分级及适用范围、一般 生物安全防护实验室的基本要求、实验脊椎动物生物安全防护实验室、生物危险标志及使用、 新建三级和四级生物安全防护实验室的验收和现有生物安全防护实验室的检测、现有三级和四级生物安全实验室的使用和维护、附录A安全操作规程、附录 B二级生物安全柜的现场检测、附录C各国的微生物与生物安全防护实验室适用级别表等。特别值得一提的是， 在微生物和生物医学实验室生物安全通用准则(WS 233 2002)附录B中，明确要求在颁布实施我国II级生物安全柜有关标准之前，进口的 II级生物安全柜必须符合生产国相应的标准，

23、生产国无相关标准的产品不得进口使用。国产的II级生物安全柜生产厂家必须制定相应的企业标准，其性能指标不得低于国外同类产品的标准。出厂时必须按企业标准对每台生物安全柜进行检测并出具检测报告，使用微生物的生物安全防护检测不得省略。 微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法 (中华人民共和国卫生部令第50号，2006年8月15日发布，自发布之日起实施。微生物和生物医学实验室生物安全通用准则人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法本办法适用于三级、四级生物安全实验室从事于人体健康有关的高致病性病原微生物实 验室活动资格的审批，及其从事高致病性病原微生物或者疑似高致病性病原微生物实验活动 的审批。三级、四级生物安全实验室从事高致病性病原微生物实验活动，必须取得卫生部颁发的高致病性病原微生物实验室资格证书。取得高致病性病原微生物实验室资格证书的三级、四级生物安全实验室，需要从事某种高致病性病原微生物或者疑似高致病性病原微生物实验活动的，应当报省级以上卫生行政部门批准。本办法适用于三级、四级生物安全实验室从事于人体健康有关的高致病性病原微