荧光分光光度计检定装置技术报告

1、计量标准技术报告计量标 准名称荧光分光光度计检定装置计量标准负责人 建标单位名称（公章）填写 日期 TOC o 1-5 h z HYPERLINK l bookmark13 o Current Document 一、建立计量标准的目的(1) HYPERLINK l bookmark17 o Current Document 二、计量标准的工作原理及其组成(1) HYPERLINK l bookmark23 o Current Document 三、计量标准器及主要配套设备(2)四、计量标准的主要技术指标(3)五、环境条件(3)六、计量标准的量值溯源和传递框图(4) HYPERLINK l bo

2、okmark27 o Current Document 七、计量标准的重复性试验(5)八、计量标准的稳定性考核(6) HYPERLINK l bookmark30 o Current Document 九、检定或校准结果的测量不确定度评定(7) HYPERLINK l bookmark41 o Current Document 十、检定或校准结果的验证(9)十一、结论(10)十二、附加说明(10)一、建立计量标准的目的荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器， 其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏 振等许多物理参数,从各个角度反映了分子

3、的成键和结构情况。通过对这些参数的 测定，不但可以做一般的定量分析，而且还可以推断分子在各种环境下的构象变 化，从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围 一般是190-650nm，发射波长扫描范围是200-800nm，可以广泛应用于生命科学、 医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。二、计量标准的工作原理及其组成计量标准由检定荧光分光光度计用硫酸奎宁标准物质、标准紫外可见分光 光度计滤光片等组成。工作原理：荧光分光光度计是根据被测物质受一种波长照射后能发出比照射波长稍长的 光，其光能量与被测物质含量成正比的特性，测量该物质含量的仪器。校准方法是直接测量法，用国家标物

4、中心提供的校准荧光分光光度计用标准 物质对被测荧光分光光度计进行检出极限，稳定性，重复性，荧光池成套性，线 性误差等项目检定。用标准滤光片对被检荧光分光光度计进行滤光片特性，激发 波长特性，发射波长特性及分辨率特性等项目检定。三、计量标准器及主要配套设备计量标准器名称型号测量范围不确定度或准确度等 级或最大允许误差制造厂及出厂编号检定或 校准机构检定周期或复校间隔硫酸奎宁荧光 标准物质GBW (E)130100(0100) %Ure0.5% k=2要配套设备电子秒表JUN50(01d)MPE:0.1s四、计量标准的主要技术指标1、硫酸奎宁标准流液不确定度：U rel=0.5%，k=2五、环境条

5、件序号项 目要 求实际情况结 论1温度(1030)C(20 + 5)oC合格2相对湿度三85%65%合格3电源(220 + 22) V(220+10) V合格45七、计量标准的重复性试验选一台性能可靠、稳定的荧光分光光度计，在短时间内以连续10次测荧光分光光度计标准溶液: 仪器示值（%）:90.090.090.090.090.090.190.190.190.190.1平均值:* =90.05(%)用贝塞尔公式计算标准差:S=.：Z (气 ：)2 =0.05(%) n n 1相对标准偏差：RSD=-n = (0.05/90.05)X 100%=0.055%由不确定度评定可知u =0.61%,RS

6、Du，因此符合要求。九、检定或校准结果的测量不确定度评定荧光分光光度计两个主要技术指标是波长和荧光强度，现分别分析如下：一、荧光强度测量方法：将硫酸奎宁标准溶液放入被检仪器中，直接测量硫酸奎宁标准溶液标准示值。根据JJG 537-2006荧光分光光度计检定规程，对装置本身测量范围内的不确定度进行如下分析。校准方法依据JJG537-2006荧光分光光度计检定规程。进行荧光分光光度计的检定，按规程规定一般采用标准物质作为标准器，检定的环境温度为5C 35C,环境相对湿度不大于85%,被检仪器需能正常工作方可进行检定工作。建立数学模型y kx式中：y -荧光强度k-荧光系数x-样品中被测元素的浓度各

7、分量不确定度的来源3.1硫酸奎宁标准物质3.1.1标准物质的不确定度：硫酸奎宁标准溶液的相对不确定度为0.5%, k=3。*=0.005/3=0.0016=0.16%3.1.2测量相对不确定度根据规程起草人的建议及我们操作的经验，按均匀分布变化属B类。Iu2=0.01/*3 =0.0058=0.58%合成标准不确定度为：uc=(u1 2+u22)1/2=(0.16%2+0.58%2)1/2=0.61%相对扩展不确定度：2U =k*u=2*0.61%=1.22%c二、波长根据JJG 537-2006 荧光分光光度计检定规程，检定荧光分光光度计波长主要用紫外可见分光光度计。现分别分析如下：(一)标

8、准滤光片测量方法：将标准滤光片放入被检仪器中，直接测量标准滤光片示值。根据JJG 537-2006 荧光 分光光度计检定规程，对装置本身测量范围内的不确定度进行如下分析。校准方法依据JJG 537-2006荧光分光光度计检定规程。进行荧光分光光度计的检定，按规程规定一般采用波长标准物质作为标准器，检定的环境温度为 10C30C,环境相对湿度为不大于85%,被检仪器需能正常工作方可进行检定工作。建立数学模型y=x-x0式中：y -荧光强度k -荧光系数X -样品中被测元素的浓度各分量不确定度的来源3.1标准器的不确定度:秋滤光片标准物质的不确定度为0.2nm，按正态分布属B类。u1=0.2/3=0.067(nm)3.2滤光片的光谱曲线随时间变化，但变化不大，可视为0.1nm，按均匀分布变化属B类。u2 = 0.1M = 0.058 (nm)3.3人员读数误差：为0.2nm,为规程起草人的经验数据属B类，均匀分布。% = 0.2/捐=0.115 (nm)以上各分量无关，合成标准不确定度为：uc=V 0.0672 + 0.0582 + 0.1152 = 0.145扩展不确定度:U = k - uc = 2 x 0.145 = 0.29 (nm)十、检定或校准结果的验证采用同等级的两套标准装置分别检定同一台性能可靠