正交设计法优化超声破壁提取麦冬皂苷D的工艺研究

1、正交方案法优化超声破壁提取麦冬皂苷D的工艺研究赵燕燕张向飞王丽娟王翠玲苏芳【摘要】目的通过不雅察麦冬细胞超声破壁时间和使用紫外分光光度法检测超声提取麦冬皂苷D含量两种观察指标来比力挑选麦冬皂苷D的提取条件，优化超声提取工艺。要领接纳正交方案法，别离以麦冬细胞破壁时间和接纳紫外分光光度法测定麦冬细胞破壁后皂苷D的含量为观察指标，观察乙醇浓度、温度、麦冬粒度和先期浸泡时间等因素对超声提取工艺的影响。通过显微镜不雅察，确定细胞破壁状态；通过对两种观察指标的实行结果举行比力，优化提取方案。结果使用紫外分光光度法测定麦冬皂苷D含量和通过不雅察麦冬细胞破壁所挑选的麦冬皂苷D最正确提取工艺的结果是同等的。在

2、观察因素中，麦冬皂苷提取工艺影响程度为：粒度乙醇浓度先期浸泡时间温度，超声提取最正确条件为：温度45，80目粒度，95%乙醇，先期浸泡12h。结论通过超声要领对中草药有用身分举行提取，其提取率与细胞破壁有关，使用正交实行阐发紫外分光光度法检测麦冬皂苷D含量和观察麦冬细胞破裂的结果是同等的，可通过不雅察麦冬细胞破壁结果来优化提取工艺，简化操纵。【关键词】超声；细胞破壁；麦冬皂苷D；正交方案法；工艺挑选麦冬phipgnjapniusThunb.Ker-Ga11为百合科沿阶草属植物，是常用滋阴中药，其味甘微苦，性微寒，归心、肺、胃经，具有养阴润肺、益胃生津、清心除烦的成果，传统中医重要将其用于肺、胃

3、、心阴不敷的病症。中草药中很多有用身分为细胞内身分，提取时必要破裂细胞壁，而现有的化学和机器要领破裂细胞很难起到抱负的破裂结果2，影响提取率。超声提取包罗机器破坏、热学及空化作用3，4，由于3个方面的综互助用，加快了细胞的破裂，进步了有用身分的提出率。接纳超声要领提取中草药中有用身分的文献已有很多511，但通过超声要领观察细胞壁破裂环境与提取服从的干系尚未见文献报道。本实行接纳正交方案法，别离以麦冬细胞破壁时间和接纳紫外分光光度法测定麦冬细胞破壁后皂苷D的含量为观察指标，观察了乙醇浓度、温度、麦冬粒度和先期浸泡时间等因素对超声提取工艺的影响，通过显微镜不雅察确定细胞壁破裂状态；通过对两种观察指

4、标实行结果的比力，优化提取方案。1仪器与质料UV2550SHIADZU紫外分光光度计日本岛津；KQ5200E型超声波洗濯仪昆山市超声仪器；lypusX40细胞生物显微镜日本lypus；RT-5型中药破坏机浙江缙云县超力机器厂；BS224S型电子阐发天平北京塞多利斯天平。麦冬，购自河北安国中药市场，产于四川，经断定本品为百合科沿阶草属植物麦冬的干草块茎；麦冬皂苷D尺度品含量98%，天津一方科技；高氯酸阐发纯，天津东方化工场。2要领与结果2.1正交实行方案及各因素程度设定拔取溶液温度A、麦冬粒度B、乙醇浓度和浸泡时间D为重要观察因素，各因素的程度设定见表1。正交实行接纳L934正交表12，见表2。

5、表1超声破裂提取麦冬皂苷D实行程度略2.5超声破壁提取麦冬皂苷D正交实行结果将麦冬药材破坏，过筛，得到80，40，20目麦冬粉末。别离称取麦冬粉末适量，用100l溶剂浸泡一按时间，在必然温度下举行超声破裂，每隔5in取样，显微镜不雅察，确定细胞破壁时间。将提取液抽滤，滤渣用少量蒸馏水冲冼，然后将滤液移入旋转蒸发器中蒸发至干；向瓶中参加5l的高氯酸，密塞，60水浴加热15in，冰水停顿反响，以高氯酸作空缺比较，接纳紫外分光光度法检测。别离接纳极差法和方差阐发法对正交实行的两个结果别离举行阐发，确定各因素对实行结果的影响程度见表23。方差阐发结果表白，通过紫外分光光度法检测麦冬皂苷D含量和使用不雅

6、察麦冬细胞破壁时间来挑选麦冬皂苷D最正确提取工艺结果是同等的。影响提取率的主次因素为BDA，即粒度乙醇浓度先期浸泡时间温度；最正确超声提取工艺为A2B12D2，即45条件下，80目粒度，95%乙醇，先期浸泡12h。表2超声破壁提取麦冬皂苷D正交实行方案直不雅阐发结果略图1超声前麦冬细胞图4010略图2超声后麦冬细胞图4010略表3超声破壁提取麦冬皂苷D正交实行方差阐发结果略本结果运用正交实行助手软件盘算，表现有明显性P0.053讨论3.1破坏粒度对细胞超声破壁的影响实行结果表白，破坏粒度为2060目时，超声2h后细胞外表无明显变革；在80目时，经超声0.5h麦冬细胞壁破裂，破坏粒度与细胞超声破

7、壁成正比，与正交实行阐发结果是同等的。3.2超声温度和先期浸泡时间对细胞破壁的影响在麦冬皂苷D超声提取历程中，温度因素和先期浸泡时间影响不明显。在现实提取操纵中，一样平常接纳较低的温度，以淘汰有用身分的落解，同时可以省去先期浸泡步伐，简化操纵步调。通过超声要领对中草药有用身分举行提取，其提取率与细胞破壁有关，使用正交实行阐发紫外分光光度法检测麦冬皂苷D含量和不雅察麦冬细胞破裂状态的结果是同等的，因此，可使用观察麦冬细胞破壁结果来优化提取工艺，简化操纵，低落本钱，缩减事情量。【参考文献】目的通过不雅察麦冬细胞超声破壁时间和使用紫外分光光度法检测超声提取麦冬皂苷D含量两种观察指标来比力挑选麦冬皂苷D的提取条件，优化超声提取工艺。要领接纳正交方案法，别离以麦冬细胞破壁时间和接纳紫外分光光度法测定麦冬细胞破壁后皂苷D的含量为观察指标，观察乙醇浓度、温度、麦冬粒度和先期浸泡时间等因素对超声提取工艺的影响。通过显微镜不雅察，确定细胞破壁状态；通过对两种观察指标的实行结果举行比力，优化提取方案。结果使用紫外分光光度法测定麦冬皂苷D含量和通过不雅察麦冬细胞破壁所挑选的麦冬皂苷D最正确提取工艺的结果是同等的。在观察因素中，麦冬皂苷提取工艺影响程度为：粒度乙醇浓度先期浸泡时间温度，超声提取最正确条件为：温度4