生物工程实验室关键设备课件

1、第一章 生物工程实验室关键设备 生物技术的开发，首先要在实验室中进行，为取得满意的实验效果，一定要配备相关的设备用以满足需要。实验室设备用途灭菌及消毒菌种培养菌种保藏分离和提取样品分析混合培养（Mixed culture）和纯培养（pure culture）纯培养是生物工程实验室最基本的常规实验操作。无菌操作灭菌第一节 无菌操作一、灭菌的方法及实验室灭菌设备灭菌：用物理或化学的方法将杀死或除去所有微生物。消毒：除去致病或有害微生物。1、实验室热杀菌设备干热灭菌干燥箱湿热灭菌蒸汽灭菌器（1）干燥箱（烘箱）操作条件：160C保持2 h或170C保持1.5 h。适用范围：玻璃、金属制品。操作要求用牛

2、皮纸或棉布包裹（不能超过180C焦枯或燃烧）器具灭菌前洗净（残留培养基加热焦枯）（2）蒸汽灭菌器灭菌方法操作条件：121C，30 min。原理：借助于蒸汽释放的热能使微生物的大分子内部的化学键（主要是氢键）受到破坏，引起不可逆的变性导致微生物死亡。蒸汽优点：很强的穿透能力，冷凝释放大量热量，来源方便，价格低廉，灭菌效果可靠。2、化学消毒一般用来除去空间、管道、设备以及容器中的微生物。化学消毒剂：气体、液体或粉状（甲醛、环氧乙烷、酚化合物、含活性氯化合物、亚硫酸、表面活性剂等）。注意配制时对器具的要求及应用范围甲醛空间消毒（主要用于表面灭菌）环氧乙烷塑料制品（易穿透到疏松物质中）酚化合物实验室消

3、毒地板表面活性剂容器、管道及其他设备的灭菌亚硫酸葡萄酒酒桶（燃烧硫磺）碳酸厌氧培养（排除氧气）3、紫外线原理：产生臭氧。透过物质能力差接种室、超净工作台、无菌培养室和手术室空气及物体表面灭菌。距离物体不超过1.2 m。4、过滤除菌培养基成分受热易破坏。常用微孔滤膜滤器0.220.45 m孔径过滤除菌二、无菌操作间及超净工作台无菌操作间：建筑要求光滑，密封性好，干燥。室内设紫外灯（30W开启1h）。化学消毒剂定期消毒。超净工作台鼓风机鼓入空气粗滤超滤无菌空气超净工作台使用方法！三、无菌操作客观条件：灭菌设备和无菌环境主观条件：无菌操作意识贯穿操作过程。蒸汽灭菌锅灭菌锅内冷空气排尽，物品不过于拥挤

4、。灭菌后物品放入无菌室减少表面污染器具口及接种用具进行火焰灭菌要彻底移液管无菌操作一 、静置培养试管斜面平板厌氧培养第二节 菌种培养培养箱二氧化碳培养箱厌氧罐1、摇瓶二、摇瓶和摇瓶机转/滚瓶2、摇瓶机（摇床）菌种繁殖、菌种筛选和培养基优化。主要部件：支持台、电动机和控制系统等。容量：2501000 ml摇瓶（有时可放50 ml摇瓶或试管）水浴与气浴；旋转式和往复式摇瓶机滚瓶机第三节 菌种保藏设备菌种保藏方法冰箱保藏石蜡油封保存法沙土管保存法真空冷冻干燥保存法深冷保藏固体曲保藏法深冷保藏将培养好的供藏菌种在-18C或-80C低温冰箱中深度冷冻,或在液氮中冷至-196C即可。优点：操作方便缺点：冻融引起大部分细胞死亡，存活率仅5%左右。第四节 发酵液处理及产物提取固液分离离心、过滤、细胞破壁萃取浓缩台式低速大容量离心机 超声波细胞破碎仪空化效应。用途动植物细胞、细菌、病毒破碎；乳化、分离、匀化、提取、消泡、清洗及加速化学反应等。旋转蒸发仪第五节 实验样品的分析检测