生药中各类成分及定性定量分析方法课件

1、生药中各类成分及定性定量分析方法2022/7/28生药中各类成分及定性定量分析方法一、黄酮类 (flavonoids)具有2-苯基色原酮(flavone)结构的化合物 色原酮2-苯基色原酮生药中各类成分及定性定量分析方法一、黄酮类 (flavonoids)C6-C3-C6 生药中各类成分及定性定量分析方法1、结构类型（Structures）黄酮(flavone) 黄酮醇(flavonol) 二氢黄酮(dihydroflavone) 二氢黄酮醇(dihydroflavonol) 生药中各类成分及定性定量分析方法异黄酮(isoflavone) 二氢异黄酮(dihydroisoflavone) 查耳

2、酮(chalcone) 橙酮(aurones) 生药中各类成分及定性定量分析方法黄烷 (flavanes) 花色素 (anthocyanidins) 双黄酮 (biflavone) 生药中各类成分及定性定量分析方法 2、黄酮类的分布与活性 (distribution & bioactivity)豆科：葛根、甘草、槐米、大豆唇形科：黄芩菊科：水飞蓟、红花、苍耳子鸢尾科：射干、鸢尾小檗科：淫羊藿香蒲科：蒲黄松科、柏科、银杏科：银杏叶（双黄酮）生药中各类成分及定性定量分析方法生药中各类成分及定性定量分析方法3、理化性质(physico-chemical properties)性状：结晶性固体颜色：黄

3、色，与分子中交叉共轭体系及助色 团类型、数目、及取代位置有关溶解度: 苷易溶于热水，能溶于水、醇、碱 水; 苷元易溶于醇、EtOAC、乙醚、 碱水生药中各类成分及定性定量分析方法酸碱性酸性，因有酚-OH7，4-二-OH 7或4-OH 一般-OH 5-OH NaHCO3 Na2CO3 1NaOH 5NaOH微弱碱性 (吡喃环上的1-位氧原子的未共用电子对) 745生药中各类成分及定性定量分析方法HCl-Mg还原反应：生药粉末 醇提 滤液 橙红-紫色金属盐络合反应：邻二酚羟基；3- 羟基，4酮基；5- 羟基，4酮基 镁盐、铝盐、锆盐、铅盐反应 有色络合物 HCl、Mg粉显色反应生药中各类成分及定性

4、定量分析方法Bright-yellow comoles compoundAl3+Al3+生药中各类成分及定性定量分析方法4、黄酮类主要定量方法 （Major quantitative methods ）总黄酮测定（UV法） 原理：黄酮类化合物常可与某些试剂（如硝酸铝和亚硝酸钠等）形成稳定的有色络合物 生药中各类成分及定性定量分析方法应用：紫外-可见分光光度法（山楂叶中总黄酮-药典方法） 药材提取物亚硝酸钠硝酸铝氢氧化钠500 nm处测定生药中各类成分及定性定量分析方法4、黄酮类主要定量方法 （Major quantitative methods ）单体黄酮测定 薄层扫描法(TLCS) 高效液相

5、色谱法（HPLC）生药中各类成分及定性定量分析方法对照品 芦丁(rutin) (1)；金丝桃苷(hyperoside) (2)；木犀草素-7-O-D-半乳糖苷(luteolin-7-O-D-galactoside) (3)；忍冬苷(lonicerin) (4)；tricin-7-O-D-glucopyranoside (5)；chrysoeirol-7-O-neohesperidoside (6)；tricin-7-O-neohesperidoside (7)和槲皮素(quercetin) (8)1OHHGlc(6-1)rhaH2OHHGalH3OHHHGal4OHHOHGlc(6-1)rha

6、5OMeOMeHGlc6OMeHHGlc(2-1)rha7OMeOMeHGlc(2-1)rhaR1R2R3R48OHHOHH应用：HPLC法测定金银花中木犀草苷和芦丁生药中各类成分及定性定量分析方法12345678123478AB金银花黄酮类化合物色谱图(A) 对照品; (B) L. japonica生药中各类成分及定性定量分析方法二、蒽醌类(anthraquinones) 蒽醌 (anthraquinones)1、结构类型（Structures）氧化蒽酚 (oxanthranol) 蒽酚 (anthranol) 二蒽醌 (dianthraquinones）二蒽酮 (dianthrone) 蒽

7、酮 (anthrone) 生药中各类成分及定性定量分析方法2、蒽醌苷的分布与活性 (distribution & bioactivity) 蓼科：大黄、何首乌、虎杖 豆科：番泻叶、决明子 百合科：芦荟 茜草科：茜草、巴戟天生药中各类成分及定性定量分析方法颜色：多显黄色或橙红色，多具荧光性状：结晶体，具升华性溶解度：苷元溶于甲醇、乙醇、乙醚、氯仿，几不溶于水 ；苷易溶于水、稀醇, 可溶甲醇、乙醇，难溶于苯、乙醚等 。3、理化性质(physico-chemical properties)生药中各类成分及定性定量分析方法酸性：酸性强弱与酚羟基数目及位 置有关-COOH（NaHCO3 ） 2个以上-酚

8、OH（Na2CO3 ） 1个-酚OH （1%NaOH ） 2个以上-酚OH （5%NaOH ）生药中各类成分及定性定量分析方法 Borntrager反应 含蒽醌的乙醇溶液+碱水溶液 红色 溶液黄色+乙醚振摇 分取醚层，乙醚层黄色 水层红色，醚层无色 H+碱水鉴别反应 生药中各类成分及定性定量分析方法 醋酸镁络合反应 样品乙醇液滴于滤纸上 喷0.5% Mg(Ac)2 MeOH试液 显色生药中各类成分及定性定量分析方法4.蒽醌衍生物主要定量分析方法 总蒽醌: UV法测定 原理：与醋酸镁络合反应生药中各类成分及定性定量分析方法 应用：UV法测定番泻叶中总番泻苷含量药材番泻苷提取物FeCl3HCl乙醚

9、提取物0.5% Mg(Ac)2 MeOH515nm生药中各类成分及定性定量分析方法4.蒽醌衍生物主要定量分析方法 单体蒽醌: 薄层扫描法和高效液相色谱法 sennoside Asennoside B生药中各类成分及定性定量分析方法番泻叶中番泻苷A和B的色谱图生药中各类成分及定性定量分析方法1.结构类型三萜皂苷（triterpenoid saponins）：皂苷元为30个碳原子组成的三萜类衍生物(酸性皂苷) 五环三萜(pentacyclic triterpenoids) 四环三萜(tetracyclic triterpenoids)三、皂苷类(saponins) 生药中各类成分及定性定量分析方法

10、甾体皂苷(steroidal saponins) 甾体皂苷的皂苷元由27个碳原子组成(中性皂苷) 螺甾烷醇 (spirostanol)型 异螺甾烷醇(isospirostanol)型 呋甾烷醇(furostanol)型 变形螺甾烷醇(pseudo-spirostanol)型生药中各类成分及定性定量分析方法2. 皂苷的分布与活性甾体皂苷：百合科（麦冬、知母）、薯蓣科三萜皂苷：五加科（人参、三七）、豆科（甘草、黄芪）、桔梗科（党参、桔梗）、葫芦科（土贝母、丝瓜根）、石竹科（太子参）、鼠李科（酸枣仁）生药中各类成分及定性定量分析方法生药中各类成分及定性定量分析方法3.皂苷的理化性质吸湿性：多为白色的

11、无定形粉末，具吸湿性。 溶解性：可溶于水、甲醇、乙醇，不溶于乙醚、苯等极性小的有机溶剂; 易溶于水饱和的丁醇或戊醇。生药中各类成分及定性定量分析方法泡沫试验醋酐-硫酸反应 (Liebermann-Burchard 反应)鉴别反应 生药中各类成分及定性定量分析方法4.皂苷主要定量分析方法 总皂苷:中国药典用重量法测定桔梗中三萜总皂苷。生药中各类成分及定性定量分析方法4.皂苷主要定量分析方法 单体皂苷： HPLC-UV：人参中三萜皂苷类成分人参皂苷 Rg1、Re、Rb1的测定，检测波长为203nm；重楼中重楼皂苷I、II的测定，检测波长为210nm。 HPLC-ELSD：黄芪中三萜皂苷类成分黄芪甲

12、苷；知母中甾体皂苷类成分菝葜皂苷元。生药中各类成分及定性定量分析方法山银花中皂苷类成分的高效液相色谱分析 R1R21ara(2-1)rha(3-1)glc(4-1)glcglc(6-1)glc2ara(2-1)rha(3-1)glcglc(6-1)glc3ara(2-1)rhaglc(6-1)glc4Hglc(6-1)glc5ara(2-1)rha(3-1)glc(4-1)glcH6ara(2-1)rha(3-1)glcH7ara(2-1)rhaH色谱柱：Zorbax SB-C18(2504.6mm，5.0m)；柱温：25；流动相：A 乙腈-醋酸(95:0.5) ， B 0.5% 醋酸；梯度洗

13、脱：29%A(0-10min)，29-46%A(10-25 min)，46%A(25-30min)；检测器：蒸发光散射检测器；漂移管温度：106；氮气流速：2.6L/min。 生药中各类成分及定性定量分析方法山银花中皂苷类成分的高效液相色谱图A: 混合对照品 B: 山银花 L. confusa生药中各类成分及定性定量分析方法RRLCESI TOF MS 快速测定三七中12个三萜皂苷生药中各类成分及定性定量分析方法1.生物碱结构类型 吡咯烷类 (pyrrolidine)吡啶类 (pyridine) 喹啉类(quinoline)异喹啉类(isoquinoline)喹唑酮类(quinnazolido

14、ne) 吲哚类(indole)莨菪烷类(tropane) 亚胺唑类(imidazole) 嘌呤类(purine) 四、生物碱类(alkaloids) 生药中各类成分及定性定量分析方法2.生物碱的分布毛茛科：乌头、黄连防己科：防己、北豆根罂粟科：罂粟、延胡索茄科：蔓陀罗、洋金花百合科：百合、贝母豆科：山豆根、苦参生药中各类成分及定性定量分析方法黄连素（小檗碱） 抗菌毛果芸香碱 治疗青光眼山莨菪碱（6542） 抗胆碱高三尖山酯碱 抗白血病长春新碱 抗肿瘤延胡索乙素 镇痛苦参碱 抗癌利血平 降压石杉碱甲 抗老年痴呆秋水仙碱 抗痛风麻黄碱 平喘吗啡 镇痛。 。 。 。AlkaloidsEffect生药

15、中各类成分及定性定量分析方法生药中各类成分及定性定量分析方法3. 生物碱理化性质 多数生物碱为结晶状固体 ,一般无色;多数生物碱具左旋光性;多数生物碱具碱性。生药中各类成分及定性定量分析方法溶解度：游离生物碱极性较小，不溶或难溶于水，能溶于氯仿、乙醚、苯、丙酮、乙醇等有机溶剂，也能溶于稀酸的水溶液而生成盐类。生物碱盐类易溶于水和乙醇，不溶或难溶于有机溶剂。生药中各类成分及定性定量分析方法生物碱的沉淀反应 碘化铋钾：生物碱 + Dragendorff试剂（BiI3 KI） 桔红、红棕 碘化汞钾: 生物碱+ Mayer试剂 (HgI2KI) 白、淡黄生药中各类成分及定性定量分析方法贝母生物碱薄层色

16、谱图 1、 2阴性对照 3.西贝素苷对照品 4. 西贝素对照品 5. 样品990716 6. 样品 990718 7. 样品990720 8、9伊贝母药材对照: 展开系统为乙酸乙酯：丙酮：甲酸：水（5：3：0.5：1）：展开系统为氯仿-甲醇-水（40：10：1） III生药中各类成分及定性定量分析方法罂粟壳薄层色谱（1-11 罂粟壳）展开剂：甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液（20：20：3：1）显色：依次喷碘化铋钾试液和亚硝酸钠试液吗啡可待因罂粟碱生药中各类成分及定性定量分析方法4. 生物碱含量测定 总生物碱： 酸性染料比色法。 酸碱滴定法，如中国药典对制川乌中酯型生物碱的测定。生药中各类成分及定性

17、定量分析方法4. 生物碱含量测定 单体生物碱：薄层扫描法：两面针生物碱测定- 中国药典高效液相色谱法: 通常采用离子对色谱或离子抑制色谱法 生药中各类成分及定性定量分析方法贝母生物碱的高效液相色谱分析 对照品：贝母辛（peimissine）、鄂贝啶碱（ebeiedine）、去氢鄂贝啶碱（ebeiedinone）、湖贝甲素（hupehenine）、异浙贝甲素（isoverticine）、贝母素甲（verticine）、贝母素乙（verticinone）和西贝素（imperialine） 生药中各类成分及定性定量分析方法贝母生物碱高效液相色谱图A4 6123 5 78 ISB 1 2 3 5 6

18、ISC IS 4 1对照品浙贝母伊贝母生药中各类成分及定性定量分析方法五、强心苷类(cardiac glycosides)是一类对心肌有兴奋作用，具有强心生理活性的甾体化合物生药中各类成分及定性定量分析方法1.结构类型强心甾烯型蟾蜍甾烯型强心三要素： C17内酯环； C/D 顺式； a-去氧糖五、强心苷类 (cardiac glycosides)生药中各类成分及定性定量分析方法2.强心苷的分布夹竹桃科：羊角拗、黄花夹竹桃萝摩科：香加皮、白前、白薇玄参科：洋地黄、毛花洋地黄百合科：万年青生药中各类成分及定性定量分析方法3.强心苷理化性质 甾体母核的反应：Liebermann-Burchard 反

19、应-去氧糖显色反应：Keller-Kiliani反应 五元不饱和内酯环反应：如Legal反应、Keddes反应（与某些芳香硝基化合物形成有色加成物 ） 鉴别反应 生药中各类成分及定性定量分析方法4.强心苷定量分析方法 总强心苷：不饱和内酯环的反应-紫外-可见分光光度法；单体强心苷：TLCS、HPLC、GC 如中国药典（2005年版）使用高效液相色谱法测定蟾酥中强心苷类成分华蟾酥毒基和脂蟾酥毒配基 生药中各类成分及定性定量分析方法AB狭叶洋地黄Digitalis lanata Ehrh. 中强心苷类HPLC分析生药中各类成分及定性定量分析方法生药中多类成分的同时含量分析Simultaneous ditermination of multi-type compounds in crude drugs Why ? Multi-compounds, multi-targets How ? Hyphenated techniques生药中各类成分及定性定量分析方法Example-1 金银花中多类成分的测定(HPLC-MS)生药中各类成分及定性定量分析方法生药中各类成分及