培养基配方-推荐

1、培养基配方1营养肉汤成分：蛋白胨10g,牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水lOOOmL,pH7.4。制法：按上述成分混合，溶解后校正pH,121X高压灭菌15min。营养琼脂培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH,加入琼脂，分装于烧瓶内，121C,15min高压灭菌备用。MRS培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO42g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄糖20g,吐温801mL,MgSO4.7H2O0.58g,MnSO44H2O0.25g,（琼脂1520g），蒸馏水100

2、0mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调dH至6.26.4,分装于三角瓶中，121C,灭菌15min。脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。制法：将适量的牛奶加热煮沸2030min,过夜冷却，脂肪即可上浮。除去上层乳脂即得脱脂乳。将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108C条件下蒸汽灭菌1015min,即得脱脂乳培养基。培养基A成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g，琼脂15.0g,水1000mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调dH至7.07.2，分装于三角瓶中，121C，灭菌15min。PTYG培养基成分：胰

3、胨Tryptone（Oxoid）5g,大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温8001mL,琼脂1520g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调dH至6.87.0,分装于三角瓶中，115C灭菌30mino盐溶液制备：无水氯化钙0.2g,K2HPO41.0g,KH2PO41.0g,MgSO4。7H2O0.48g,NaCO310g,NaCL2g,蒸馏水1000mL,溶解后备用。豆芽汁液体培养基成分：豆芽汁10mL,磷酸氢二铵1g,KCL0.2g,MgSO4.7H2O0.2g琼脂20g。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加

4、热使完全溶解，调dH至6.26.4,分装于三角瓶中,0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黄色5.26.8紫色）作为指示剂，115C灭菌20min豆芽汁制备：将黄豆芽或绿豆芽200g洗净，在1000mL中煮沸30min,纱布过滤得豆芽汁、补足水分至1000mL。麦芽汁琼脂培养基成分：优质大麦或小麦，蒸馏水，碘液。制法：取优质大麦或小麦若干，浸泡612h,置于深约2cm的木盘上摊平，上盖纱布，每日早、中、晚各淋水一次，麦根伸长至麦粒两倍时，停止发芽晾干或烘干。称取300g麦芽磨碎，加1000mL水，38C保温2h，再升温至45C,30min,再提高到50C,30min,再升至60C，糖化11.5h。取糖

5、化液少许，加碘液12滴，如不为蓝色，说明糖化完毕，用文火煮半小时，四层纱布过滤。如滤液不清，可用一个鸡蛋清加水约20mL调匀，打至起沫，倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤，即可得澄清麦芽汁。用波美计检测糖化液浓度，加水稀释至10倍，调pH56，用于酵母菌培养；稀释至56倍，调pH7.2，可用于培养细菌，121C灭菌20min。查（察）氏培养基成分：NaNO32g，K2HPO41g，MgSO4.7H2O0.5gKCL0.5g，FeSO4.7H2O0.01g,蔗糖30g，琼脂1520g，蒸馏水1000mL，pH值自然。制法：加热溶解，分装后121C灭菌20min。马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）成分：马铃

6、薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂20g，水1000mL。制法：pH值自然。将马铃薯去皮、洗净、切成小块，称取200g加入1000mL蒸馏水，煮沸20min，用纱布过滤，滤液补足水至1000mL，再加入糖和琼脂，溶化后分装，121C灭菌20min。另外，用少量乙醇溶解0.1g氯霉素，加入1000mL培养基中，分装火菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数、分离。PY基础培养基成分：蛋白胨0.5g，酵母提取物1.0g，胰酶解酪胨（Trypticase）0.5g,盐溶液II4.0mL，蒸馏水1000mL。盐溶液II成分：CaCL20.2g，MgSO4.7H2O0.48g，K2HPO41.0g

7、，KH2PO41.0g，NaHCO310.0g，NaCL2.0g，蒸馏水1000mL。制法：加热溶解，分装后121C灭菌20min。甘露醇琼脂培养基（MSA）成分：牛肉浸膏1g，月示胨NO.3（Difco）10g，D-甘露醇10g，NaCL75g，琼脂约13g，酚红0.025g，水1000mL，pH7.27.6制法：按量将各成分（酚红除外）混合，加热使完全溶解，调pH至7.40.2。口1%的酚红溶液2.5mL，混匀。121C高压灭菌15min高氏一号（淀粉琼脂）培养基（主用于放线菌、霉菌培养）可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCL0.5g，K2HPO40.5g，MgSO4.7H2O0.5g,

8、FeSO4.7H2O0.01g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，121C灭菌20min。淀粉铵盐培养基（主要用于霉菌、放线菌培养）可溶性淀粉10g，（NH4）2SO42gK2HPO4lgMgSO4.H2OlgNaCL1g,CaCO33g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，121C灭菌20min。若加入1520g琼脂即成固体培养基。麦氏培养基（醋酸钠琼脂培养基）葡萄糖1.0g，KCL1.8g，酵母汁2.5g，醋酸钠8.2g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，pH自然，0.7kg/cm2灭菌30min。高盐察氏培养基（用于霉菌和酵母菌计数、分离用）硝酸钠2g，磷酸二氢钾1g,硫

9、酸镁（MgSO47H2O）0.5g,氯化钾0.5g,硫酸亚铁O.OIg，氯化钠60g，蔗糖30g，琼脂20g,蒸馏水1000mL,115C灭菌30min。注：分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯葡萄糖-琼脂培养基和/或孟加拉红培养基。分离粮食中的霉菌可用高盐察氏培养基。17糖、醇类发酵基础培养基（1）一般细菌常以休和利夫森二氏培养基蛋白胨5g,NaCL5g,K2HPO40.2g,糖醇（葡萄糖或其它糖、醇）10g,琼脂56g,1%溴甲酚紫（溴百里香草酚蓝）3mL,蒸馏水1000mL,pH7.07.2,分装试管，培养基高度约4.5cm,115C灭菌20min。（2）芽孢菌培养基（NH4）2HP

10、O41.0g,KCL0.2g,MgSO4.7H2O0.2g，酵母膏0.2g，琼脂56g，糖或醇类10.0g，蒸馏水1000mL,溴甲酚紫（0.04%）15mL,pH7.07.2，分装试管，培养基高度约45cm,112C灭菌30min。（3）乳酸菌培养基蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母膏5g，吐温80（Tween80）0.5mL，糖或醇10g,琼脂56g,蒸馏水（自来水）1000mL，加入1.6%溴甲酚紫溶液约1.4mL。以上调pH6.87.0,分装试管，112C灭菌30min。硝酸盐培养基（硝酸盐还原试验用）蛋白胨5.0g,KNO30.2g,蒸馏水1000mL,pH7.4,每管分装45mL,121

11、C灭菌1520min。吲哚实验培养基：1%胰蛋白胨，调pH7.27.6，分装1/31/4试管，115C灭菌30min。硫化氢试验（纸条法）培养基蛋白胨10g,NaCL5g,牛肉膏10g,半胱氨酸0.5g,蒸馏水1000mL,pH7.07.4,分装试管，每管液层高度45cm,112C灭菌2030min。另外将普通滤纸剪成0.51cm宽的纸条，长度根据试管与培养基高度而定。用5%10%的醋酸铅将纸条浸透，然后用烘箱烘干，放于培养皿中灭菌备用。尿素培养基（尿酶试验）成分：蛋白胨1.0g,葡萄糖1.0g,NaCL5.0g,KH2PO42.0g,0.4%酚红3.0mL,琼脂20.0g,20%尿素100.

12、0mL,pH7.17.4。制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH值，加入琼脂，加热熔化并分装于三角瓶，121C灭菌15min,冷却至5055C,加入过滤除菌的尿素溶液，分装于灭菌试管内，摆成琼脂斜面备用。氮源利用基础培养基KH2PO41.36g,NaH2PO42.13g,MgSO47H2O0.2g,FeSO4.7H2O0.2g,CaCL20.5g,葡萄糖10.0g，蒸馏水1000mL。将需要测定的氨基酸、氨态氮（如磷酸氢二氨）、硝态氮（如硝酸钾）加入到上述基础培养基中，使其终浓度为0.050.1%,如测定菌不能利用葡萄糖为碳源，可用其它碳源代替（终浓度为0.20.5%）,另做一份不加氮

13、源的空白对照，调pH7.07.2,分装于试管，每管45mL,112C灭菌2030min,制备出的培养基要求无沉淀。甲基红培养基（M.R及V-P试验用）蛋白胨7.0g,葡萄糖5.0g,K2HPO4（或NaCL）5g,水1000mL,pH7.07.2，每管分装45mL,115C灭菌30min。动力、靛基质、尿素（MIU）综合培养基（用于检验细菌运动性、吲哚、尿素酶用）蛋白胨（含色氨酸）30g,KH2PO42g、NaCL5g、琼脂3g、0.2%酚红酒精溶液2mL、尿素20g、蒸馏水1000mL。分装于小试管，112C灭菌15min,灭菌后液体应呈淡黄色。半固体培养基（用于细菌的动力试验）牛肉膏5.0

14、g，蛋白胨10.0g,琼脂35g，蒸馏水1000mL,pH7.27.4,熔化后分装试管（8mL）121C灭菌15min,取出直立试管待凝固。M17琼脂培养基（分离、培养乳球菌等的选择培养基）植物蛋白胨5g，酵母粉5g，聚蛋白胨5g，抗坏血酸0.5g，牛肉膏2.5g,MgSO47H2O0.01g,-甘油磷酸二钠19g,蒸馏水1000mL,121C灭菌15min。蛋白胨水溶液（靛基质试验用）蛋白胨20.0g,NaCL5.0g，蒸馏水1000mL,pH7.4,121C灭菌15min。精氨酸双水解酶实验培养基成分：蛋白胨1g，氯化钠5g,K2HPO40.3g,L-精氨酸10g，琼脂10g，酚红0.01

15、g，蒸馏水1000mL。制法：除酚红外，将以上各成分溶解，调节pH7.07.2，加入指示剂，分装试管，培养基高约45cm,121C灭菌20min备用。葡萄糖氧化发酵培养基成分：蛋白胨2g,氯化钠5g,1%溴百里酚蓝水溶液3mL，琼脂56g,K2HPO40.2g，葡萄糖1%,蒸馏水1000mL。制法：除溴百里酚蓝外，溶解以上各成分，调节pH值为6.87.0,分装试管，用115C灭菌20min备用。假单胞菌选择培养基（PSA）基础成分：多价胨16g，水解酪蛋白10g,硫酸钾10g，氯化镁1.4g,琼脂11g,甘油10mL，蒸馏水1000mL,pH7.10.2。CFC选择添加物：溴化十六烷基三甲胺1

16、0mg/L,梭链孢酸钠10mg/L,头孢菌素50mg/L。制法：先将基础成分加热煮沸使之完全溶解，121C,15min条件下灭菌。冷却到50C备用。当基础培养基冷却到50C后加入溶解后过滤除菌的CFC补充物，完全混合后倒平板备用。乳糖胆盐发酵培养基成分：蛋白胨20g,猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g，乳糖10g,0.04%溴甲酚紫水溶液25mL,蒸馏水1000mL,pH7.4。制法：将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH,加入指示剂，分装每管10mL,并放入一个小倒管，115C,15min高压灭菌.注：双料乳糖胆盐培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。伊红美兰琼脂培养基成分：蛋白胨20g，乳糖10g，磷酸

17、氢二钾2g,琼脂17g,2%伊红丫溶液20mL,0.65%美兰溶液10mL,蒸馏水1000mL,pH7.1。制法：将蛋白胨、磷酸氢二钾和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH,分装于烧瓶内，高压灭菌121C,15min备用。临用时，加入乳糖，并加热溶化琼脂，冷至5055C,加入伊红和美兰溶液，摇匀，倾注平板。乳糖发酵培养基成分：蛋白胨20g，乳糖10g,0.04%溴甲酚紫水溶液25mL,蒸馏水1000mL,pH7.4。制法：将蛋白胨、乳糖溶于水中，校正pH,加入指示剂，按检验要求分装30mL、10mL或3mL，并放入一个小倒管，115C,15min高压灭菌。胰酪胨大豆肉汤成分：胰酪胨（或胰蛋白胨）17g

18、,植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g,氯化钠100g，磷酸氢二钾2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水1000mL。制法：将上述成分混合，加热并轻轻搅拌溶液，分装后121C15min高压灭菌。最终pH7.30.2。7.5%氯化钠肉汤成分：蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠75g,蒸馏水1000mL,pH7.4。制法：将上述成分加热溶解，校正pH,分装试管，121C15min高压灭菌。豆粉琼脂成分：牛心消化汤1000mL，琼脂20g,黄豆粉浸液50mL,pH7.47.6。制法：将琼脂加在牛心消化汤中，加热溶解，过滤。加入黄豆粉浸液，分装每瓶100mL,121C15min高压灭菌。血琼脂平板成分：豆粉琼脂10

19、0mL,脱纤维羊血（或兔血）510mL。制法：加热融化琼脂，冷至50C,以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血，摇匀，倾注平板。或分装灭菌试管，摆成斜面。aird-Parker氏琼脂平板成分：胰蛋白胨10g，牛肉膏5g,酵母膏1g,丙酮酸钠10g,甘氨酸12g,氯化锂（LiCLH2O）5g,琼脂20g,蒸馏水950mL,pH7.5。增菌剂的配法：3050%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL混合，保存在冰箱内。制法：将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解。冷至25C,矫正pH。分装每瓶95mL,121C高压灭菌15min。临用时，加热融化琼脂，冷至50C,每95mL加入预热至50C的

20、卵黄-亚碲酸钾增菌剂5mL，摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。肉浸液成分：绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g,磷酸氢二钾2g,蒸馏水1000mL,pH7.47.6。制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g,混合后放冰箱24h,除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后矫正pH7.47.6煮沸并过滤，分装烧瓶，121OC,30min高压灭菌。兔血浆成分：柠檬酸钠0.106mol/L.3gNa3C6H5O72H2O溶于1L蒸馏水中）制法：一份加兔血9份混合后离心20

21、00rpm,10min吸取上清液即为兔血浆。肠毒素产毒培养基成分：蛋白胨20g，胰消化酪蛋白200mg，氯化钠5g，磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，硫酸镁0.2g,菸酸0.01g，蒸馏水1000mL,琼脂1012g（固体透析培养用），pH7.27.4。葡萄糖肉浸液肉汤成分：绞碎牛肉500g，氯化钠5g,蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，葡萄糖10g，蒸馏水1000mL,pH7.47.6。制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g,混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、葡萄，氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH,煮沸并

22、过滤、分装，121C30min高压灭菌。牛心浸液成分：绞碎牛心500g,氯化钠5g,蛋白胨10g,磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000mL,pH7.47.6。制法：将绞碎牛心500g,混合后放冰箱24h,除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH,煮沸并过滤、分装，121C,30min高压灭菌。匹克氏肉汤成分：含1%胰蛋白胨的牛心浸液200mL,1：25000结晶紫盐水溶液10mL,1：800三氮化钠溶液10mL,脱纤维兔血（羊血）10mL。制法：将上述已灭菌的各种成分，无菌依次混合，分装于无菌试管内，

23、每管2mL,保存冰箱内备用。胰蛋白胨大豆胨琼脂（TSA）成分：胰蛋白胨15g,大豆胨5g，氯化钠5g，琼脂约13g，蒸馏水1000mL,pH7.17.5。制法：按量将各成分溶解，加热使完全溶解，调dH值，121C,15min灭菌。缓冲蛋白胨水（BP）培养基成分：蛋白胨l0g,NaCL5g,Na2HPO4.12H209g,H2PO41.5g,蒸馏水1000mL,pH7.2o制法：121C灭菌15min,沙门氏菌前增菌使用。氯化镁孔雀绿（MM）增菌液成分：甲液：胰蛋白胨5g,NaCL8g,KH2P041.6g，蒸馏水1000m1乙液：MgCL240g,蒸馏水100mL丙液：0.4%孔雀绿水溶液制法

24、：分别按上述成分配好后，121C灭菌15min备用。临用时取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL以无菌操作混合即成。四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液成分：多胨或胨1g,CaCO310g,Na2S20330g,蒸馏水1000m1。制法：将各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100m1。分装时应随时振荡，使其中的CaCO3混匀。121C灭菌15min备用。临用时每100m1培养基中加入碘溶液2m1、0.1%煌绿1m1。亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液成分：蛋白胨5g,乳糖4g,亚硒酸氢钠4g,Na2HPO45.5g,KH2PO44.5g,L胱氨酸0.01g，蒸馏水1000m1,pH7.0。制法：将

25、除亚硒酸氢钠和胱氨酸以外的各种成分溶解于900mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却，以无菌操作与上液混合。再加入1%L-胱氨酸一氢氧化钠溶液1m1。分装于灭菌瓶中，每瓶00mL。亚硫酸铋琼脂(BS)培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏5g，葡萄糖5g,FeSO40.3g,Na2HPO44g,煌绿0.025g，柠檬酸铋铵2g,Na2SO46g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,pH7.5。制法：将前5种成分溶解于300mL蒸馏水中，再将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50m1蒸馏水溶解。将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，冷至80C左右。将以上三液合并，补充

26、蒸馏水至1000m1,校正pH，加0.5%煌绿水溶液5mL;摇匀。冷却至5055C，倾注平板。注：此培养基不需高压灭菌。制备过程中不宜过分加热，以免降低其选择性。应在临用前一天制备，贮存于室温暗处。超过48h不宜使用。DHL琼脂培养基成份：蛋白胨20g，牛肉膏3g,乳糖10g,蔗糖10g,去氧胆酸钠1g,Na2S2032.3g,柠檬酸钠1g,柠檬酸铁铵1g,中性红0.03g，琼脂20g，蒸馏水1000mL,pH7.3。制法：除中性红和琼脂外，将其他成分溶解于400m1蒸馏水中，校正pH值。再将琼脂溶于600mL蒸馏水中，两液合并，力口0.5%中性红水溶液6mL,待冷至5055C,倾注平板。HE

27、琼脂培养基成份：月示胨12g，牛肉膏3g，乳糖12g,蔗糖2g,水杨素2g,胆盐20g,NaCL5g,琼脂20g,蒸馏水1000m1,0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mL,Andrade指示剂20mL,甲液20mL,乙液20m1。制法：将前七种成分溶解于400mL蒸馏水中。作为基础液，加入甲液和乙液，校正pH值为7.5,再加入指示剂；将琼脂溶于600m1蒸馏水中。二者合并，待冷至5055C,倾注平板。注：此培养基不可高压灭菌；Andrade指示剂：酸性复红0.5g,1MNaOH溶液16m1,蒸馏水100mL。制法为：将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液。数小时后如果复红退色不全，再加氢氧化钠溶液

28、12mLo甲液：Na2S20334g,柠檬酸铁铵4g,蒸馏水100m1。乙液：去氧胆酸钠10g，蒸馏水100mL。S.S.琼脂基础培养基成分：牛肉膏5g,月示胨5g，三号胆盐3.5g，琼脂17g,蒸馏水1000mL。制法：将牛肉膏、月示胨和胆盐溶解于400mL蒸馏水中，将琼脂溶于500m1蒸馏水中，二液混合，121C灭菌15min备用。完全培养成分：基础培养基1000mL,乳糖10g，柠檬酸钠8.5g,Na2S2038.5g,10%柠檬酸铁溶液10m1,1%中性红溶液2.5m1,0.1%煌绿溶液0.33m1。制法：加热熔化基础培养基，按比例加入上述染料以外的各成分，充分混合均匀，校正)H值为7

29、.0,加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。注：制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于48h内使用；煌绿溶液配好后应在10d以内使用。靛基质试验培养基成分：蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000mL,pH7.37.5。制法：称取各成分，加入水中加热溶化。用1mol/LNaOH调至pH7.47.5。分装小试管，每管约3mL,116C,15min高压灭菌后410C保存备用。三糖铁琼脂(TSI)成分：蛋白胨20g，硫代硫酸钠0.2g,乳糖10g，蒸馏水1000mL,硫酸亚铁铵0.2g,蔗糖10g,酚红0.025g,氯化钠5g，牛肉膏5g,琼脂12g，葡萄糖1g,pH7.4。制法：将除琼脂和酚红以外的各种成

30、分溶解于蒸馏水中，校正dH。加入琼脂，加热煮沸以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5mL，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。121C咼压火菌15min后放置咼层斜面备用。尿素琼脂成分：蛋白胨1g，葡萄糖1g,0.4%酚红溶液3mL，蒸馏水1000mL，氯化钠5g,磷酸氢二钾2g,琼脂20g,20%尿素溶液100mL,pH7.20.1制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH,加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶。121C高压灭菌15min,冷至5055C,加入经除菌过滤的尿素溶液。尿素的最终浓度为2%。最终pH为7.20.1。分装于灭菌试管内，放成斜面备用。ONPG培养基成分：邻

31、硝基酚BD-半乳糖昔(ONitropHenylBDgalactopyranoside)(ONPG)60mg,0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5)10mL,1%蛋白胨水(pH7.5)30mL制法：将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mmx75mm试管，每管0.5mL,用橡皮塞塞紧。氨基酸脱羧酶试验培养基(赖氨酸培养基)成分：蛋白胨5g,酵母浸膏3g,葡萄糖1g,蒸馏水1000mL,1.6%滇甲酚紫一乙醇溶液1mL,L一氨基酸或DL一氨基酸0.5或1g/100mL,pH6.8。制法：除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每瓶100mL，分别加入赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸等

32、各种氨基酸。L氨基酸按0.5%加入，DL氨基酸按1%加入。再行校正pH至6.8。对照培养基不加氨基酸。分装于灭菌的小试管内，每管0.5mL,上面滴加一层液体石蜡，115C高压灭菌10min。氰化钾(KCN)培养基成分：蛋白胨10g,氯化钠5g,磷酸二氢钾0.225g,磷酸氢二钠5.64g，蒸馏水1000mL,0.5%氰化钾溶液20mL,pH7.6。制法：将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，121C高压灭菌15min。放在冰箱内使其充分冷却。每100mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1：10000),分装于12mmx100mm灭菌试管，每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧，放在

33、4C冰箱内，至少可保存两个月。同时，将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。丙二酸钠培养基成分：酵母浸膏1g,硫酸铵2g，磷酸氢二钾0.6g，磷酸二氢钾0.4g，氯化钠2g,丙二酸钠3g,0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL,蒸馏水1000mL,pH6.8。制法：先将酵母浸膏和盐类溶解于水，校正pH后再加入指示剂，分装试管，121C高压灭菌15min。氧化酶试验试剂1%盐酸二甲基对苯二胺溶液：少量新鲜配制，干冰箱内避光保存。1%四甲基对苯二胺溶液：将四甲基对苯二胺1.0g溶于100.0mL蒸馏水即可。通常使用新鲜配制的试剂，如放置于冷藏库，可在配制后7天内使用。1%a-萘酚乙醇溶液。亚硒

34、酸盐煌绿增菌液成分：蛋白胨5g，酵母膏5g,甘露醇5g，牛磺胆酸钠1g,20%亚硒酸氢钠溶液20m1,0.25mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)100mL,2%煌绿水溶液0.25mL,蒸馏水900m1。制法：将前三种成分溶于水中，调节pH值为7.0,加入牛磺胆酸钠，加热溶解调pH值(其中干鸡蛋白样品pH8.2土0.1;其它干蛋品pH7.2土0.1,冰蛋品pH7.0土0.1)(具体数值如下)121C灭菌15min,放冷备用，此为甲液；称取4g亚硒酸氢钠，溶于19mL蒸馏水中，即为20%亚硒酸氢钠溶液20mL,12lC灭菌15min,放冷备用，此为乙液；精确称取2HPO4(无水)2.18g,KH

35、2PO4(无水)1.71g，溶解于蒸馏水中，定容至100mL。12lC灭菌15min,放冷备甩此为丙液；称取煌绿(灿烂绿)0.2g溶于10mL蒸馏水中，即为2%煌绿水溶液，此为丁液。用前将乙液和丙液依次加入甲液中，复查混合液的pH值，加入煌绿溶液。无菌操作分装于无菌烧瓶或试管内，每瓶150m1。培养基应在15d内使用。GN增菌液成分：胰蛋白胨20g,葡萄糖1g，甘露醇2g，柠檬酸钠5g,去氧胆酸钠0.5g,磷酸氢二钾4g,磷酸二氢钾1.5g，氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.0。制法：按上述成分配好，加热使溶解，校正pH。分装每瓶225mL,115C高压灭菌15min。苯丙氨酸培养基成分

36、：酵母浸膏3g,DI苯丙氨酸(或L苯丙氨酸1g)2g,磷酸氢二钠1g，氯化钠5g,琼脂12g,蒸馏水1000mL,制法：加热溶解后分装试管，121C高压灭菌15min,使成斜面。西蒙氏柠檬酸盐培养基成分：氯化钠5g,硫酸镁(MgSO47H2O)0.2g，磷酸二氢铵1g，磷酸氢二钾1g,柠檬酸钠5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mL,pH6.8。制法：先将盐类溶解于水内，校正pH,再加琼脂加热溶化。然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121C高压灭菌15min后放成斜面。葡萄糖铵培养基成分：氯化钠5g,硫酸镁(MgSO47H2O)0.2g，磷酸二氢铵1g，磷酸氢二

37、钾1g,葡萄糖2g,琼脂20g，蒸馏水1000mL,0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mL,pH6.8。制法：先将盐类和糖溶解于水内，校正pH,再加琼脂加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121C高压灭菌15min后放成斜面。麦康凯琼脂成份：蛋白胨17g,月示胨3g，猪件、羊)胆盐5g,NaCL5g”琼脂17g,蒸馏水1000m1,乳糖10g，0.01%结晶紫水溶液10m1,0.5%中性红水溶液5m1。制法：将蛋白胨、月示胨、胆盐和氯化钠溶于400mL蒸馏水内，校正pH值至7.2。将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解。合并两液，分装于烧瓶内，121C灭菌15min备用。临用时加热溶化上述琼脂

38、，趁热加入乳糖。冷至5055C时加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。注：结晶紫和中性红水溶液配好后须经高压灭菌。肠道菌增菌肉汤(EE肉汤)成分：蛋白胨10g,葡萄糖5g，牛胆盐20g,磷酸氢二钠8g,磷酸二氢钾2g,煌绿0.015g，蒸馏水1000mL,pH7.2。制法：按上述成分配好，加热使溶解，校正pH。分装每瓶30mL,115C高压灭菌15min。注意必须使用纯净的牛胆盐和煌绿，减少对受损且数量极少的肠杆菌的生长抑制。克氏双糖铁琼脂(KI)上层培养基成分：血消化汤(pH7.6)500mL,琼脂6.5g，硫代硫酸钠0.1g,硫酸亚铁铵0.1g,乳糖5g,0.2%酚红溶液5mL。下层培

39、养基成分：血消化汤(pH7.6)500mL,琼脂2g,葡萄糖1g,0.2%酚红溶液5mL。制法：取血消化汤按上层和下层的琼脂用量，分别加入琼脂，加热溶解。分别加入其他各种成分。将上层培养基分装于烧瓶内；将下层培养基分装于灭菌的12mmx100mm试管内，每管约2mL。115C高压灭菌10min。将上层培养基放在56C水浴箱内保温；将下层培养基直立放在室温内，使其凝固。等下层培养基凝固后，以无菌操作将上层培养基分装于下层培养基的上面，每管约1.5mL并放成斜面。Elek氏培养基(毒素测定用)成分：胨20g，麦芽糖3g,乳糖0.7g，氯化钠5g，琼脂15g,40%氢氧化钠溶液1.5mL，蒸馏水10

40、00mL,pH7.8。制法：用500mL蒸馏水溶解琼脂以外的成分，煮沸并用滤纸过滤。用1mo1/L氢氧化钠校正pH。用另外500mL蒸馏水加热溶解琼脂。将两液混合，分装试管10mL或20mL。121C高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂倾注平板。EC增菌液(36)成分：胰蛋白胨20g，胆盐1.5g，乳糖5g,NaCL5g,无水KH2PO41.5g,无水K2HPO44g,蒸馏水1000mL,pH7.0。制法：将各成分溶于水中，调pH值，依据实验需求分装三角瓶或试管。121C灭菌15min备用。之后，如果通过灭菌细菌滤器添加1%。的20mg/L新生霉素，即为改良EC增菌液。改良山梨醇麦康凯琼脂(

41、TC-SMAC)成分：蛋白胨7g,眎胨3g，猪胆盐5g,山梨醇10g,NaCL5g，琼脂18g,0.5%中性红水溶液5mL,0.01%结晶紫水溶液10mL,亚碲酸钾2.5mg,头孢肟0.05g，蒸馏水1000mL,pH7.2。制法：除山梨醇、指示剂和抑菌剂外，其余成分溶于水中，溶解后调pH值。115C灭菌20min。临用时溶化培养基，冷至50C,加入山梨醇、灭菌的结晶紫和中性红；加入过滤除菌的1%亚碲酸钾250L和50g/L头孢肟1mL,混匀，倾注倒平板。LST肉汤成分：胰蛋白胨或胰酪胨(Tryticase)20g,NaCL5.0g，乳糖5.0g,K2HPO42.75g,KH2PO42.75g

42、,月桂基硫酸钠0.1g，蒸馏水1000mL。制法：将各成分溶解于蒸馏水中。分装到有倒立发酵管的20mmx150mm试管中，每管10mL。121C高压灭菌15min。最终pH6.80.2。MUG-LSTLST肉汤中添加4-甲基伞形酮-B-D-葡萄糖醛酸苷（MUG），使终浓度为0.1g/L。甘露醇卵黄多粘菌素琼脂成分：蛋白胨10g，牛肉膏1g,甘露醇10g,氯化钠10g,琼脂15g,蒸馏水1000mL,0.2%酚红溶液13mL,50%卵黄液50mL，多粘菌素B100国际单位/mL,pH7.4o制法：将前面五种成分加入于蒸馏水中，加热溶解，校正pH,加入酚红溶液。分装烧瓶，每瓶100mL,121C高

43、压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至50C,每瓶加入50%卵黄液5mL及多粘菌素B10000国际单位，混匀后倾注平板。酪蛋白琼脂成分：酪蛋白10g，牛肉膏3g，磷酸氢二钠2g,氯化钠5g，琼脂15g,蒸馏水1000mL,0.4%溴麝香草酚蓝溶液12.5mL,pH7.4o制法：将除指示剂外的各成分混合，加热溶解（但酪蛋白不溶解），校正pH。加入指示剂，分装烧瓶，121C高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至50C,倾注平板。注：将菌株划线接种于平板上，如沿菌落周围有透明圈形成，即为能水解酪蛋白。木糖明胶培养基成分：胰胨10g,酵母膏10g,木糖10g，磷酸氢二钠5g,明胶120g，蒸

44、馏水1000mL,0.2%酚红溶液25mL,pH7.6o制法：将除酚红以外的各成分混合，加热溶解，校正pH。加入酚红溶液，分装试管，121C高压灭菌15min,迅速冷却。动力-硝酸盐培养基（A法）成分：蛋白胨5g，牛肉膏3g，硝酸钾1g，琼脂3g，蒸馏水1000mL,pH7.0。制法：加热溶解，校正pHo分装试管，每管10mL,121C高压灭菌15min。甲萘胺-醋酸溶液、对氨基苯磺-醋酸溶液（硝酸盐培养基）成分：硝酸盐0.2g,蛋白胨5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。制法：溶解，校正pH，分装试管，每管约5mL,121C高压灭菌15min。硝酸盐还原试剂：甲萘胺一醋酸溶液：将甲萘胺0.5

45、g溶解于5mol/L乙酸溶液100mL中。（2）对氨基苯磺醋酸溶液：将对氨基苯磺酸0.8g溶解于5mol/L乙酸溶液100mL中。氯化钠结晶紫增菌液成分：蛋白胨20g，氯化钠40g,0.01%结晶紫溶液5mL,蒸馏水1000mL,pH9.0。制法：除结晶紫外其他按上述成分配好，加热溶解，约加3%氢氧化钾溶液4.5mL,校正pH,加热煮沸，过滤，再加入结晶紫溶液，混合分装试管，121C高压灭菌15min备用。3.5%氯化钠三糖铁琼脂成分：蛋白胨20g，牛肉膏5g，乳糖10g,蔗糖10g，葡萄糖1g,氯化钠35g,硫酸亚铁铵0.2g，硫代硫酸钠0.2g，琼脂12g,酚红0.025g，蒸馏水1000

46、mL,pH7.4。制法：将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正dH,加入琼脂，加热煮沸使琼脂溶化，加入0.2%酚红溶液12.5mL，摇匀，分装试管，121弋高压灭菌15min,放置高层斜面备用。TCBS琼脂(配方1)成分：酵母膏5g,蛋白胨10g，蔗糖20g,硫代硫酸钠10g,柠檬酸钠10g,牛胆酸钠3g,牛胆汁粉5g,氯化钠10g,柠檬酸铁1g,溴麝香草酚蓝(2%溶液)20mL,草酚蓝(1%溶液)4mL，琼脂15g,pH8.6。制法：将上述成分加蒸馏水至1000mL，混合，使全部溶解，校正pH为8.6,加热煮沸，不需高压灭菌，倾注平皿1520mL。注：不分解蔗糖的副溶血性弧菌，在此培

47、养基上生长呈绿色菌落，分解蔗糖的细菌呈黄色菌落。TCBS琼脂(配方2)成分：酵母浸膏5g，蛋白胨10g,硫代硫酸钠10g,枸橼酸钠10g,牛胆粉8g,蔗糖20g，氯化钠10g，柠檬酸铁1g,溴麝香草酚兰0.04g,麝香草酚蓝0.04,琼脂约13g，水1000mL,pH8.58.7o制法：除指示剂外，将剩余成分混合于1000mL水中，煮沸溶解。调至pH8.58.7,加入指示剂，混匀。再次煮沸12min。无需高压灭菌。改良CampBAP培养基成分：胰蛋白胨10g,蛋白胨10g,葡萄糖1g,酵母浸膏2g,氯化钠5g,焦亚硫酸钠0.1g，琼脂15g，蒸馏水1000mL,硫乙醇酸钠1.5g,万古霉素10

48、mg,多粘菌素B2500国际单位，两性霉素B(AmpHotericinB)2mg,头孢霉素(CepHalosporin)15mg,亦可用Ceporan)脱纤维羊血50mL,pH7.0土0.2。制法：除抗生素和羊血外，将其他成分混合，加热溶解，校正dH到7.0土0.2。装瓶，每瓶100mLo121X高压灭菌15min备用。此为布氏琼脂基础培养基；临用前，加热溶解基础琼脂，冷至60C。每100mL基础琼脂中，加入脱纤维羊血5mL、抗生素混合液0.5mL及两性霉素B,头孢霉素混合液0.5mL,摇匀，倾注平板。注：两性霉素B,头孢霉素混合液配法：称两性霉素B2mg和头孢霉素15mg,加5mL蒸馏水混合

49、即成。甘氨酸培养基成分：布氏肉汤1000mL，琼脂粉1.6g,甘氨酸(glycine)10g。制法：将以上成分混合，加热溶解，校正pH7.0,分装试管，每管4mL,121X高压灭菌15min,备用。Skirrow氏培养基成分：蛋白胨15g,胰蛋白胨(typtone)2.5g,酵母浸膏5g,氯化钠5g，琼脂15g,蒸馏水l000mL,甲氧苄氨嘧啶(trimethoprin,TMP)5mg,万古霉素(vancomycin)10mg,多粘菌素B(po1ymyxin)2500国际单位，冻溶马血70.0mL,pH7.4。制法：除甲氧苄氨嘧啶、抗生素和冻溶马血外，其他成分混合溶解。校正dH7.4,装瓶10

50、0mL。121C咼压火菌15min,备用。此即血琼脂基础培养基。临用前，加热溶解基础培养基，冷至60Xo每100mL基础培养基中，加入冻溶二次的马血及TMP、抗生素混合液0.5mL,摇匀，倾注平板。庖肉培养基成分：牛肉浸液1000mL,蛋白胨30g，酵母浸膏5g，磷酸二氢钠5g，葡萄糖3g,可溶性淀粉2g,碎肉渣适量，pH7.8。制法：称取新鲜除脂肪和筋膜的牛肉500g,加蒸馏水1000mL和1mol/L氢氧化钠溶液25mL,搅拌煮沸15min,充分冷却，除去表层脂肪，澄清，过滤，加水补足至1000mL。加入除碎肉渣外的各种成分，校正pH。卵黄琼脂培养基成分：基础培养基为肉浸液1000mL，蛋

51、白胨15g，氯化钠5g，琼脂2530g,pH7.5。50%葡萄糖水溶液。50%卵黄盐水溶液。制法：基础培养基分装每瓶100mLo121X高压灭菌15min。临用时加热溶化，冷至50C,每瓶内加50%葡萄糖水溶液2mL和50%卵黄盐水悬液1015mL,摇匀，倾注平板。EB增菌液.成分：胰胨17g，多价胨3g，酵母膏6g，氯化钠5g,磷酸二氢钾2.5g,葡萄糖2.5g,蒸馏水1000mL,pH7.27.4o制法：121X高压灭菌15min,使用前加吖啶黄溶液15mg/L、萘啶酮酸溶液40mg/L和放线菌酮50mg/L,此三种成分要过滤除菌或无菌配制。胰酪胨大豆琼脂(TSAYE)成分：胰胨17g，多价胨3g，酵母膏6g，氯化钠5g，磷酸氢二钾2.5g，葡萄糖2.5g，琼脂15g,蒸馏水l000mL,pH7.27.4o制法：加热溶解，调pH值，分装，121X高压灭菌15min备用。硫酸铁铵半固体(SIM)成分：胰胨20g，多价胨6g，硫酸铁铵0.2g,硫代硫酸钠0.2g,琼脂3.5g，蒸馏水1