细胞培养在口腔再生医学中的应用课件

1、细胞培养在口腔再生医学中的应用应用细胞生物学和工程学的原理，研究、开发修复和改善损伤组织结构和功能的生物替代物 。组织工程（Tissue Engineering）：J. VacantiR. Langer组织工程基本要素 种子细胞生物支架材料微环境（生长因子等） (Protein data bank)组织工程的基本原理种子细胞体外扩增，与生物材料按一定的比例混合，将细胞-材料复合物植入机体的组织或器官的病损部位，以达到修复创伤和重建功能的目的常用的支架材料是合成的可生物降解的高分子聚合物如：聚乳酸（PLA）、聚乙醇酸（PGA）、聚乳酸和聚乙醇酸复合物（PLGA）等口腔组织特有的干细胞牙髓干细胞牙

2、周膜干细胞脱落乳牙牙髓干细胞根尖牙乳头干细胞唾液腺干细胞 干细胞（stem cell）定义：干细胞是来自胚胎、胎儿或成人的具有持久或终身自我更新能力的细胞，它能产生特异的细胞类型，形成人体组织和器官。（http:/wiki/Stem_cell)牙髓干细胞比骨髓基质干细胞具有更强的增殖率、克隆形成率和倍增率可被诱导分化为脂肪细胞、神经样细胞Stroo-1和CD146等干细胞表面标记阳性体内诱导可形成类似牙本质-牙髓复合体样的结构脱落乳牙牙髓干细胞比骨髓基质干细胞具有更强的增殖率、克隆形成率和倍增率Stroo-1和CD146等干细胞表面标记阳性可诱导分化为神经细胞、脂肪细胞和成牙本质细胞体外可形成

3、钙化结节体内可在免疫缺陷小鼠皮下成骨和产生牙本质样物质牙周膜干细胞Stro-1和MUC18及腱特异性标记SCX表达阳性可被诱导分化为牙髓母细胞、脂肪细胞、纤维母细胞、牙骨质细胞和成骨细胞体外可形成矿化结节，表达碱性磷酸酶或骨唾液蛋白体内试验牙周膜干细胞能产生沿牙周膜结缔组织方向走行的牙骨质样结构再生医学技术在口腔医学中的应用在颌面重建中的作用在引导口腔组织再生中的作用组织工程化黏膜在口腔医学中的应用 人造唾液腺牙再生：组织工程方法-种子细胞+支架材料 发育生物学-模拟牙齿发育的过程口腔生物学其他研究方法基因芯片、蛋白芯片 和组织芯片蛋白质组学生物信息学模式生物学系统生物学基因芯片技术基因芯片技

4、术，又称DNA微阵列技术，是将cDNA文库中已知和未知的全长序列或寡核苷酸序列固定于玻片上，同时检测比较生物样品中多个已知或未知序列的表达状况基本原理与经典的核酸分子杂交方法一致高效地大规模获取相关生物信息基因芯片技术的主要技术流程芯片的设计与制备靶基因的标记芯片杂交与杂交信号检测AAATCGCAAGCTTTAGGAAATTC基因芯片技术存在的问题设备昂贵探针有错误，有杂交背景，降低特异性蛋白芯片技术蛋白芯片是以蛋白质代替DNA作为检测对象，直接在蛋白水平上检测表达模式蛋白芯片技术主要技术流程Chip membraneHybridizationLabeled protein sampleAdd

5、 StreptavidinStreptavidinFluorescent labelingStreptavidin AbFluorescent detect存在的问题固定于载体上的蛋白质结构单一，无法反应蛋白质结构的多样性固定于载体上的蛋白质的稳定性造价比较昂贵影响结果特异性的因素较多组织芯片技术组织芯片技术是基因芯片技术的发展和延伸将大量临床组织标本排列在一张载体进行分析研究最大限度地利用组织资源所需样品少，高通量、多样本的分析工具结果可靠，便于实验对照。(http:/tissue-arrays/口腔Oral_Cavity/OR601)蛋白质组（proteome）定义：蛋白质组是特定的时间和

6、特定的空一个完整的生物体（或细胞）所表达的全体蛋白质的特征。包括蛋白质的表达水平，翻译后的修饰，蛋白质与蛋白质相互作用等，在蛋白质水平上获得对于有关生物体生理、病理等过程的全面认识。蛋白质鉴定（Western杂交）翻译后修饰蛋白质功能确定未磷酸化蛋白磷酸化蛋白蛋白质组学的研究内容Actin蛋白质组学研究方法组成性蛋白质组学研究（compositional proteomics） 采用高通量的蛋白质组研究技术分析尽可能多乃至接近所有的蛋白质比较蛋白质组学研究（comparative proteomics） 发现与重要生命过程或人类重大疾病相关的差异表达蛋白蛋白质组研究中主要应用的技术：双相电泳（2-DE）质谱（MS）技术数据库设置与检索系统等2D gelimage生物信息学（Bioinformatics）生物信息学是对实验生物学资料进行的再加工整理，同时又通过检索等手段对进一步的生物学实验进行理论预测与指导的一门科学模式生物学揭示基因功能的最有效方法之一。是定向改变生物的某个基因从而观察其引起的表型。小鼠、果蝇、线虫是最常见最有效的实行大规模基因操作的模式生物转绿色荧光蛋白基因系统生物学系统生物学（systems biology）是在细胞、组织、器官和生物体整体水平研究结构和功能各异的各种分子及其相互作用，并通过计算生物学来定量