核酸检测平台技术商业计划书

1、傲立昂生物技术有限公司Orionis BioTek Corporation商业计划书联系人:联系电话:传 真：电子邮件: 地 址：中国云南昆明市滇池路阳光花园昊苑5-1-101保密承诺本商业计划书内容属商业秘密，所有权属于傲立昂生物技 术有限公司。其所涉及的内容和资料仅对有意向的投资人公 开，本公司要求有意向的投资人收到本计划书时做如下承诺：妥善保管本商业计划书，未经本公司同意，不得向第三方 公开商业计划书所涉及的公司商业秘密，亦不得作为案例等用 于教学，若收件人不希望涉足本计划所述项目，请与指定联系 人联系并将本计划书完整退回，并不得将本计划书全部和/或 部分地予以复制、传递给他人、影印、泄

2、露或散布给他人，否 则应承担相应法律责任。授 方：傲立昂生物技术有限公司 收件方：收件人签字：日期：综述第一部分：公司介绍第二部分：董事会及管理团队第三部分：产品及技术优势第四部分：行业及市场分析第五部分：商业模式及赢利预测 第六部分：合作方式及资金需求 第七部分：风险控制综述位於美国硅谷的傲立昂生物技术公司于2002年发明了这项迄今为止最先进的 核酸诊断技术，高效定量(CAD)PCR技术。傲立昂公司已在世界主要国家为该技术 申请了专利。与目前市场上最好的同类技术，荧光(TaqMan)PCR相比，高效定量 (CAD)PCR在保真度，准确度，灵敏度及降低经济成本诸方面都有显著提高。高效 定量(C

3、AD)PCR技术已经在检测人类基因这一最复杂DNA序列实验中取得了成 功，因此，这一成熟的高技术平台可以很方便地应用到在临床诊断及其他检测领 域。许多严重的传染病，如SARS，艾滋病，乙型肝炎，丙型肝炎等，都是高效定 量(CAD)PCR技术应用的理想对象。高效定量(CAD)PCR技术的广泛应用，除了能 提高诊断精度，缩短诊断时间，减少患者痛苦外，还能极大地降低整体治疗成本， 从而带来巨大的商业利润。傲立昂公司现正在中国积极寻找合作伙伴，共同将高效定量(CAD)PCR这一 成熟的平台技术尽快进入批量生产阶段，早日投入中国临床诊断市场。傲立昂公司 愿意通过成立合资公司的方式，与中方伙伴建立诚信合作

4、。产品开发过程可以分成 多个步骤，每一步骤均可产生独立成果，资金逐次投入，以降低风险。根据初步测 算，此项目若开发成功，第一年即可产生上亿元的销售额，利润率可达30%，是 极有吸引力的项目。第一部分公司介绍公司简介总部位于美国硅谷的傲立昂生物技术有限公司是一个处於创业初期的小型生 物技术研发公司。公司主要经营方向为核酸检测相关技术及产品的研究与开发；特 异性大分子合成；兼营各种专利制药及生物技术产品的技术转让、投资与合作的咨 询服务等。公司成功地开发出代表当今世界最高水平的高效定量(CAD)PCR技术，该技 术比目前国内外最先进最常用的荧光(TaqMan)PCR技术具有更高的准确性和灵敏 度，

5、且制造工艺简单，可以方便地应用到各种疾病的早期检测，并且在遗传病普 查，血源检查，环保监测及转基因动植物检出等方面，都有极为广阔的应用前景。宗旨本公司自成立之日起，便充分利用自身雄厚的技术优势，致力于最领先生物 技术的研究与开发，并与数家主要跨国医药公司合作使产品迅速商业化，以获得最 佳的经济效益和社会效益。以中国大陆留美学者为主组建的傲立昂生物技术公司，始终密切关注祖国生 物技术及制药行业的发展，随时愿意以我们的技术和商业优势，为提高中国人民的 健康水平提供最高质量的服务。为帮助中国抗击SARS，公司投入了大量人力物 力，及早开发出了目前特异性最高的SARS检测试剂，同时希望与中国同行合作，

6、 使之尽早投入临床使用。除SARS外，艾滋病、乙肝、丙肝等疾病的诊断产品都已 设计完成。公司组织结构尚处於创业初期的傲立昂生物技术公司，组织结构简单，只有研发部门和商 业开发部门。位於硅谷的总部拥有现代化的实验室、科研设备及小样生产能力，主要负责 新产品的研究和技术开发。同时公司在东海岸的新泽西州开设了商务开发办公室， 为公司的成熟产品寻找理想的合作伙伴。新泽西州几乎集中了全世界所有大型医 药、检测、医疗仪器及生物技术公司，是把生物高技术产品推向市场的最佳地区。为了与中国公司有效合作，公司正在考虑今年在中国开设一个分公司。第二部份公司董事会及管理团队董事会公司董事会由三人组成，毕万里、史长平和

7、朱晟，董事长为毕万里。管理团队公司目前虽然尚在初创阶段，但已初步建成了一个由顶尖生物科学家、医学 专家和具有美国大型跨国医药公司商业运作经验的经理人组成的精悍的核心团队。 以此核心团队为主干，公司在美国生物、医药行业发展建立了广泛、牢固的专业联 系，为公司今后进一步发展奠定了基础。管理团队主要成员简介毕万里，男，毕业于北京大学生物系，于美国辛辛那提大学医学院获博士学 位，在国际生物学权威杂志发表论文二十余篇。后就职于美国大型医疗试剂、仪器 公司，应用生物系统(AppliedBiosystem)公司，任资深科学家多年，拥有多项与核 酸检测技术相关的高技术专利发明。作为高效定量(CAD)PCR技术

8、的发明人，毕万 里博士创立了傲立昂生物技术公司，并专注于更新一代的核酸检测技术的研发，已 取得了突破性进展，不久即将公布于世。史长平，毕业于北京大学生物系，于美国图灵大学获博士学位，并于加州大 学旧金山分校修博士后。曾在美国大型医疗试剂、仪器公司，Chiron公司任资深科 学家多年，精通特异性大分子合成的关键技术。后独自创立了分子克隆药厂这一生 物技术公司，成为硅谷成功创业的范例。加盟傲立昂公司后，主要负责公司的大分 子合成业务和日常管理。朱晟，毕业于北京大学生物系，并于美国印地安那大学获MBA学位，主修金 融与市场营销。曾任职于通用汽车公司、雅培大药厂、法玛西亚制药公司等跨国公 司，任商务开

9、发资深经理多年，熟谙欧美各国药品、试剂、医疗仪器、营养品等的 研发和营销，有融资、谈判、管理咨询等方面的丰富经验。目前主要负责公司新产 品的商业开发。张晖南，毕业于北京医学院(现北京大学医学部)医疗系，在美国印地安那大学 获硕士学位及美国医学博士。曾任职于雅培(Abbott)药厂、法玛西亚(Pharmacia )制 药公司、辉瑞(Pfizer)制药厂、西尔金(Celgen)生物技术公司，任临床实验和药品安 全资深科学家、经理多年。目前主要负责公司的新产品的临床实验和审批。第三部分：产品及技术优势高效定量(CAD)PCR是迄今为止最先进最方便的核酸检测平台技术，为有效 阐述高效定量(CAD)PC

10、R，首先从核酸检测说起。3.1核酸检测技术核酸检测技术的定义与功能核酸检测技术是一种近十年来发展起来的全新的临床检测手段，通过检测出 病原体或其他生物某一特定基因序列(DNA或者RNA)，以确定该病原体或生物的 存在。由於基因序列的物种特异性及高度稳定性(尤以DNA为甚)，核酸检测技术 比传统的免疫检测技术具有不可比拟的准确度和灵敏度。核酸检测技术正在迅速取 代免疫检测技术。核酸检测技术的主要功能、用途精确测定出病源：凡基因序列被部分解码的病源皆可用此法进行检 测。目前已知的绝大多数疾病都在此范畴。常见病、流行病的普查和预防：如非典、艾滋病等疾病，只有核酸检测可 以提供有效的早期检测。目前应用

11、最广的免疫检测技术，免疫诊断所检测的是人体 内的某种特殊抗体，此抗体是由病原体侵入人体，刺激人体免疫系统后所产生的抗 体，一般在病原体侵入后的数天至两周，因此免疫诊断无法用作早期检测。致病遗传基因的普查：只有核酸检测能胜此任。在我国发病率高，危害性 大的遗传病有地中海贫血病等50余种，基因普查在我国尚属空白，急待开发。血源检查：在欧美发达国家，核酸检测已列入对许多体液传染病如艾滋 病、乙肝、丙肝等献血源的筛查，相信不久国内亦会跟上。转基因动植物检出：将保护中国不受转基因动植物倾销之害。个人基因图谱档案的建立：可对个人寿命、性格、行为、智力等因素有效 预测。目前此类服务因价格昂贵，只能提供给少数

12、富人，但随着技术的不断完善， 必将会成为大多数健康人大消费内容。总之，核酸检测已经具有了极为广阔的应用前景，而且还会不断开发出新的 用途。核酸检测技术的特点由於基因序列的物种特异性及高度稳定性（尤以DNA为甚），核酸检测技术比 传统的免疫检测技术具有不可比拟的准确度和灵敏度，例如能够检测出取样标本中 的单个病原体，是疾病传染早期唯一有效的检测方法，对於象非典这种尚无有效治 疗手段且传染性极强的传染病，早期诊断就成为防治的关键。此技术的可定量性也 是免疫检测无法达到的。核酸检测技术的原理核酸检测技术包括：标本样品（如血液、生物组织、粪便、痰等）的采集和处 理，核酸扩增，产物检测，及结果分析。其中

13、扩增与检测是关键步骤。扩增就是将 处理过的样品中的某种特定核酸（如乙肝病人血液中携带的乙肝病毒DNA），在人 工条件下，特异性地曾加某一段DNA分子的数量。扩增技术有以PCR为代表的多 种方法。产物检测则是通过某种特定方法，确认扩增出来的大量核酸就是检测目标（即 乙肝病毒DNA）。与扩增技术相比，目前检测方法则相对甚少。高效定量 （CAD）PCR的独特之处便是在检测方面有其突出贡献（详见后述）。3.2 PCR及相关检测技术PCR技术是目前世界上应用最广泛的核酸扩增方法，也是高效定量 （CAD）PCR中不可替代的关键步骤，故在此介绍一下PCR的技术背景。PCR技术原理PCR技术是以一条病源(如乙

14、肝病毒)DNA或RNA为模板，在人工控制的条件 下，通过DNA合成酶的作用，经过数十次温度变化周期，于试管中复制出数以亿 计的完全一样的DNA片段。如此众多的DNA复制片段使得核酸检测成为可能。与PCR相关的检测技术这些复制出来的众多DNA片段还要通过进一步检测，以确定是否真的是靶标 DNA。目前已有少数几种成熟的检测方法，但是只有Roche公司的荧光 (TaqMan)PCR方法达到了单一步骤均一闭合系统检测的水平。这里所说的单一步 骤均一闭合系统在检测中至关重要，下面详细介绍。核酸的单一步骤均一闭合系统检测首先讨论非单一步骤均一闭合系统检测。当PCR在一个闭合容器内完成后， 将此闭合容器打开

15、，取出众多的DNA复制片段，移至另一容器中进行检测，如分 子杂交，荧光染色，基因芯片等。此方法致命缺陷在于，一旦闭合容器被打开，大 量的DNA复制片段在取出过程中，造成实验室交叉污染。因为DNA十分稳定， 极难清洗，许多实验室因此而废弃，为行业中大忌，另外也花费更长时间。例如目 前国内已宣布的一种非典检测试剂以基因芯片为检测手段，就属于非均一闭合系统 检测。单一步骤均一闭合系统检测就是把检测染色试剂在PCR开始前即加入PCR反 应容器，使扩增和检测同时进行，扩增反应结束后，检测反应也同时完成，不必打 开容器，取出DNA。这样既消除了交叉污染，又节省了时间，还能在反应过程中 实时监测，从而达到定

16、量检测的效果。目前只有荧光(TaqMan)PCR技术既能达到 单一步骤均一闭合系统检测，又推出了商业产品。3.3 荧光(TaqMan)PCR 技术Roche公司以其强大的技术优势和雄厚的财务实力于几年前并购了 TaqMan公 司，紧接着推出了荧光(TaqMan)PCR产品，以其明显的优越性很快就成为了行业 的标准产品，在中国目前临床检验所用的核酸检测产品基本上都是此种产品。但该 产品也有其难以克服的缺陷。荧光(TaqMan)PCR 的特点迅速：整个过程在2小时内完成。清洁：不会对实验室造成交叉污染。定量：通过实时监测，定量检测病源体。检测方便：与探针联接的荧光标记物被新合成的DNA分子激活而发

17、出荧 光，由PCR仪上附设的荧光光度仪直接读数即可，数据分析也可以由机器附带的 电脑软件同时完成。荧光(TaqMan)PCR 的缺陷荧光(TaqMan)PCR必须使用一种特殊的DNA合成酶(Taq合成酶)，而这种酶的生 物活性有些天生难以克服的缺陷。该技术存在的所有问题基本都是由所用的酶系造 成的，主要有以下表现。3.3.2.1.热稳定性差。由於该技术使用的DNA合成酶的最适温度远低于PCR的反应温度，因此该 酶在反应后期容易降解而失去活性，造成信噪比很低。在标本样品中病源体含量低 时(100拷贝)，经常产生假阴性结果。假阴性会在临床上产生大量疑似病例，如今 年SARS流行时大量疑似患者的隔离

18、。这样就起不到早期检测的效果。3.3.2.2.准确性差由於荧光(TaqMan)PCR所用DNA合成酶的保真度和特异性差，导致大量复 制错误，降低了扩增反应的准确性，从而大大影响了定量检测的结果。对各种DNA合成抑制剂均敏感由於所用的DNA合成酶对多种抑制剂都过於敏感，因此荧光(TaqMan)PCR 对样品的前处理和实验室环境要求极高，稍有不慎就会使酶失活，扩增反应停止， 因而出现大量假阴性结果。中国大多数临床实验室条件普遍偏低，急需一种更适合 中国国情的高质量产品替代荧光(TaqMan)PCR,无模板合成多年来荧光(TaqMan)PCR的使用结果显示，其所用的酶生物活性不稳定，经 常有无模板聚

19、合反应，即合成出的DNA并非模板的复制物，由此产生多种意想不 到的结果，既有假阴性，也有假阳性，大大降低了其使用效果。价格昂贵荧光(TaqMan)PCR的专利为Roche公司拥有。该公司已宣布正在加紧开发以 荧光(TaqMan)PCR为基础的SARS检测试剂盒，并将于今年秋季投放中国市场。 它选择的时机说明了它要在今年冬季可能出现的SARS高峰期抢占中国SARS检测 市场的企图。而中国公司迄今已开发出的SARS检测产品绝大多数都是基於荧光 (TaqMan)PCR技术的，届时将在知识产权方面受到来自Roche的强大挑战。中国 要么向Roche支付天价的专利使用费，要么将本国SARS检测市场拱手让

20、给 Roche。在这种情况下，高效定量(CAD)PCR就成了中国人民可以用来对抗SARS 可能回潮的唯一有效的检测手段。在其他疾病的检测方面，中国也面临同样的问 题。3.4高效定量(CAD)PCR技术3.4.1.高效定量(CAD)PCR技术的特点高效定量(CAD)PCR是一种将PCR与单一步骤均一闭合系统检测巧妙结合起 来的最新核酸检测平台技术，是下一代的实时定量PCR。高效定量(CAD)PCR汲 取了荧光(TaqMan)PCR的优点，并对荧光(TaqMan)PCR的荧光染色检测方法及所 用的酶系做了革命性的改进。高效定量(CAD)PCR已于2002年申请了专利。鉴于荧光(TaqMan)PCR

21、所用的酶的缺陷，高效定量(CAD)PCR采用了一种全 新的DNA合成酶。这种酶具有热稳定性高，扩增保真度和准确性高，不易受核酸 合成酶抑制因子的影响，主要生物活性指标均稳定等明显优点。另外，因为此技术 的专利为中国人所拥有，所以不必要担心高昂的技术转让费。高效定量(CAD)PCR的基本原理与反应条件和荧光(TaqMan)PCR完全一样， 所以可以在目前流行的任何一种PCR仪上进行，不必开发新的配套仪器。3.4.2. PCR所用DNA合成酶的分析PabPfuUltraPfuTgoVentKlenTaqDeepVentDNA合成酶是PCR反应的关键环节，直接控制反应结果。目前世界上已开发 出许多种

22、，每一种的复制保真度和准确度大不相同。下表列出八种DNA合成酶的 相对准确度。Taq从表中可以看出，高效定量(CAD)PCR所用的酶，PfuUltra，比荧光 (TaqMan)PCR所用的酶，Taq，高出18倍。这从一个侧面说明为什么高效定量 (CAD)PCR有如此之高的准确度。此外，高效定量(CAD)PCR所用DNA合成酶具有极高的热稳定性，比荧光 (TaqMan)PCR所用合成酶高出30多倍，几乎不存在因高温而失活的问题，成为临 床检测精确测定的又一保证。3.4.3.高效定量(CAD)PCR与荧光(TaqMan)PCR的实验比较经过如此改进的高效定量(CAD)PCR与荧光(TaqMan)P

23、CR相比，各方面指标 都有显著提高。傲立昂公司进行了一系列的对照实验，以期比较二者的优劣，这里 仅以一最具代表性实验为例，详细证明高效定量(CAD)PCR的明显优势。3.4.3.1.实验条件实验设计：将荧光(TaqMan)PCR与高效定量(CAD)PCR两组反应，在除了各 自的酶系之外完全相同的条件下同时进行，分析两者的结果。实验仪器：ABI公司生产的实时PCR仪，型号为Prizm7000。该型号PCR仪 是目前最先进的国际标准荧光(TaqMan)PCR仪。PCR扩增模板：使用购买ABI公司的PCR仪时附送的标准人类基因组DNA，用量从10至10000拷贝。此模板是ABI公司用来演示其PCR仪

24、功能正常 与否的标准产品，具有最高的纯净度和稳定性。使用此模板，可以避免标本样品采 集与制备过程中可能出现的实验误差，避免了然后DNA合成酶抑制因子存在的可 能，创造了荧光(TaqMan)PCR的最佳反应条件。引物和探针：同样使用ABI公司PCR仪附送的、和标准模板配套的20倍浓 度引物、探针混合物，稀释使用，数据分析：使用与PCR仪配套的ABI公司分析软件，基准线为6至20周 期，阈值为0.20.DNA合成酶和其他试剂：荧光(TaqMan)PCR就使用PCR仪附送的配套标准 合成酶和试剂，以使荧光(TaqMan)PCR在最佳条件下进行。高效定量(CAD)PCR 则使用傲立昂公司自己生产的，专

25、门用于高效定量(CAD)PCR的高保真度DNA合 成酶系及配套试剂。综上所述，如此实验设计创造了荧光(TaqMan)PCR的最适合反应条件，以期 获得荧光(TaqMan)PCR的最佳结果。而在日常临床荧光(TaqMan)PCR检测实践中，由於实验条件千变万化，结果一般远远低于此处的最佳结果。我们的目的就是 要证明，在普通条件下高效定量(CAD)PCR的检测结果，可以轻易超过在最佳条件 下荧光(TaqMan)PCR的结果，那么在临床实践中，高效定量(CAD)PCR无疑比荧 光(TaqMan)PCR有着巨大优势。3.4.3.2.实验结果根据上述实验条件加样后，放入PCR仪，开启实时监测和自动分析，

26、经过约 两小时，PCR仪自动打印出实验结果，转贴于此处。荧光(TaqMan)PCR高效定量(CAD)PCR如图所示，上图为荧光(TaqMan)PCR的结果，下图为高效定量(CAD)PCR的 结果。右边为标准曲线，左边为荧光强度随时间变化的曲线，从左到右四条曲线， 代表四种DNA模板浓度，分别为10000，1000，100，10个DNA拷贝。3.4.3.3.结果分析由上述结果可以清楚地看到两种PCR技术的优劣。荧光强度曲线分析：典型的荧光强度曲线应该呈S型，在反应初期，因为没 有足够的DNA拷贝被复制出来，也就没有足够的荧光分子被激活，光吸收值保持 为零。中间部分光吸收值迅速上升，代表DNA拷贝

27、的快速增加。至反应末期，因 核苷酸分子逐渐被用尽，无法再合成出更多的DNA拷贝，光吸收值的上升也就逐 渐停止，曲线趋向平缓。由左上图可见，荧光(TaqMan)PCR的四条曲线随所用的DNA模板浓度降低 而越变越矮，最后一条甚至不足第一条峰值的一半，究其原因，主要是由所用 DNA合成酶的准确性和热稳定性过低造成的。用于准确性低，产生出大量非目标 DNA，为目标DNA设计的探针自然无法将其检测出来，导致曲线变低。而热稳定 性低使得DNA合成酶在反应后期基本失活，即使时间再长，也无法再合成出 DNA拷贝。另外，本实验全部是在最佳条件下进行，反应环境中不存在DNA合成 酶抑制因子。而临床实践中制备出来

28、的DNA模板，会含有多种此类因子，破坏酶 的活性，在低模板浓度条件下，极有可能造成光吸收值过低至不可检出的程度，导 致假阴性的出现。左下图则显示，与荧光(TaqMan)PCR不同，高效定量(CAD)PCR的四条荧光 强度曲线全部呈完美的S型，说明了该技术无与伦比的保真度、准确性和稳定 性。而且高效定量(CAD)PCR所用的DNA合成酶对各种抑制因子均不敏感，临床 制备出来的模板也不会影响反应结果。标准曲线分析：对照两组标准曲线的扩增效率(Efficiency)，可以从另一个角 度说明高效定量(CAD)PCR的优越。扩增效率是指PCR每一次扩增反应能够产生 多少个DNA拷贝。荧光(TaqMan)

29、PCR的扩增效率只有87.6%，即每一次扩增能产 生0.876个DNA分子，或者说，每一百次扩增反应，只有约88次能产生完整的DNA分子，而且这还是在最佳反应条件下的结果。与之对照，高效定量 (CAD)PCR的扩增效率几乎达到百分之百，比前者的最佳结果高出14%。可以预 测，在未来临床实际应用中，高效定量(CAD)PCR的扩增效率必将远远高于荧光 (TaqMan)PCR 的表现。以上分析清楚地表明，高效定量(CAD)PCR有着荧光(TaqMan)PCR无法比拟 的巨大优势，一旦应用于临床检验，必将对中国的医疗检测行业带来重大突破。回 顾过去数月中国抗击SARS的过程中，一直没有有效的临床实验室

30、检测手段，以致 大量疑似患者被长时间隔离。虽有多家研究单位和公司宣布成功开发出检测试剂 盒，但阳性检出率最高达到百分之七八十，有的甚至低到百分之十几。仔细分析起 来，如此高的假阴性比例，虽然有多种可能性，但荧光(TaqMan)PCR本身的固有 缺陷很可能是主要原因。3.4.4.高效定量(CAD)PCR技术的操作及产品高效定量(CAD)PCR可以应用在几乎所有疾病病源检测上，只要该疾病病源 体基因被部分解码。从被解码的病源基因序列中选出最具特异性的两个片段，各长 20至50硷基，分别合成出引物DNA(Primer)和检测探针(Probe)。然后从病源标本 中提取出病源DNA(若是RNA，须增加反

31、转录步骤)，加入引物，探针，酶，及核 苷酸，同置于封闭容器内，在PCR仪上开始反应，若仪器有实时监测功能，则反 应结束后，定量的检测结果同时打印出来，整个过程约2小时。高效定量 (CAD)PCR与特异引物/探针的关系类似枪与子弹的关系，高效定量(CAD)PCR便 是枪，众多特异性的引物/探针便是各种子弹，而病源体的DNA或RNA就是射击 的靶子。高效定量(CAD)PCR的应用产品包括以下几类：4.4.4.1.特异高效定量(CAD)PCR检测试剂盒(装好子弹的枪)此种试剂盒装有用于扩增、检测的所有试剂，包括合成及检测的酶系，核苷 酸，专为某种疾病设计的引物及荧光标记探针，和缓冲液。此种试剂盒可以

32、方便的 用于某种单一疾病的检测，适用于医院，血站和单一疾病大规模普查。广谱高效定量（CAD）PCR检测试剂盒（没装子弹的枪）此种试剂盒除没有引物和探针外，与特异试剂盒完全一样。引物和探针由操 作此产品的实验室根据自己的需要另外制备或单独采购，也很方便。此种试剂盒的 主要客户为大学，研究所，及从事研发的公司。引物和探针（子弹）即专门为广谱检测试剂盒设计、制备的引物和探针。利用现代生物信息系统 的最新成果，根据已经解码的病原体基因序列，引物和荧光标记探针很容易制备。 如今越来越多的病原体基因被解码，为高效定量（CAD）PCR的推广应用提供了便利 条件。PCR模板的制备（靶子）医生或护士从病人身上采

33、集样本（血、粪便、痰等），从中提取出DNA或RNA，用 于高效定量（CAD）PCR检测。不同的病原体有不同的标准制备方法。第四部分行业及市场分析谈到市场，必须先说明一点，即高效定量(CAD)PCR是一种适用于众多与检 测相关的领域的平台技术，而非一种只能用来检测某种特殊疾病的单一技术。在第 三部分中谈到了核酸检测技术的应用领域，包括病源检测，流行病、常见病的普 查，致病遗传基因的普查，血源检查，环保监测，和转基因动植物检出等。这些也 同样是高效定量(CAD)PCR的应用领域。下面仅以病源检测领域为主，分析高效定 量(CAD)PCR技术的市场前景。国际市场以各种PCR技术为代表的核酸检测方法是近

34、10年来迅速崛起的全新检测手 段。在此之前，免疫检测一直是临床检测的主要手段。免疫检测虽然具有速度快， 价格低等优点，但是在灵敏度、准确度、定量化等方面远逊于核酸检测。因而核酸 检测的市场在过去10年内以每年20%以上的速度递增，并在今后10年将保持 25%以上的年销售增长率。根据世界卫生组织预测，到2010年欧美市场年销售额 将达到170亿美元之巨。近年来对一些严重流行病的管理为核酸检测技术创造了难得的契机。例如 1999年美国国家食品医药管理局(FDA)正式要求全国血站及相关结构，必须使用核 酸检测技术测试所有血液及血液制品中的艾滋病毒和丙肝病毒，为拥有艾滋病毒和 丙肝病毒基因序列专利的美

35、国Chiron公司创造了天赐良机。该公司此二种试剂的 年销售量从1999年的700万美元，猛增到2001年的1亿2千多万，三年增加了 18倍。今年美国FDA又把西尼罗病毒列入了血液制品必须测试的名单，新的机会 还在不断被创造出来。目前中国药检局，乃至世界各国都还没有批准任何一个 SARS检测试剂加入临床实验，就是因为没有一个产品令人满意。如果高效定量 (CAD)PCR此刻脱颖而出，获得批准，其本身的商业价值和社会影响之大，难以估 量。高效定量(CAD)PCR是一种全新的、高技术含量很高的检测方法，除了能带 来巨大的销售量，还能产生很高的利润率。以美国为例，检测行业的跨国公司一般 税前利润率在1

36、0%到15%之间，而以核酸检测为主的瑞士 Roche公司的检测分公 司，税前利润率高达35%，甚至超过了它的制药分公司的利润率。除了市场飞速增长和高额利润之外，高度垄断是核酸检测的另一特征。众所 周知，医药行业是一个垄断程度相对较低的行业，而检测试剂则是其中的一个异 数，因其很大程度上依赖某一特殊的技术或专利。以PCR为例，作为核酸检测的 核心技术平台，自1991年被瑞士 Roche公司以3亿美元一次性买断专利后，为该 公司保持在核酸检测领域超过50%的市场份额达12年之久。目前Roche公司的荧 光(TaqMan)PCR以其方便、快捷的优势，几乎完全占有了中国的核酸检测市场。 一旦有一个各项

37、技术指标能全面超越它的新技术问世，此新技术必将取代荧光 (TaqMan)PCR的地位，成为新的垄断。国内市场国内的核酸检测市场自2001年国家药监局决定重新开放以来，经历了难以置 信的高速发展，市场规模已达几亿至十几亿元人民币，十几个厂家成为此行业的主 要成员，但是与欧美、日本等发达国家相比，还有很大差距。以美国为例，其诊断 试剂产品占整个医药市场的30%，而我国目前仅有10%不到。实际上，早期诊断 检测的消费可以避免或减少价格更高的疾病治疗费用，从整体上降低医疗费用。美 国国家疾病预防控制中心(CDC)的一份研究报告显示：对由Chlamydia造成的性传 染病来说，每一美元用在早期检测的花销

38、可以节省十一美元的治疗费用。毫无疑 问，中国的核酸诊断市场，还有巨大的发展空间。据卫生部门的统计，我国四种常见传染病每年的检测量为：梅毒6580万人次AIDS4680万人次丙型肝炎9080万人次乙型肝炎14080万人次另外还有献血员血液检测每年4000万人次。仅上述五项合计即达到每年4亿 人次。如此庞大的市场目前基本上是免疫检测产品的天下，而免疫诊断有其天然缺 陷。前面已经谈到，免疫诊断无法用作早期检测。另外，身体内抗体的数量与病原 体数量之间不存在正比关系，检测抗体的数量无法推测出病原体的数量，对许多疾 病，病原体数量的检测至关重要。例如艾滋病在鸡尾酒疗法过程中，必须定时监控 艾滋病毒在血液

39、中的数量。由此看来，核酸诊断将扮演越来越重要的角色，逐渐取 代免疫检测的垄断地位。美国FDA已正式要求使用核酸检测方法，筛查献血员及血液制品中的艾滋病 毒、乙肝病毒、丙肝病毒和西尼罗病毒。中国河南爆发的由卖血引起的艾滋病村令 人不寒而栗，而乙肝病毒携带者早已超过1亿，为严格控制这些传染病的流行，相 信中国政府不久也会推出献血检测的有关政策法规，这将创造出难得的商机。目前 中国尚不发达的核酸诊断市场的70%已为国外产品垄断，面对未来的巨大市场， 中国急需自己的优秀产品。第五部分：商业模式及赢利预测应用高效定量(CAD)PCR技术平台，生产新一代诊断试剂，可以根据市场需 求的迫切性而采取灵活的商业

40、模式。目前傲立昂公司已经成功开发出实验室水平的广谱诊断试剂盒，下一步则根 据市场需求及中方合作者的意见，选择一至三个疾病(如SARS、艾滋病和乙肝)为 目标，在一个月之内，小批量生产出特异诊断试剂盒，在临床样品(如血液、唾 液、粪便等)上试验，结果满意后，向国家药检局申报，同时准备大规模生产和广 告、促销等工作，一旦申报获得批准，立即全方位投入生产。假设第一期只选择艾滋病一个目标，根据卫生部统计资料，年检测量近四千 七百万人次，以最保守的估计，第一年只获得5%的市场份额，应当毫无问题，即 两百三十万份试剂。目前国内荧光(TaqMan)PCR的诊断价格为每人次二百人民币 左右，试剂部分约60元，

41、则年销售额可达一亿三千万元。据我们初步测算，每份 试剂成本在二十至三十元之间，若加大生产规模，成本还能下降。加上销售、开发 等其他支出，税前利润能达到30%至40%，与发展中国家同类产品利润率相当， 这样产品上市第一年即可获得三千万至五千万元的利润。以此为基础，以后每年增 加若干新的疾病为目标，充分利用高效定量(CAD)PCR的专利平台技术优势，逐渐 取得在中国核酸诊断领域的主导、领先地位，领导中国企业，共同面对外国产品的 竞争。因为高效定量(CAD)PCR是当今世界最领先的技术，中国企业完全可以以此 技术为先锋，进军国际核酸检测试剂市场。第六部分：合作方式及资金需求合作伙伴傲立昂公司目前正在

42、积极寻找共同开发中国核酸检测试剂市场的合作伙伴。对合作伙伴的要求如下：资金傲立昂是一家初创的小公司，要想开发中国的巨大市场，需要充足资金的支 持。根据不同的合作方式，资金量有所不同。产品小样生产能力高效定量(CAD)PCR平台技术虽已成熟，但是对每一种所选择的目标疾病， 仍需要相当条件的实验室及设备，以完成特异诊断试剂盒的小样生产。合作者最好 有过开发PCR产品的经验。6.1.3 .临床实验及产品申报医疗产品成功的一个关键因素是临床实验的结果和能否得到药检局批准。位 於美国的傲立昂公司很难拥有这方面的直接经验，需要国内同行的协助。大规模生产的能力至少有国内GMP认证，最好拥有国际CGMP认证。

43、产品营销及公司管理熟悉国内诊断试剂市场，有大规模营销、储运的经验。合作方式傲立昂公司希望与中方合作伙伴组成合资股份有限公司，提供与高效定量 (CAD)PCR有关的全部必需的专利、技术、知识，并积极参与合资公司的日常管 理。中方合作伙伴可以是一家有行业经验的大型实业公司，也可以由多家公司组 成，包括金融、科研、开发、生产、营销等领域。合资各方所占股份以及在未来合 资公司中的作用将在今后进一步交流、谈判中解决。傲立昂公司同时不排除其他有 效的合作、合资方式。资金需求因商业模式及合作方式的不同，资金的投入也不同。现以选择艾滋病单一目 标为例，分析资金的投入。第一步，在中国成立合资股份有限公司，由合资

44、公司董事会决策公司的商业 模式和发展方向。合资公司日常办公费用所需资金不多，此处忽略。第二步，由傲立昂公司在美国设计、组装出小规模实验室用艾滋病毒诊断试 剂盒，所需费用不超过100万元人民币，时间为一个月。然后在中国通过实验室检 测，需资金50万元，耗时一个月。若中方无现成的实验室，建立一个达到SOP认 证的实验室要耗资500万元人民币，但我们更倾向通过与其他有实验条件的研究单 位或企业合作解决。此步资金正常情况下为150万元，最多不超过650万元，时间 为两个月。第三步，临床实验阶段。完成艾滋病毒的临床检测实验约耗资300万元，而 后申报药检局正式批准。此步资金需要300万元，时间三到六个月

45、（药检局对艾滋 病有关产品有快速通道）。第四步，大规模生产。合作者最好有现成的生产线，这样就无需任何投资。 如果重新建一个符合GMP认证，年产1000万份核酸检测试剂的车间需资金2500 万元，包括生产工艺的开发；若建符合CGMP认证的同样生产线，需要4000万 元。第五步，销售队伍。首期销售队伍需要50人，以有效覆盖中国主要市场，以 每人10万元计，需资金500万元。如果合作者现有的销售队伍可以方便地转到核 酸诊断领域，此项资金也可以省去。第一年以后，合资公司已进入现金流的良性循 环，销售队伍的扩大将不在此考虑。第六步，广告促销。根据进一步的市场调研，由董事会决定。估计在1000万 至2000