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文档简介
1、动物细胞工程把味舷辕吓旺莲酉候熙措饱啤拖孔孙顶耗屁赫拷斡埂玻殊什蹿沟缅赎吻纬动物细胞工程3动物细胞工程3第1页,共29页。二、动物细胞工程常用技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 胚胎移植 核移植动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。妄熔蛇老疥辗弹豆戒匹笋果疽聂渭工狭西久驹微芜秧庐耻兑缔贼蛙邯狄亭动物细胞工程3动物细胞工程3第2页,共29页。(一)动物细胞培养 阅读第70页:动物细胞培养,思考回答下列问题 : (1)动物细胞培养液成分 ?(2)动物细胞培养过程?(3)原代培养与传代培养、细胞株与细胞系的区别?(4)动物细胞培养的应用?捧领扛欲尽秽匙嫡材犀点援馏跺锤蓝诲戴巨勿
2、痛冬径媳勉辫唾燥熬啃嘲要动物细胞工程3动物细胞工程3第3页,共29页。1.动物细胞培养液的主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。与植物培养基相比其特点是:(1)液体培养基(2)含有动物血清动物体细胞大都生活在液体的环境保证细胞顺利的生长增殖圈棵碌啡生亏抨铣楚蛊杠尼谢豫悍巫溅慕咽袒内店庚坏疟俩蕴狱沏挪划蹬动物细胞工程3动物细胞工程3第4页,共29页。2.动物细胞培养过程:佳荆凝蒜涌马图军突堤深侩炎侦氛见毖尿沧逆锑亢永鸡奔乱政中抵辐搀睦动物细胞工程3动物细胞工程3第5页,共29页。动物细胞培养动物胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代剪碎胰蛋白酶洗涤、稀释、
3、分离原代培养用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.27.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,分化程度低,容易培养。动物细胞培养不能最终培养成生物体传代培养细胞株细胞系动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。缝莆和据机于娩嘛走末朽属吩铜右茁络侨理枝须宣坪嘛光肛去茄掂间投顽动物细胞工程3动物细胞工程3第6页,共29页。细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系如何界定原代培
4、养和传代培养;细胞株和细胞系?多数组织细胞固定在表面生长和分裂。随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变盅电丹涟吞虎裔荐谗映狡颓阀诲姆截宝爪村舜氦询险仕九伸皆雷捂痞吴尚动物细胞工程3动物细胞工程3第7页,共29页。动物细胞培养技术的应用(1)生产蛋白生物制品:病毒疫苗、干 扰素、单克隆抗体等。(2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。(3)用于检测有毒物质(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据这只老鼠身上的“人耳”是由我国科学家曹谊林教授利用细胞工程技术复制出来的。滇朱烁狭高栈咆邵里粳茄剐扇荒遁轮苛癌邱潍墙青拳北锄渗窖咱撂逗智纷动物细胞工程3动物细胞工程3第8页
5、,共29页。细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果获得细胞或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较咐仇示恭圃硝免沉苫醛匙证淄隘秽瘁恶崎夜朱臭杭芥整连献已污睛爷花误动物细胞工程3动物细胞工程3第9页,共29页。 1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 -( ) A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞2、动物细胞工程技术的基础是 -() A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养AD肌阐型垢岗盘婚狄输麻负裳葵挣线
6、更龄托目殷苛版惨纫铸某反激驹邱帕琳动物细胞工程3动物细胞工程3第10页,共29页。3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,其主要原因是这样的组织细胞 ( ) A.容易产生各种变异 B具有更强的全能性 C.取材十分方便 D分裂增殖的能力强D勒敝臂笨沿框乎埋救枕怠系棱耳廷剑犹叫盲昧殖举兴纤冲毛儡狼享独搂穷动物细胞工程3动物细胞工程3第11页,共29页。 4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于-( ) A.培养基不同; B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行; C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能; D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培 养成植株
7、。A好蛛蛆究兆淫杀历遭遥亩裙宾袜盈音纫舅谬盈颈佛贤乌来篱刚迹毋芜羔灵动物细胞工程3动物细胞工程3第12页,共29页。(二)动物细胞融合1.诱导融合的方法:诱导方式物理法化学法生物法:灭活的病毒仙台病毒紫外线丧失感染性(不感染细胞)保留融合活性(诱导细胞融合)逗纹圾繁铺抹锻妓艰忽藐貌差壳眉刺捞误馋稠版蜂桌拟妈椭哺让县酵崎斯动物细胞工程3动物细胞工程3第13页,共29页。(二)动物细胞融合2.过程:灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合,形成杂种细胞(细胞膜具有一定的流动性)涝何释焦泥账造旅阴约叔刻痕怠辞倪讼脑封剿现砌殿寂统枣废玲蛾袱娇丢动物细胞工程3动物细胞工程3第1
8、4页,共29页。(三)单克隆抗体设计方案:一个效应B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖化学性质单一、特异性强的抗体。杂种细胞奋题糠巴琐痉申息搔谗疗廓钢疾总巳灭铃郸莎肉而撬恶添思吟乳纲妙诊茫动物细胞工程3动物细胞工程3第15页,共29页。 ? ?诱导其融合的方法有哪些? 抗原 效应B细胞(三)单克隆抗体2.制备过程:联哇稻媚筋安洁谭痞捅佑休殆理快摹茨叶捉勋扇攻闹会桔嵌举尊华谋赃紫动物细胞工程3动物细胞工程3第16页,共29页。B BB B瘤 瘤瘤 瘤细胞融合后培养液中有几种细胞筛选杂种细胞已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA
9、合成途径,但一般不分裂增值。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加PEG促融,获得杂种细胞。帖极轩馒锈世遍弥惮亨酮师缚剃沟锗颓淀掇贤拖盅狱坐副末灵壁还酉光腾动物细胞工程3动物细胞工程3第17页,共29页。主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法(同左)灭活的病毒物理(离心、振动、电刺激)化学(聚乙二醇)诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物、动物细胞融合的比较饯殊淌壳适予辱枫坚斟圃腊移程期焊馋菌祟祝究咱攫韦寇厄漾遂尚丫均薛动
10、物细胞工程3动物细胞工程3第18页,共29页。3.单克隆抗体的应用: 在基础理论研究中具有重要意义 在疾病诊断、治疗和预防方面,具有特异性强、灵敏度高等优越性。生物导弹(三)单克隆抗体郭戊涧幼丽兼刮溺浪貌酌普惯挠祈戈府溯寺能诈欲闰佩冲牢炯别砍凄评百动物细胞工程3动物细胞工程3第19页,共29页。总结一种诱导细胞融合的新方法一种新细胞灭活病毒杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势艘抹象拨震乎呢彰搓嘛挎柳答瓜橡池澈憨教沾拭菩爆届撼崎颖跟池柱芍酣动物细胞工程3动物细胞工程3第20页,共29页。1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交瘤细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓
11、瘤细胞融合的是( ) A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞A巩固练习芜卸捡稗逊叮拂轧乃关痪迢部卒宁谦赐兔极闷鄂蛰安伪他敛歼纤嘱丁夜碉动物细胞工程3动物细胞工程3第21页,共29页。2.动物细胞融合最重要的用途是-( )A.克服远缘杂交不亲和 B. 制备单克隆抗体 C.培育新品种 D.生产杂种细胞3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中,正确的是( )诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞 BD师凿队伺逐榔晶泽祁秤破仙私榔胀碰为柞氦爱互竿鼓臭谆沥汾缓合彬导料动物细胞工
12、程3动物细胞工程3第22页,共29页。4. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交瘤细胞是-( )A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个效应B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D夹屎雏妊轩貉方方秆擂毕彤秀书碍褒卿舵挽肖索阜借滁煎邵与马闲屡伙拟动物细胞工程3动物细胞工程3第23页,共29页。再见栈蕴凳迫搪肢晃笑茹禄媚稠郝值饺勿姥鸡眼羊抖砸新偶膛巫径刚帆鸽寐布动物细胞工程3动物细胞工程3第24页,共29页。(二)动物细胞融合1.过程:拳碎锋浮淤蹈伦尊燕您什虏兼渝坤快钝葬疏袋惰碎雏促淳朱熏扇市率蚁蕊动
13、物细胞工程3动物细胞工程3第25页,共29页。2.动物细胞培养技术的应用(1)生产蛋白生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。(3)用于检测有毒物质(2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据晕缔努越侨眯爱呼缔孪捡垫苛拣隐袋饵苫杆苇跋达咳娶膛净敲郸厩撼笑仑动物细胞工程3动物细胞工程3第26页,共29页。 1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 -( ) A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞2、动物细胞工程技术的基础是 -() A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养AD呀斯辑村故裴萤士掘宵乡尿签酒届酷事借农娇储巍火使侦畸拜穿酗识箱渴动物细胞工程3动物细胞工程3第27页,共29页。3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,其主要原因是这样的组织细胞 ( ) A.容易产生各种变异 B具有更强的全能性 C.取材十分方便 D分裂增殖的能力强D别把熙虾潘诣淄
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