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文档简介
1、泰乐祺科技推出奶及奶制品中黄曲霉素M1全套解决方案- 黄曲霉毒素主要存在于谷物、坚果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些与人类血液,动物饲料相关的产品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在,因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光,G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2),还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M,其中毒性最高的M的代谢物为4羟基化的产物Bs.黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物,也是一种强致癌物质。牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。AflatoxinM1的检测方法有高效液相色
2、谱法(HPLC),薄层层析法(TLC)等。而使用黄曲霉毒素M1ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时,可导致肝癌甚至死亡。高效液相色谱法:根据国标GB 5413.372010食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定HPLC条件:色谱柱C18柱,150*4.6mm,5um流动相乙腈水(25:75)荧光检测器:激发波长365nm,发射波长435nm;流速1.0ml/min进样量20ul出峰时间样品取样:真菌毒素分析的最大误差来源是样品的收集和取样过程,所以必需保证样品收集和取样具有代表性。样品前处理:分不
3、同样品牛奶 水浴加热至40 oC;离心用上清液过柱净化;乳粉和粉状婴幼儿配方食品:称取适量奶粉样品,用于蒸馏水中,混合均匀使其充分溶解,离心离心用上清液过柱净化;发酵乳(包括固体状、半固体状和带果肉型):称取适量奶粉样品,用于蒸馏水中,调节PH值至微碱性,高速均质器匀浆,水浴加热后离心,取上清液混合均匀使其充分溶解,离心离心用上清液过柱净化;干酪:称取适量切细或粉碎,过筛用加纯水溶解,高速均质器匀浆,超声提取后收集上清液,然后用石油醚进行两次萃取,然后用适宜的有机溶液萃取,取若干上清液过柱净化奶粉样品,用于蒸馏水溶解中,调节PH值至微碱性,水浴加热后离心,取上清液混合均匀使其充分溶解,离心离心
4、用上清液过柱净化;奶油:称取适量加甲醇水溶解,震荡后分页漏斗取下层溶液,蒸干后溶于水用于过柱净化。免疫柱净化步骤:完全符合GB/T 18980-2003取出免疫亲和层析柱, 恢复至室温,将上方塞子取出斜剪断,再插回亲和柱上。将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下。准确移取清澈液注入玻璃注射器;将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约2-3mL/min流速缓慢通过免疫亲和柱,直至23mL空气通过柱体;更换玻璃注射器与亲和柱连接,在注射器中加入10ml水,调节压力使水以约6mL/min流速清洗亲和柱。准确加入4mL色谱级乙腈洗脱,流速为1 mL/min 2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,
5、供检测。注:收集管中的洗脱液即为纯化后的样品,可直接用ELISA,荧光和高效液相等方法检测。HPLC 检测需要仪器与耗材产品名称说明规格黄曲霉素M1固体和液体标准品1ml/1mg 0.5ug/ml, 溶于乙腈PriboFast 黄曲霉素M1免疫亲和柱用于 样品前处理柱 分析黄曲霉素25/50 columns/boxPriboFast泵流操作架(8位)用于免疫亲和柱样品处理黄曲霉毒素检测专用玻璃纤维滤纸110,1.5um(100P)旋转蒸发仪酶联免疫检测法:符合国家标准酶联免疫检测法采用竞争ELISA,在微孔板上预包被黄曲霉毒素B1抗原,加入样本(或黄曲霉毒素M1标准品溶液)及辣根过氧化物酶标记
6、的黄曲霉毒素M1抗体。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素M1与预包被在板孔上的黄曲霉毒素M1抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素M1抗体。未结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色液,读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素M1抗原的含量成负相关。对照标准曲线,即可得出相应残留物黄曲霉毒素M1的含量。样品处理牛奶 直接离心取上清液用于检测奶粉及其他固状奶制品:需要溶解于去离子水中,离心取上清液用于检测试剂盒检测时间:30分钟30分钟交叉反应率:Aflatoxin M1100%Aflatoxin B18%Aflatoxin B210%Aflatoxin G17%Aflatoxin G25%ELISA 方法检测需要:PriboFast 黄曲霉毒素M1酶联免疫检测试剂盒 96孔(0.1 ppb 8.1ppb)雷勃半支灭菌移液器(彩色)量程:0.5-1
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