2022年分子生物学试题及答案一、名词解释.与_第1页
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1、分子生物学试题及答案 1翻译 (translation):以 mRNA为模板,氨酰 -tRNA 为原料直接一、名词解释 供体,在多种蛋白质因子和酶的参与下,在核糖体上将 mRNA分子1cDNA与 cccDNA:cDNA是由 mRNA通过反转录酶合成的双链 DNA;上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形 DNA。2密码子 (codon) :mRNA中碱基顺序与蛋白质中氨基酸顺序的对2标准折叠单位 :蛋白质二级结构单元 螺旋与 折叠通过 应关系是通过密码实现的, mRNA中每三个相邻的碱基决定一个氨各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构

2、块,此种确定的折叠类 基酸,这三个相邻的碱基称为一个密码子。型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类 3密码的简并性 (degeneracy):个氨基酸具有两个以上密码子型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。的现象。3CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白 CRP( cAMP receptor protein ),4同义密码子 (synonym codon):为同种氨基酸编码的各个密cAMP 与 CRP 结 合后 所 形 成的 复 合 物 称激 活 蛋 白 CAP( cAMP 码子,称为同义密码了。activated protein )5变偶假说 (wob

3、ble hypothesis):指反密码子的前两个碱基 (3 4回文序列 :DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限- 端) 按照标准与密码子的前两个碱基 (5 - 端 ) 配对,而反密码子中制性酶切位点。的第三个碱墓则有某种程度的变动,使其有可能与几种不同的碱基5micRNA:互补干扰 RNA或称反义 RNA,与 mRNA序列互补,可抑 配对。制 mRNA的翻译。6移码突变 (frame-shift mutation):在 mRNA中,若插入或删6核酶 :具有催化活性的 RNA,在 RNA的剪接加工过程中起到自 去一个核苷酸, 就会使读码发错误, 称为移码, 由于移码而造成的我催化的作

4、用。突变、称移码突变。7模体 :蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构 7,同功受体 (isoacceptor):转运同一种氨基酸的几种 tRNA称为颇为类似的局部区域 同功受体。8信号肽 :在蛋白质合成过程中 N 端有 1536 个氨基酸残基的肽 8反密码子 (anticodon):指 tRNA反密码子环中的三个核苷酸的段,引导蛋白质的跨膜。序列,在蛋白质合成过程中通过碱基配对,识别并结合到 mRNA的9弱化子 :在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的 特殊密码上。核苷酸序列。9多核糖体 (polysome) :mRNA同时与若干个核糖体结合形成的念10魔斑 :当细菌生长过

5、程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会 珠状结构,称为多核糖体。产生一个应急反应,停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信 核酸的生物合成号是鸟苷四磷酸 (ppGpp) 和鸟苷五磷酸 ( pppGpp)。PpGpp与 pppGpp ( 一) 名词解释的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批, 所以称他们是 1中心法则 (central dogma):生物体遗传信息流动途径。最初由超级调控子或称为魔斑。Crick(1958) 提出,经后人的不断补充和修改,现包括反转录和 RNA11 上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的 复制等内容。DNA序列, -10 区的 TATA、 -35

6、 区的 TGACA及增强子,弱化子等。2半保留复制 ( 简称复制 ) (semiconservative replication):12DNA探针 :是带有标记的一段已知序列 DNA,用以检测未知序 亲代双链 DNA以每条链为模板,按碱基配对原则各合成一条互补列、筛选目的基因等方面广泛应用。链,这样一条亲代 DNA双螺旋,形成两条完全相同的子代 DNA螺旋,13SD序列 :是核糖体与 mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。子代 DNA分子中都有一条合成的“ 新” 链和一条来自亲代的旧链,14单克隆抗体 :只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。称为半保留复制。15考斯质粒 :是经过人工构建的一种外源

7、 DNA载体, 保留噬菌体 3DNA 聚合酶 (DNA polymerase) :指以脱氧核苷三磷酸为底物,两端的 COS区,与质粒连接构成。按 5 3 方向合成 DNA的一类酶,反应条件:4 种脱氧核苷三16蓝- 白斑筛选 :含 LacZ 基因(编码 半乳糖苷酶)该酶能分 磷酸、 Mg+、模板、引物。DNA聚合酶是多功能酶,除具有聚合作解生色底物 X-gal(5-溴-4- 氯-3- 吲哚 - -D- 半乳糖苷 ) 产生蓝色,用外,还具有其它功能,不同 DNA聚合酶所具有的功能不同。从而使菌株变蓝。当外源 DNA插入后, LacZ 基因不能表达,菌株 4解旋酶 (helicase):是一类通过

8、水解 ATP提供能量,使 DNA双呈白色,以此来筛选重组细菌。称之为蓝- 白斑筛选。螺旋两条链分开的酶,每解开一对碱基,水解 2 分子 ATP。17顺式作用元件 :在 DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达 5拓扑异构酶 (topoisomerase):是一类引起 DNA拓扑异构反应的起到调控作用的基因元件。酶,分为两类:类型 I 的酶能使 DNA的一条链发生断裂和再连接,18Klenow 酶 :DNA聚合酶 I 大片段, 只是从 DNA聚合酶 I 全酶中 反应无需供给能量, 类型的酶能使 DNA的两条链同时发生断裂和去除了 5 3外切酶活性 再连接,当它引入超螺旋时,需要由 ATP供给能量

9、。19锚定 PCR:用于扩增已知一端序列的目的 DNA。在未知序列一 6单链 DNA结合蛋白 (single-strand binding protein ,SSB):端加上一段多聚 dG的尾巴,然后分别用多聚 dC 和已知的序列作为 是一类特异性和单链区 DNA结合的蛋白质。 它的功能在于稳定 DNA引物进行 PCR扩增。解开的单链,阻止复性和保护单链部分不被核酸酶降解。20融合蛋白 :真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出 7DNA连接酶 (DNA ligase):是专门催化双链 DNA中缺口共价连的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。接的酶, 不能催化两条游离的单链 DN

10、A链间形成磷酸二酯键。反应蛋白质的生物合成 需要能量。( 一) 名词解释 8引物酶及引发体 (primase primosome) :以 DNA为模板,以1 核糖核苷酸为底物,在 DNA合成中, 催化形成 RNA引物的酶称为引 24 诱 导 修 复 和 应 急 反 应 (induction repair and SOS 物酶及引物体。 大肠杆菌的引物酶单独没有活性,只有与其它蛋白 response)(SOS 修复 ) :由于 DNA受到损伤或复制系统受到抑制所质结合在一起,形成一个复合体,即引发体才有生物活性。诱导引起的一系列复杂的应急效应,称为应急反应。SOS反应主要9复制叉 (replic

11、ation fork):复制中的 DNA分子,末复制的部 包括两个方面: DNA损伤修复 (SOS修复或称诱导修复 ) 和诱变效应。分是亲代双螺旋, 而复制好的部分是分开的,由两个子代双螺旋组 SOS修复是一种易出差错的修复过程,虽能修复 DNA的损伤而避免成,复制正在进行的部分呈丫状叫做复制叉。死亡。但却带来高的变异率。10复制眼 结构 :在一段 DNA上,正在复制的部分形成眼状结 25DNA重组 (recombination):DNA重组是指在真核生物减数分裂构。复制眼在环状 DNA上形成的结构与字母 相象, 所以叫 结 过程中, 细菌细胞的转化中、 病毒转导中等发生的 DNA片段的交换构

12、。或插入。11前导链 (1eading strand):在 DNA复制过程中, 以亲代链 (3 26基因工程 ( 又称基因重组技术 )(gene/genetic engineering):5为模板时,子代链的合成 (5 3 )是连续的这条能连续 是将外源基因经过剪切加工,再插入到一个具有自我复制能力的载合成的链称前导链。体 DNA中,将新组合的 DNA转移到一个寄主细胞中,外源基因就可12 冈崎片段 (Okazaki fragment)、后随链 (1agging strand):以随着寄主细胞的分裂进行繁殖,寄主细胞也借此获得外源基因所在 DNA复制过程中,以亲代链 (53)为模板时,子代链的

13、合 携带的新特性。成不能以 3 5 方向进行,而是按 5 3 方向合成出许多 27转录 (transcription):由依赖于 DNA的 RNA聚合酶催化,以小片段, 因为是冈崎等人研究发现,因此称冈崎片段。由许多冈崎 DNA的一条链的一定区段为模板,按照碱基配对原则,合成一条与片段连接而成的子代链称为后随链。DNA链互补的 RNA链的过程。13半不连续复制 (Semidiscontinuous replication):在 DNA复 28 模 板 链 (template strand) 又 称 负 (-) 链 , 反 意 义 链制过程中,一条链的合成是连续的,另一条链的合成是不连续的,(a

14、ntisense strand):转录过程中用作模板的这条 DNA链,称模所以叫做半不连续复制。板链。14逆转录 (reverse transcription):以 RNA为模板合成 DNA的 29非模板链 (nontemplate strand) 又称正 (+) 链,编码链 (coding 过程。strand),有意义链 (sense strand):与模板链互补的那条 DNA15逆转录酶 (reverse transeriptase):催化以 RNA为模板合成 链,称非模板链。DNA 的逆转录过程的酶。 Temin(1960) 首次从劳氏肉瘤病毒中发 30不对称转录 (asymmetric

15、 transcription):因为 RNA的转录现。逆转录酶具有多种酶活性:依赖 RNA的 DNA聚合酶活性; 依赖 只在 DNA的任一条链上进行,所以把 RNA的合成叫做不对称转录。DNA的 DNA聚合酶活性, RNA水解酶活性, DNA合成方向 5 3。31启动子 (promoter):DNA链上能指示 RNA转录起始的 DNA序列合成时需要引物与模板。称启动子。16突变 (mutation):基因组 DNA顺序上的任何一种改变都叫做突 32转录单位 (transcription unit): RNA的转录只在 DNA的一个变。分点突变和结构畸变。片段上进行,这段 DNA序列叫转录单位。

16、17 点突变 (Point mutation):是指一个或几个碱基对被置换 33 内含子 (intron):真核生物基因中,不为蛋白质编码的、在(replacement),这种置换又分两种形式:转换 (transition) 一-mRNA加工过程中消失的 DNA序列,称内含子。指用一个嘌呤碱置换另一个嘌呤碱,一个嘧啶碱置换另一个嘧啶 34外显子 (exon) :真核生物基因中,在 mRNA上出现并代表蛋白碱;颠换 (transversion) 一 - 指用嘌呤碱置换嘧啶碱或用嘧啶碱置 质的 DNA序列,叫外显子。换嘌呤碱。35转录加工 (post-transcriptional process

17、ing):细菌中很多18结构畸变 :基因中的缺口、 或插入 (insertion) 或缺失 (deletion) RNA分子和几乎全部真核生物的 RNA在合成后都需要不同程度的加某些碱基造成移码突变使 DNA的模板链失去功能。工,才能形成成熟的 RNA分子,这个过程叫转录后加工。19诱变剂 (mutagen) :使基因组发生突变的物理、化学、生物因 36核内不均一 RNA(hnRNA):是真核生物细胞核内的 mRNA前体分素叫诱变剂。子,分子量较大,并且不均一,含有许多内含子。20修复 (repair):除去 DNA上的损伤, 恢复 DNA的正常结构和功 37RNA的复制 (RNA repli

18、cation):某些病毒 RNA既可以做为模能是生物机体的一种保护功能。板合成病毒蛋白质又可在 RNA复制酶 (RNA replicase) 的催化下,21光裂合酶修复 ( 又称光复活 )(photoreactivation):可见光将 以自身 RNA为模板,合成互补的 RNA新链,合成方向 5 3,这光裂合酶激活,它分解 DNA上由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体,一过程叫 RNA复制。使它们恢复成两个单独的嘧啶碱。二、填 空22切除修复 (excision repair):在一系列酶的作用下,将 DNA 1 DNA 的物理图谱是 DNA分子的( 限制性内切酶酶解)片段的分子中受损伤部分切除,以

19、互补链为模板, 合成出空缺的部分,使 排列顺序。DNA恢复正常结构的过程。2 RNA 酶的剪切分为( 自体催化)、(异体催化)两种类型。23重组修复 (recombination repair):DNA在有损伤的情况下也 3原核生物中有三种起始因子分别是(IF-1 )、( IF-2)和( IF-3)。可以复制, 复制时子代链跃过损伤部位并留下缺口,通过分子间重 4蛋白质的跨膜需要 ( 信号肽)的引导, 蛋白伴侣的作用是 (辅组,从完整的另一条母链上将相应的核苷酸序列片段移至子链缺口 助肽链折叠成天然构象的蛋白质)。处,然后用再合成的多核苷酸的序列补上母链的空缺,此过程称重 5启动子中的元件通常

20、可以分为两种:( 核心启动子元件)和( 上组修复。游启动子元件)。2 6分子生物学的研究内容主要包含( 结构分子生物学)、(基因表 20哺乳类 RNA聚合酶启动子中常见的元件 TATA、GC、CAAT所达与调控)、( DNA重组技术)三部 对 应 的 反 式 作 用 蛋 白 因 子 分 别 是 (TFIID )、(SP-1 ) 和7证明 DNA 是遗传物质的两个关键性实验是(肺炎球菌感染小( CTF/NF1 )。21RNA聚合酶的基本转录因子有、TF-A 、TF鼠 )、( T2 噬菌体感染大肠杆菌)这两个实验中主要的论点证据 -B、 TFII-D 、 TF -E 他们的结合顺序是:( D 、A

21、、 B、E )。是:( 生物体吸收的外源 DNA改变了其遗传潜能)。其中 TFII-D 的功能是( 与 TATA盒结合)。8hnRNA与 mRNA之间的差别主要有两点: ( hnRNA在转变为 mRNA 22与 DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用,转录因子与的过程中经过剪接,)、DNA结合的功能域常见有以下几种(螺旋 - 转角 - 螺旋 )、( 锌指( mRNA的 5 末端被加上一个 m7pGppp帽子,在 mRNA3 末端多 模体 )、( 碱性 - 亮氨酸拉链模体)。了一个多聚腺苷酸 (polyA) 尾巴 )。23限制性内切酶的切割方式有三种类型分别是(在对称轴 5 侧9蛋白质多亚基

22、形式的优点是(亚基对 DNA的利用来说是一种经 切割产生 5 粘端 )、( 在对称轴 3 侧切割产生 3 粘端 )(在对济的方法)、( 可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活 称轴处切割产生平段)。性的影响 )、(活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭)。24质粒 DNA具有三种不同的构型分别是:( SC构型 )、( oc 构10蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括(成核 )、(结 型 )、( L 构型)。在电泳中最前面的是( SC 构型 )。构充实 )、( 最后重排 )。25外源基因表达系统, 主要有( 大肠杆菌)、( 酵母 )、( 昆虫 )11半乳糖对细菌有双重作用;一方面(可以

23、作为碳源供细胞生 和( 哺乳类细胞表)。长 );另一方面 (它又是细胞壁的成分)。所以需要一个不依赖于 26转基因动物常用的方法有:(逆转录病毒感染法)、( DNA显微cAMP CRP的启动子 S2 进行本底水平的永久型合成;同时需要一 注射法 )、( 胚胎干细胞法)。个依赖于 cAMPCRP的启动子 S1 对高水平合成进行调节。有 G时 1蛋白质的生物合成是以 _ mRNA为模板,以 _ 氨酰 -tRNA _转录从( S2 )开始,无 G时转录从( S1 )开始 12DNA重组技 为原料直接供体,以 _核糖体 _为合成杨所。术也称为( 基因克隆 )或( 分子克隆)。最终目的是( 把一个生物

24、2生物界共有 _64_个密码子,其中 _61_个为氨基酸编码,起始体中的遗传信息 DNA转入另一个生物体)。典型的 DNA重组实验通 密码子为 _AUG _;终止密码子为 _ UAA _ 、 UAG _、 _UGA_。常包含以下几个步骤:3原核生物的起始 tRNA 以_ tRNAf _表示,真核生物的起始 tRNA提取供体生物的目的基因(或称外源基因) ,酶接连接到另一 DNA 以 tRNAi _表示,延伸中的甲硫氨酰 tRNA以 _tRNAm _ 表示。分子上(克隆载体) ,形成一个新的重组 DNA分子。4植物细胞中蛋白质生物合成可在 _核糖体 _、_线粒体 _将这个重组 DNA分子转入受体

25、细胞并在受体细胞中复制保存,这 和 _叶绿体 _三种细胞器内进行。个过程称为转化。5延长因子 T 由 Tu 和 Ts 两个亚基组成, Tu 为对热 _不稳定 _对那些吸收了重组 DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。蛋白质, Ts 为对热 _ 稳定 _蛋白质。对含有重组 DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。6原核生物中的释放因子有三种,其中 RF-1 识别终止密码子13、质粒的复制类型有两种:受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制 _UAA_、_UAG_;RF-2 识别 _UAA_、_UGA_;真核中的释放因子只有的称为 (严紧型质粒),不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为 _RF_一种。(

26、松弛型质粒)。7氨酰 -tRNA 合成酶对 _氨基酸 _和相应的 _tRNA_有高度的选14PCR的反应体系要具有以下条件:择性。a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA 引物(约 20 8原核细胞的起始氨基酸是 _甲酰甲硫氨酸 _,起始氨酰 -tRNA个碱基左右) 。是 _甲酰甲硫氨酰 -tRNA_。b、具有热稳定性的酶如:TagDNA聚合酶。9原核细胞核糖体的 _小_亚基上的 _ _16SrRNA_协助辨认起c、dNTP 始密码子。d、作为模板的目的 DNA序列 l0 每形成一个肽键要消耗 _4_个高能磷酸键, 但在合成起始时还15PCR的基本反应过程包括: (变性 )、( 退

27、火 )、( 延伸)三个阶 需多消耗 _1_个高能磷酸键。段。11肽基转移酶在蛋白质生物合成中的作用是催化 _肽键 _形成16、转基因动物的基本过程通常包括:和 _肽酰 -tRNA _ 的水解。将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中;12肽链合成终止时, _终止因子 _进人“A” 位,识别出 _终止密接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫;码子 _,同时终止因子使 _肽基转移酶 _的催化作用转变为 _水解作完成胚胎发育,生长为后代并带有外源基因;用。13原核生物的核糖体由 _30S_小亚基和 _50S_大亚基组成,利用这些能产生外源蛋白的动物作为种畜,培育新的纯合系。真核生物

28、核糖体由 _40S_小亚基和 _60S_大亚基组成。17杂交瘤细胞系的产生是由(脾 B)细胞与( 骨髓瘤)细胞杂 14. 蛋白质中可进行磷酸化修饰的氨基酸残基主要为 _Ser_、交产生的,由于(脾细胞 )可以利用次黄嘌呤, ( 骨细胞)提供 _Thr_ _、 _Tyr _。细胞分裂功能,所以能在 HAT培养基中生长。( 三) 填空题18随着研究的深入第一代抗体称为(多克隆抗体 )、第二代( 单 1Meselson-Stahl 的 DNA半保留复制证实试验中,区别不同 DNA克隆抗体 )、第三代( 基因工程抗体)。19目前对昆虫病毒的基 用 _同位素示踪 _方法。分离不同 DNA用_超速离心 _

29、方法,测定因工程改造主要集中于杆状病毒,表现在引入( 外源毒蛋白基因);DNA含量用 _紫外分光光度 _方法,( 扰乱昆虫正常生活周期的基因);( 对病毒基因进行修饰)。2DNA聚合酶 I(E coli) 的生物功能有 _聚合作用 _、_533 外切酶作用 _和_3 5外切酶 _作用。用蛋白水解酶作用 DNA 种 _环 _状双链 DNA,在基因工程中,它做为 _基因载体 _。聚合酶 I ,可将其分为大、 小两个片段, 其中 _大 _片段叫 Klenow 25hnRNA加工过程中,在 mRNA上出现并代表蛋白质的 DNA序列片段, 具有 _5 3 聚合酶作用 _和_3 5 外切酶 _作用,叫 外

30、显子 。不在 mRNA上出现,不代表蛋白质的 DNA序列叫 内含另外一个片段具有 _5 3外切酶 _活性。子 _。3在 Ecoli 中,使 DNA链延长的主要聚合酶是 _DNA聚合酶 _,( 四) 选择题它由 _7_亚基组成。 DNA聚合酶主要负责 DNA的 _修复 _作用。1蛋白质生物合成的方向是 ( ) 。4真核生物 DNA聚合酶有 _DNA聚合酶 _,_DNA聚合酶 从 C N端定点双向进行从 N 端、C端同时进行 从 NC 端_,_DNA聚合酶 _,_DNA聚合酶 _。其中在 DNA复制中 2不能合成蛋白质的细胞器是 ( )。起主要作用的是 _DNA聚合酶 _和_DNA聚合酶 _。线粒

31、体 叶绿体 高尔基体 核糖体5解旋酶的作用是 _使 DNA双螺旋打开 _,反应需要 ATP_提 3真核生物的延伸因子是 ( )。供能量, 结合在后随链模板上的解旋酶,移动方向 _ 5 3 _,EFTu EF一 2 EF-G EF 一 1结合在前导链的 rep 蛋白,移动方向 _ 3 5_。 4 真核生物的释放因子是 ( )。6在 DNA复制过程中, 改变 DNA螺旋程度的酶叫 _拓扑异构酶 _。RF RF一 1 RF一 2 RF一 3 7SSB的中文名称 _单链 DNA结合蛋白 _,功能特点是 _使 5 能与 tRNA反密码子中的 I 碱基配对的是 ( )。单链保持伸长状态 _。A、 G C、

32、 U U U、C、 A8DNA连接酶只能催化 _双 _链 DNA中的缺口形成 3,5 - 磷酸 6 蛋白质合成所需能量来自 ( )。二酯键,不能催化两条 游离的单链 间形成 3,5 - 磷酸二酯 ATP GTP ATP、 GTP GTP 键,真核生物 DNA连接酶以 _ATP _作为能源,大肠杆菌则以 NAD+ 作 7 tRNA的作用是 ( )。为能源, DNA连接酶在 DNA_复制 _、_修复 _、_重组 _中起作用。将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上 把氨基酸带到9DNA 生物合成的起始,需要一段 _ RNA _ 为引物,引物由 mRNA位置上 将 mRNA接到核糖体上 增加氨基酸的有效浓度

33、_引物 _酶催化完成, 该酶需与些特殊 _蛋白质 _结合形 8关于核糖体的移位,叙述正确的是 ( )。成_引物体 _复合物才有活性。空载 tRNA的脱落发生在“A” 位上 核糖体沿 mRNA的 310DNA生物合成的方向是 5 3 ,冈奇片段合成方向是 5 3 。 5 方向相对移动 核糖体沿 mRNA的 5 3 方向相对移动 11由逆转录酶所催化的核酸合成是以 _RNA _为模板,以 _三磷 核糖体在 mRNA上一次移动的距离相当于二个核苷酸的长度酸脱氧核苷酸 (dNTP) _为底物, 产物是 _与 RNA互补的 DNA链 _。9在蛋白质合成中,下列哪一步不需要消耗高能磷酸键 ( ) 。12D

34、NA突变主要分为 _点突变 _和_结构畸变 _两大类。肽基转移酶形成肽键 氨酰一 tRNA与核糖体的“A,位点结13诱变剂大致分为 _物理诱变剂 _、_化学诱变剂 _、_ 合核糖体沿 mRNA移动 fMet tRNAf 与 mRNA的起始密码子结合生物诱变剂 _三种类型。以及与大、小亚基的结合14RNA生物合成中, RNA聚合酶的活性需要 _ DNA _模板,10在真核细胞中肽链合成的终止原因是 ( ) 。原料是 _ ATP _ 、_ GTP _ 、 _ UTP _、_ CTP 。已达到 mRNA分子的尽头 具有特异的 tRNA识别终止密码子15大肠杆菌 RNA聚合酶为多亚基酶,亚基组成 2

35、_,称 终止密码子本身具有酯酶作用,可水解肽酰与 tRNA之是的酯键为_全 _酶,其中 _ 2 _亚基组成称为核心酶,功能 _合成 终止密码子被终止因子 (RF) 所识别RNA链 _; 亚基的功能 _ 保证 RNA聚合酶对启动子的特异识别 。11蛋白质生物合成中的终止密码是 ( ) 。16用于 RNA生物合成的 DNA模板链称为 _反意义链 _或_负链 _。UAA UAU UAC UAG UGA 17RNA聚合酶沿 DNA模板 3 5方向移动, RNA合成方向 512根据摆动假说,当 tRNA反密码子第 1 位碱基是 I 时,能够识3_。别哪几种密码子 ( ) 18真核生物 RNA聚合酶共三种

36、 RNA聚合酶 I 、 RNA聚合酶 、A C G T URNA 聚合酶 _,它们分别催化 _rRNA _、 mRNA _和 tRNA 13下列哪些因子是真核生物蛋白质合成的起始因子 ( )。5SrRNA _的生物合成。IF1 IF2 eIF2 eIF4 elF4A 19某 DNA双螺旋中,单链 5 ATCGCTCGA 3 为有意义链,14蛋白质生物合成具有下列哪些特征 ( )。若转录 mRNA,其中碱其排列顺序为 5 _ AUCGCUCGA _ 3。氨基酸必须活化 需要消耗能量 每延长一个氨基酸必须20;能形成 DNA-RNA杂交分子的生物合成过程有 _转录 _、_ 经过进位、转肽、移位、税

37、落四个步骤 合成肽链由 C端向 N 端逆转录 _。形成的分子基础是 _碱基互补配对 _。不断延长 新生肽链需加工才能成为活性蛋白质21DNA复制中, _前导 _链的合成是 _连续 _的,合成的方向 15下列哪些内容属于蛋白质合成后的加工、修饰 ( )。和复制叉移动方向相同;_后随 _链的合成是 _不连续 _的,合 切除内含子, 连接外显子 切除信号肽 切除成的方向与复制叉方向相反。N-端 Met 形成二硫键 氨的侧链修饰22一条单链 DNA(+)的碱基组成 A2l 、 G29,复制后, RNA聚 16蛋白质生物合成过程中,下列哪些步骤需要消耗能量 ( 合酶催化转录的产物的碱基组成是 _A21、

38、G29、U21、C29_。 )。23RNA聚合酶中能识别 DNA模板上特定起始信号序列的亚基是 _ 氨基酸分子的活化 70S 起始复合物的形成 氨因子 _ ,该序列部位称 _启动子部位 _。酰 tRNA进入核糖体 A 位 肽键形成 核糖体移位24在细菌细胞中, 独立于染色体之外的遗传因子叫 质粒 。它是一 17原核生物的肽链延伸过程有下列哪些物质参与 ( 4 )。11关于逆转录作用的错误叙述是 ( ) 。肽基转移酶 鸟苷三磷酸 mRNA 甲酰甲 以 RNA为模板合成 DNA需要一个具有 3-OH末端的引物 以硫氨酰 -tRNA EF-Tu、EF-Ts、 EF-G 5 3 方向合成,也能 3 5

39、 方向合成 以 dNTP为底物18.Shine-Dalgarno 顺序 (SD- 顺序 ) 是指 : ( ) 12体内参与甲基化反应的直接甲基供体是 ( )。在 mRNA分子的起始码上游 8-13 个核苷酸处的顺序 在 DNA Met S腺苷甲硫氨酸 甲酰甲硫氨酸 Met-tRNA 分子上转录起始点前 8-13 个核苷酸处的顺序 16srRNA3 端富含 13关于大肠杆菌 DNA聚合酶 I 的下列论述哪些是正确的 ( 嘧啶的互补顺序 启动基因的顺序特征 以上都正确 ) 。它是一个金属酶 它能从 3-OH端逐步水解单股 DNA19. 在研究蛋白合成中 , 可利用嘌呤霉素 , 这是因为它 : (

40、) 链 它在双螺旋区有 5 3 核酸酶活性 它需要 DNA模板使大小亚基解聚 使肽链提前释放 抑制氨基酰 上的游离 5-OH ;-tRNA 合成酶活性 防止多核糖体形成 以上都正确 14试将下列 DNA复制的有关步骤按正确的顺序排列 ( 20. 氨基酸活化酶: ( ) ) 。活化氨基酸的氨基 利用 GTP 作为活化氨基酸的能量来源 DNA指导的 RNA聚合酶合成 RNA引物 解旋蛋白打开 DNA催化在 tRNA 的 5磷酸与相应氨基酸间形成酯键 每一种酶特 双链 DNA指导的 DNA聚合酶合成的 DNA互补链 DNA连接异地作用于一种氨基酸及相应的 tRNA 以上都不正确 酶连接 DNA片段

41、核酸内切酶切除 RNA引物( 四) 选择题 15下列关于核不均一 RNA(hnRNA)的论述哪些是正确的 ( 1DNA 以半保留方式复制,如果一个具有放射性标记的双链 DNA ) 。分子, 在无放射性标记的环境中经过两轮复制。其产物分子的放射 它们的寿命比大多数细胞液的 RNA为短 在 3端有一个性情况如何 ( )。多聚腺苷酸 (polyA) 长尾,是由 DNA编码的 它们存在于细胞核的其中一半没有放射性 都有放射性 半数分子的两条 核仁外周部分 链内核苷酸不发生甲基化反应 有大约四分之链都有放射性 都不含放射性 三成份将被切除棹,以形成 mRNA 2关于 DNA指导下的 RNA合成的下列论述

42、除了哪一项都是正确的 16DNA复制的精确性远高于 RNA的合成,这是因为 ( ) 。( ) 。新合成的 DNA链与模板链形成了双螺旋结构,而 RNA链不能 只有存在 DNA时,RNA聚合酶才能催化磷酸二酯键的形成。 DNA聚合酶有 3 5 外切酶活力,而 RNA聚合酶无相应活力 脱在合成过程中,RNA聚合酶需要一个引物。 RNA链的延长方向是 氧核苷酸之间的氢键配对精确性高于脱氧核苷酸与核苷酸之间的5 3 。在多数情况下,只有一条 DNA链作为模板。配对 DNA聚合酶有 5 3外切酶活力,RNA聚合酶无此活性3下列关于 DNA和 RNA聚合酶的论述哪一种是正确的 ( ): 17有关逆转录酶的

43、论述哪些是正确的 ( )。RNA 聚合酶用核苷二磷酸而不是核苷三磷酸来合成多核苷酸链 具有依赖于 RNA的 DNA聚合酶活性 具有依赖于 DNA的 DNARNA聚合酶需要引物,并在生长的多核苷酸链的 5端加上核苷 聚合酶活性 不具备 5 3或 3 5核酸外切酶活性 酸 DNA聚合酶能在核苷酸链的两端加上核苷酸 所有 RNA 催化合成反应时,需要模板及 3-OH 引物和 DNA聚合酶只能在生长的多核苷酸链的 3端加上核苷酸。18下列哪几种突变最可能是致命的 ( )。4修补胸腺嘧啶有数种方法,其中之一是用 DNA连接酶、 DNA聚 腺嘌呤取代胞嘧啶 胞嘧啶取代尿嘧啶 缺失三个核合酶等催化进行,试问

44、这些酶按下列哪种顺序发挥作用 ( ):苷酸 插入二个核苷酸 DNA连接酶 DNA聚合酶核酸内切酶 DNA聚合酶核酸 19Crick 于 1958 年提出的中心法则包括 ( )。内切酶 DNA 连接酶 核酸内切酶 DNA 聚合酶 DNA 连接酶 核 DNA复制 RNA复制 转录 逆转录 翻译酸内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 20DNA生物合成中需要以下哪些酶参与 ( )。5DNA聚合酶在分类时属于六大酶类中的哪一种 ( ) 。引物酶 解旋酶 解链酶 DNA连接酶 DNA聚合酶合成酶类 转移酶类 裂解酶类 氧化还原酶类 21RNA聚合酶的核心酶由以下哪些亚基组成 ( )。6催化真核生物 mRN

45、A生物合成的 RNA聚合酶对 - 鹅膏蕈碱 ( ) 。不敏感 敏感 高度敏感 低度敏感 22RNA生物合成的终止需要以下哪些成分 ( )。7DNA复制中 RNA引物的主要作用是 ( )。终止子 因子 因子 dna 蛋白 亚基引导合成冈奇片段 作为合成冈奇片段的模板 为 23RNA与 DNA生物合成相同的是 ( ) 。DNA合成原料 dNTP提供附着点 激活 DNA聚合酶 需 RNA引物 以 3 5方向 DNA为模板 两条模板链同时8下列关于单链结合蛋白的描述哪个是错误的 ( ) 。合成 新链生成方向 53形成 3,5 - 磷酸二酯键与单链 DNA结合防止碱基重新配对保护复制中单链 DNA不被核

46、 24DNA的切除修复需要以下哪几种酶参与 ( ) 酸酶降解与单链 DNA结合,降低双链 DNA Tm值 以上都不对 光裂合酶 核酸内切酶 DNA 聚合酶 I DNA连接酶9紫外线对 DNA的损伤主要是 ( )。 RNA聚合酶引起碱基置换 形成嘧啶二聚体 导致碱基缺失发生碱基插 25目的基因的制备方法有 ( ) 入 DNA复制 RNA转录 mRNA逆转录 化学合成法 限l0 有关转录的错误描述是 ( ) 。制性内切酶切取只有在 DNA存在时,RNA聚合酶方可催化 RNA 需要 NTP做原料 26真核细胞 mRNA的加工修饰包括以下内容 ( )。RNA链的延伸方向是 3 5 RNA的碱基需要与

47、DNA互补 切除内含子,连接外显子 5端接上“ 帽子”35 端接上 CCA 3端添加多聚 (A) 尾 碱基甲基化 9RNA的生物合成不需要引物。( ) 27. 指导合成蛋白质的结构基因大多数是 ( ) 10大肠杆菌的 mRNA在翻译蛋白质之前不需要加工。( ) 单考贝顺序 中度重复顺序 高度重复顺序 11DNA聚合酶 I 切除引物 RNA属 3 5 外切酶作用,切除错回文顺序 以上都正确 配的核苷酸属 5 3 外切酶作用。( ) 28. 下面哪些因素可防止 DNA上的一个点突变表现在蛋白质的一级 12冈崎片段的合成需要 RNA引物。 ( ) 结构 ? ( ) 线形 DAN复制后, 先导链引物切

48、除后,无法延伸, 故 DNA链的一股 DNA的修复作用 密码的简并性 校正 tRNA 的作用 链缩短核糖体对 mRNA的校正 以上都正确 13转录时, RNA 聚合酶的核心酶沿模板 DNA向其 5端移动。29. 紫外线照射对 DNA分子的损伤主要是 ( ) ( ) 碱基替换 磷酸酯键断裂 碱基丢失 形成共价 14RNA不能做为遗传物质。( ) 连接的嘧啶二聚体 碱基插入 15以单链 DNA为遗传载体的病毒,DNA合成时一般要经过双链的30. 能编码多肽链的最小 DNA单位是 ( ) 中间阶段。 ( ) 顺反子 操纵子 启动子 复制子 转录子 16亚硝酸做为一种有效诱变剂,是因为它直接作用于 D

49、NA,使碱( 五) 是非题 基中的氨基氧化生成羰 ( 酮) 基,造成碱基配对错误。( ) 1DNA不仅决定遗传性状,而且还直接表现遗传性状。( ) 17大肠杆菌 DNA聚合酶只起聚合作用,不能校对错配碱基。2密码子在 mRNA上的阅读方向为 5 3 。( ) ( ) 3每种氨基酸都有两种以上密码子。( ) 18RNA也能以自身为模板合成一条互补的 RNA链。 ( ) 4一种 tRNA只能识别一种密码子。( ) 19真核生物的各种 RNA都必须经过剪切、 修饰才能成熟。 ( ) 5线粒体和叶绿体的核糖体的亚基组成与原核生物类似。( ) 20. 真核基因外显子是指保留在成熟 RNA中的相对应的序列

50、,不管6大肠杆菌的核糖体的小亚基必须在大亚基存在时,才能与 mRNA 它是否被翻译。( ) 结合。 ( ) 三、简 答7大肠杆菌的核糖体的大亚基必须在小亚存在时,才能与 mRNA 1 分别说出 5 种以上 RNA的功能?结合。 ( ) 转运 RNA tRNA 转运氨基酸;核蛋白体 RNA rRNA 核蛋白体组成8在大肠杆菌中,一种氨基酸只对应于一种氨酰-tRNA 合成酶。成 ;信使 RNA mRNA 蛋白质合成模板;不均一核 RNA hnRNA 成熟( ) mRNA的前体;小核 RNA snRNA 参与 hnRNA的剪接;小胞浆 RNA 9氨基酸活化时,在氨酰-tRNA 合成酶的催化下,由 A

51、TP 供能,scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分;消耗个高能磷酸键。( ) 反义 RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用;核酶 Ribozyme 10线粒体和叶绿体内的蛋白质生物合成起始与原核生物相同。RNA 有酶活性的 RNA ( ) 2原核生物与真核生物启动子的主要差别?11每种氨基酸只能有一种特定的 tRNA 与之对应。 ( ) 原核生物12AUG既可作为 fMet-tRNAf 和 Met-tRNAi 的密码子,又可作为 TTGACA - TATAAT-起始位点肽链内部 Met 的密码子。 ( ) -35 -10 13构成密码子和反密码

52、子的碱基都只是 A、 U、C、G。( ) 真核生物14核糖体大小亚基的结合和分离与 Mg2+,的浓度有关。 ( ) 增强子 -GC -CAAT-TATAA 5mGpp起始位点15核糖体的活性中心 “ A” 位和“ P” 位都主要在大亚基上。 ( ) -110 -70 -25 16. E.coli 中, DnaA与复制起始区 DNA结合,决定复制的起始。3对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面?( ) 天然质粒往往存在着缺陷,因而不适合用作基因工程的载体,必须 1 大肠杆菌 DNA生物合成中, DNA聚合酶 I 主要起聚合作用。对之进行改造构建:( ) a、加入合适的选择标记基因,如两个以上,

53、易于用作选择 , 通常是 2 原核生物 DNA 的合成是单点起始,真核生物为多点起始。抗生素基因。( ) b、增加或减少合适的酶切位点,便于重组。 3 DNA生物合成不需要核糖核苷酸。( ) c、缩短长度,切去不必要的片段,提高导入效率,增加装载量。4以一条亲代 DNA(3 5 )为模板时,子代链合成方向 5 d、改变复制子,变严紧为松弛,变少拷贝为多拷贝。3,以另一条亲代 DNA链 5 3)为模板时,子代链合成方向 e、根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件3 5 。 ( ) 4举例说明差示筛选组织特异 cDNA的方法?5在 DNA生物合成中,半保留复制与半不连续复制指相同概念。制备两种细

54、胞群体, 目的基因在其中一种细胞中表达或高表达,在( ) 另一种细胞中不表达或低表达,然后通过杂交对比找到目的基因。6在 DNA合成终止阶段由 DNA聚合酶切除引物。( ) 例如: 在肿瘤发生和发展过程中,肿瘤细胞会呈现与正常细胞表达7目前发现的逆转录酶大部分来自于病毒粒子。( ) 水平不同的 mRNA,因此,可以通过差示杂交筛选出与肿瘤相关的8依赖 DNA的 RNA聚合酶由紧密结合的 2 亚基组成,基因。也可利用诱导的方法,筛选出诱导表达的基因。其中 因子具有识别起始部位和催化 RNA合成的功能。 ( ) 5杂交瘤细胞系的产生与筛选?6 脾 B细胞 +骨髓瘤细胞,加聚乙二醇(PEG)促进细胞

55、融合,HAT培 达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。养基中培养(内含次黄嘌呤、氨基蝶呤、T)生长出来的脾 B-骨髓 10、说明通过胚胎干细胞获得转基因动物的基本过程?瘤融合细胞继续扩大培养。胚胎干细胞( embryonic stem cell,ES ):是胚胎发育期的胚细胞,细胞融合物中包含:可以人工培养增殖并具有分化成其它类型细胞的功能。脾- 脾融合细胞:不能生长,脾细胞不能体外培养。ES细胞的培养:骨- 骨融合细胞: 不能利用次黄嘌呤, 但可通过第二途 径利用叶酸 分离胚泡的内层细胞团进行培养。ES 在无饲养层中培养时会分化还原酶合成嘌呤。 氨基蝶呤对叶酸还原酶有抑制作用,故不能生长 为肌

56、细胞、 N细胞等多种功能细胞,在含有成纤维细胞中培养时 ES骨- 脾融合细胞:在 HAT中能生长,脾细胞可以利用次黄嘌呤,骨 将保持分化功能。细胞提供细胞分裂功能。可以对 ES进行基因操作,不影响它的分化功能可以定点整合,解6、利用双脱氧末端终止法(Sanger 法)测定 DNA一级结构的原理 决了随机整合的问题。向胚胎干细胞导入外源基因,然后植入到待与方法?孕雌鼠子宫,发育成幼鼠,杂交获得纯合鼠。原理是采用核苷酸链终止剂2,3,- 双脱氧核苷酸终止 DNA的延 1参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些 ?它们具有什么功能 ? 长。由于它缺少形成 3/5/ 磷酸二脂键所需要的 3-OH,一旦参入到

57、 mRNA:蛋白质合成的模板;tRNA:蛋白质合成的氨基酸运载工DNA链中,此 DNA链就不能进一步延长。根据碱基配对原则,每当 具;核糖体:蛋白质合成的场所;辅助因子:(a) 起始因子DNA聚合酶需要 dNMP参入到正常延长的 DNA链中时,就有两种可- 参与蛋白质合成起始复合物形成;(b) 延长因子 - 肽链的延伸能性,一是参入 ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止;二是 作用; (c) 释放因子一 - 终止肽链合成并从核糖体上释放出来。参入 dNTP,使 DNA链仍可继续延长,直至参入下一个 ddNTP。根据 2遗传密码是如何破译的 ? 这一方法,就可得到一组以 ddNTP结尾的长

58、短不一的 DNA片段。提示: 三个突破性工作 (1) 体外翻译系统的建立;(2) 核糖体结合方法是分成四组分别为 ddAMP、ddGMP、 ddCMP、ddTMP反应后,聚 技术; (3) 核酸的人工合成。丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出 DNA序列。3遗传密码有什么特点 ? 7、激活蛋白( CAP)对转录的正调控作用?(1) 密码无标点:从起始密码始到终止密码止,需连续阅读,环腺苷酸( cAMP)受体蛋白 CRP(cAMP receptor protein),cAMP 不可中断。增加或删除某个核苷酸会发生移码突变。与 CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白 CAP( cAMPactivated (

59、2) 密码不重叠:组成一个密码的三个核苷酸只代表一个氨基protein )。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时,CAP 合 酸,只使用一次,不重叠使用。成量增加, CAP 具有激活乳糖(Lac)等启动子的功能。一些依赖 (3) 密码的简并性: 在密码子表中, 除 Met、Trp 各对应一个密于 CRP 的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35 区序列特征 码外, 其余氨基酸均有两个以上的密码,对保持生物遗传的稳定性(TTGACA)。因此 RNA聚合酶难以与其结合。具有重要意义。CAP 的存在(功能) :能显著提高酶与启动子结合常数。主要表现 (4) 变偶假说:密码的专一性主要由头两位碱基

60、决定,第三位以下二方面:碱基重要性不大,故在与反密码子的相互作用中具有一定灵活性。 CAP 通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正 (5) 通用性及例外: 地球上的一切生物都使用同一套遗传密码,确定向 , 以便与 -10 区结合,起到取代 -35 区功能的作用。但近年来已发现某些个别例外现象,如某些哺乳动物线粒体中的CAP还能抑制 RNA聚合酶与 DNA中其它位点的结合,从而提高与 UGA不是终止密码而是色氨酸密码子。其特定启动子结合的概率。 (6) 起始密码子 AUG,同时也代表 Met,终止密码子 UAA、UAG、8、典型的 DNA重组实验通常包括哪些步骤?UGA使用频率不同。

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