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文档简介
1、临床微生物标本采集送检要求龚瑞娥中南大学湘雅医院1第1页,共35页。临床微生物标本送检意义明确诊断合理选用抗感染药物,提高感染治愈率了解细菌耐药情况及时发现感染及暴发2第2页,共35页。细菌学标本送检基本原则及时采集在抗菌药物使用前采集采样时严格执行无菌操作采样后及时送检送检标本应注明来源和目的3第3页,共35页。及时送检出现感染临床症状体征时在抗菌药物使用前4第4页,共35页。标本采集部位无菌部位的标本更具有临床价值,有菌部位采集的标本需要清除正常菌群和 定植细菌才有意义。应尽量送检无菌部位的标本,尤其是血培养。有菌部位 标本应避免“正常菌群导致标本的污染”。人体很多部位,如下呼吸道 (痰液
2、标 本)、鼻窦、皮肤伤口等处的正常菌群极易污染标本。因此,从这些部位采 集标本,要尽可能降低这些部位正常菌群或定植细菌对标本污染的可能性。 有菌部位的标本不是最理想的微生物标本。5第5页,共35页。申请单填写要求申请单的内容应包括:1)患者信息:姓名、 性别、年龄、患者唯一编码 (如住院号)等;2)申请科室或病区、申请医生; 3)标本信息:标本类型、采集日期及时间、采集部位、采集方法;4)临床 诊断;5)检测目的,尤其是一些特殊检测项目;6)是否已使用抗菌药物。 6第6页,共35页。标本的标签填写要求每份标本上必须贴有标签,无论手工书写、条形码、二维码标签,都应 含有以下信息:1)患者姓名;2
3、)患者唯一编码 (如住院号);3)申请医生; 4)标本采集部位;5)检测目的;6)标本采集的日期和时间。7第7页,共35页。严格无菌操作严格执行无菌操作,避免标本被污染。盛放标本的容器须 经灭菌处理。灭菌宜采用压力蒸汽等物理灭菌方法,不得使用化学消毒剂灭菌。 采集无菌标本时应注意对局部及周围皮肤的消毒。如使用消毒液消毒皮肤, 须作用一定时间,待其干燥后采样。8第8页,共35页。及时运送标本采集后及时送检,尽可能在2小时以内保证必要的运送条件9第9页,共35页。10第10页,共35页。常见临床标本采集与运送要求脓液及创伤标本采集血标本采集痰标本采集尿标本采集其他11第11页,共35页。12开放性
4、病灶采样 烧伤创面、脓肿1、常规检查+革兰染色 先用无菌生理盐水擦拭切口2遍,再用含生理盐水的无菌棉签取切口分泌物放入无菌试管中,塞上试管塞,送检 。 第12页,共35页。13开放性病灶采样 2、细菌培养 用含生理盐水的无菌棉签用力擦拭病灶边缘或脓腔囊壁放入无菌试管中,塞上试管塞,送检。 注意:不能用干棉签取样,一定要用无菌盐水醮湿再取样并及时送检。第13页,共35页。闭锁性脓肿、瘘采样穿刺引流开放性瘘闭锁性瘘14第14页,共35页。结果分析革兰染色阳性WBC细菌培养阳性细菌培养阴性15第15页,共35页。血标本采集采集时机血量室温厌氧培养16第16页,共35页。采血部位与时机通常为肘静脉,切
5、忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。除非怀疑有导管相关的血流感染,否则不应从留置静脉或动脉导管取血,因为导管常伴有定植菌存在。寒战或发热初起时采集,抗菌药物应用之前采集最佳。如果患者已经使用抗菌药物治疗,应在下一次用药之前采血培养。17第17页,共35页。血培养采样量每名患者至少两套血培养最好3套1套是指静脉采血,一套厌氧一套需氧每套至少10ml最好20ml,即每瓶6-10ml采血后2-5天内不需重复采血成人患者不能只采一管血做培养18第18页,共35页。为什么不采集单瓶的血培养有研究表明,对于全自动的血培养仪,分析24小时内采集满3套(每套为1瓶需氧,1瓶厌氧,每套采血量20ml,每瓶10ml)分
6、离率,第一套检出率73.1%,第2套累积检出率为89.7%,第三套累积检出率为98.3%。19第19页,共35页。采血指征时机20第20页,共35页。21中心静脉导管监测采血要求保留导管 拔除导管 从该可疑的CR-BSI患者采集至少2套血培养,其中至少一套来自外周静脉,并做好标记,另一套则从导管中心采集,2个来源的采血时间必须接近(不5分钟)并做好标记从独立的外周静脉无菌采集2套血培养。无菌状态下取出导管并剪下5cm导管尖端或近心断做半定量或定量培养第21页,共35页。22采血检验单填写与报告要求患者基本情况送检目的采血时间与部位足够血量细菌定量阳性及时报告并告知标本采集部位第22页,共35页
7、。采集后送检时间及保存方式血培养应在2h内送至实验室孵育或上机;如不能及时送检,应将血培养瓶置于室温下,切勿冷藏或冷冻。应采用密闭的塑料袋和硬质防漏的容器运送标本。 23第23页,共35页。24血培养检出细菌的判断对于常见皮肤污染菌,如类白喉杆菌(棒状杆菌属)、芽孢杆菌属(除炭疽杆菌外)、丙酸杆菌属、凝固酶阴性葡萄球菌(包括表葡菌)、草绿色链球菌、气球菌属、微球菌属,需要不同时间、采集两次或两次以上的血培养才能确诊。如血液中一次或一次以上培养到金黄色葡萄球菌、肠球菌属、大肠埃希菌、假单胞菌属、克雷伯菌属、假丝酵母菌属等等,即可确诊。第24页,共35页。25血培养检出细菌的判断血培养结果可确诊解
8、释1)导管半定量细菌培养阳性(15CFU/导管尖段5cm)或者定量培养阳性(102CFU/导管段),同时从导管血培养的细菌与外周血培养结果一致(种属和药敏结果);2)从血管导管、外周静脉同时抽血做细菌定量培养,二者细菌浓度比例超过31;3)同时从血管导管内、外周静脉抽血送细菌培养,导管内所取血样培养出现阳性的时间比外周血早2个小时以上。第25页,共35页。尿标本采集 采集指征:采集部位:清洁中段尿、导尿管采集和耻骨上膀胱穿刺采集。采样方法:26第26页,共35页。尿标本采样指征27第27页,共35页。采样方法中段尿:避免污染导尿管:禁止从集尿袋采集;直接穿刺耻骨上膀胱穿刺:28第28页,共35
9、页。结果判断1.尿检白细胞男性5个/高倍视野,女性10个/高倍视野2.清洁中段尿或导尿留取尿液(非留置导尿)培养革兰阳性球菌菌数 104cfu/ml、革兰阴性杆菌菌数105cfu/ml。3耻骨联合上膀胱穿刺留取尿液培养细菌菌数103cfu/ml。4新鲜尿液标本经离心应用相差显微镜检查(1400),在30个视野中有半数视野见到细菌。5无症状性菌尿症:患者虽然无症状,但在近期(通常为1周)有内镜检查或留置导尿史,尿液培养革兰阳性球菌浓度104cfu/ml、革兰阴性杆菌浓度105cfu/ml,应视为泌尿系统感染。29第29页,共35页。呼吸道标本采集痰标本:清晨第一口痰,先用冷开水漱口结核检查痰量要
10、多经纤维支气管镜或人工气道吸引采集的下呼吸道分泌物30第30页,共35页。痰液筛选的标准痰液涂片镜检鳞状上皮细胞25个/ 低倍视野或鳞状上皮细胞:白细胞1:2.5;免疫抑制和粒细胞缺乏患者见到柱状上皮细胞或椎状上皮细胞与白细胞同时存在,白细胞数量可以不严格限定。31第31页,共35页。结果判断经筛选的痰液,连续两次分离到相同病原体。2痰细菌定量培养分离病原菌数106cfu/ml。3血培养或并发胸腔积液者的胸液分离到病原体。4经纤维支气管镜或人工气道吸引采集的下呼吸道分泌物病原菌数 105cfu/ml;经支气管肺泡灌洗(BAL)分离到病原菌数104cfu/ml;或经防污染标本刷(PSB)、防污染支气管肺泡灌洗(P
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