酸奶中酸度的测定.

1、-. z.酸奶中酸度的测定 实验目的 、熟练氢氧化钠标准溶液的配制和标定；、掌握直接滴定法测酸度的方法。 原理 酸度是指中和100 g样品所需0.1000 mol/L氢氧化钠标准溶液的体积mL。以酚酞为指示液，用0.1000 mol/L标准溶液滴定10 g试样至终点所消耗的氢氧化钠溶液体积，经计算确定酸奶的酸度。 试剂和材料 1、酚酞指示液：称取 0.5 g 酚酞溶于 75 mL 体积分数为 95 %的乙醇中，并参加 20 mL 水，然后滴加氢氧化钠溶液至微粉色，再参加水定容至 100 mL。 2、0.1 mol/L氢氧化钠标准溶液(250ml):准确称取1g氢氧化钠固体加水溶解稍冷却后转入2

2、50 ml容量瓶中定容，充分摇匀。3、酸奶 仪器 分析天平，碱式滴定管2个，200mL的锥形瓶2个，量筒1个，移液管1个，吸尔球，玻璃棒 操作步骤 1、氢氧化钠溶液的标定：、准确称取0.400.50g基准试剂邻苯二甲酸氢钾三份,置于锥形瓶中标号，、加2030 mL蒸馏水溶解后，加1滴酚酞指示剂。、用配制好的氢氧化钠溶液分别滴定至溶液呈微红色，30 s 内不褪色。记录每次消耗的氢氧化钠溶液的体积数，计算。2、酸度的测定：、称取 10 g准确到 0.001 g样品，置于 150 mL 锥形瓶中。、加 20 mL蒸馏水，混匀。、再参加2.0 mL 酚酞指示液，混匀。、用氢氧化钠标准溶液滴定至微红色，

3、并在 30 s 内不褪色。记录消耗的氢氧化钠标准溶液的体积数，重复三次。 结果计算 C2=C2氢氧化钠标准溶液的浓度，单位为摩尔每升mol/Lm1基准试剂邻苯二甲酸氢钾的质量，单位为克gV1滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积，单位为毫升204.22邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量，单位为摩尔每克g/mol 结果用算术平均值表示，结果保存三位有效数字。 试样中的酸度数值以表示，按下式计算： 式中： *2试样的酸度，单位为度； C2氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度，单位为摩尔每升mol/L； V2滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积，单位为毫升； m2试样的质量，单位为克g； 0.1酸度理论定义氢氧化钠的摩尔浓度，单位为

4、摩尔每升mol/L。 结果用算术平均值表示，结果保存三位有效数字。 9 所用试剂均为分析纯,所用水为蒸馏水或相当纯度的水。 混合酸硝酸：高氯酸=4:1。甲基红指示剂0.1水溶液。乙酸水溶液乙酸：水=1:4。 氨水溶液氨：水=1:4。草酸铵水溶液4。硫酸溶液1mol/L：取硫酸60 mL缓缓注入适量水中，冷却到室温，加水稀释到1000 mL，摇匀。高锰酸钾标准溶液0.02 mol/L分析天平等。 6.1.3 检测方法和步骤 1 试样溶液的制备：准确称量3.0005.000 g于250 mL烧杯中，少量水润湿后参加25 mL混合算消化液，置于电炉上加热消化。如未消化好而酸液过少时，取下放冷后再补加

5、几毫升混合酸消化液，继续加热消化，直至无色透明为止。加20 mL蒸馏水加热经除去多余的硝酸。待烧杯中的液体接近2-3 mL时，取下冷却。用蒸馏水洗并转移于100 mL容量瓶中，加蒸馏水定容到刻度线。取与消化样品一样量的混合消化液，按上述操作做试剂空白试验测定。 2 测定：用移液管准确移取5 mL上述消化液，置于是15 mL离心管中，加1滴0.1的甲基红指示剂、1mL4草酸铵水溶液、0.5 mL乙酸水溶液，用氨水溶液调节至微黄色，再用乙酸调节至微红色，静置0.5小时以上，使沉淀全部析出，小心倾去上清夜，然后加4mL1mol/L硫酸溶液于离心管中，转移到250mL三角瓶中，用50毫升水清洗离心管，

6、溶液合并于三角瓶中，摇匀，置于电磁搅拌器上加热到700-800，是沉淀溶解，用0.02 mol/L的高锰酸钾标准溶液滴定至微红色30秒不退色为终点。记录高锰酸钾标准溶液消耗量。 6.1.4数据记录及计算： 式中：*试样中钙含量，； V样品消耗高锰酸钾标准溶液体积，mL； Vo空白消耗高锰酸钾标准溶液体积，mL； V1用于测定样品液体积，mL； V2样品液定容总体积，mL； m试样质量，g。 计算结果表示到小数点后两位。 实验七、酸奶中氨基酸总量测定(G B / T 5009 . 5 -2010) 7.1.1检测原理 氨基酸具有酸性的-COOH基和碱性的-NH2基。它们相互作用而使氨基酸成为中内

7、盐， 10 当参加甲醛溶液时，-NH2与甲醛相结合，从而使其碱性消失，这样就可以使用强碱溶液来滴定-COOH基，并使用间接的方法测定氨基酸总量。 7.1.2检测仪器试剂 1 0.0100mo;/L氢氧化钠标准溶液 250ml锥形瓶2个 100mL量筒一个 5mL、 20mL移液管各一支 分析天平 碱式滴定装置一套 2 试剂1.40%中性甲醛溶液:以百里酚酞作指示剂，使用氢氧化钠将40%甲醛中和至淡蓝色 0.1%百里酚酞乙醇溶液 0.1%中性红50%乙醇溶液 7.1.3检测方法和步骤 准确吸取含氨基酸约20mg到30mg的样品溶液2份，分别置于250mL锥形瓶中，各加50mL蒸馏水，其中一份参加

8、3滴中性红指示剂，用0.1000mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至由红变为琥珀色为终点；另一份参加3滴百里酚酞指示剂及中性甲醛20mL，摇匀，静置1min，用0.100氢氧化钠标注溶液滴定至淡蓝色为终点。分别记录两次所消耗的碱液体积。 7.1.4数据记录及计算 氨基酸态氮%=(V2-V1)*c*0.014/m 其中：c氢氧化钠标准溶液的浓度 V1用中性红做指示剂滴定时消耗氢氧化钠的标准溶液的体积 V2用百里酚酞作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液的体积 m测定用样品溶液相当与样品的质量 0.014-氮的豪摩尔质量 实验八、乳糖的测定(直接滴定法(GB 5009.7-85) 8.1.1检测原理 样品

9、经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，费林氏液被复原析出氧化亚铜后，过量的复原糖立即将次甲基蓝复原，是蓝色褪色。根据样品消耗体积，计算复原糖量。 8.1.2检测试剂 费林氏甲液 费林氏乙液 乙酸锌溶液 亚铁氰化钾溶液 盐酸 葡萄糖标准溶液：1mg/ml 8.1.3检测方法和步骤 1、样品处理：吸取10g牛奶放入100ml容量瓶中，参加50ml水，摇匀并边摇边参加5ml乙酸锌溶液、5ml亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，然后混匀，静置30min过滤，弃去过滤液，滤液备用。 2、标定费林氏溶液：吸取5ml费林氏乙液和5ml费林氏甲液，放入150ml锥形瓶中， 11 加水10ml并加玻

10、璃珠2粒，然后在2min内加热至沸腾，从移液管滴加葡萄糖标准溶液至溶液蓝色变为淡黄色，记录消耗的葡萄糖标准溶液总体积，平行操作3份，取其平均值。计算每10ml费林氏液相当于葡萄糖的质量mg 3、样品溶液测定：吸取5ml费林氏乙液和5ml费林氏甲液于150ml锥形瓶中，加水10ml并加玻璃珠2粒，然后在2min内加热至沸腾，从移液管滴加处理后的牛奶，至溶液懒得变为淡黄色，记录消耗牛奶的总体积，平行操作3份，取其平均值。 8.1.4数据记录及计算 pv1v W= 100 Mv21000 W:样品中复原糖的含量以葡萄糖计，g/100g P:葡萄糖标准溶液的浓度，1mg/ml V1:滴定10费林氏溶液

11、甲、乙液各5消耗葡萄糖标准溶液的体积，ml V2:测定时平均消耗牛奶的体积，ml V:牛奶定容体积，ml M:样品质量，g 注意玻璃珠要回收，须戴手套取下加热过的锥形瓶。 参考文献 1 GB5413-85 凯氏定氮法测定乳制品中蛋白质含量S.：中国 标准，1985. 2 *玉葵. 凯氏定氮法测定牛乳中蛋白质含量的方法J.中国乳品 工业，19952：35-36. 3 *天吉. 乳与乳制品分析监测与执行标准实务全书M. 呼和浩 特：*人民， 2003， 262-268. 4高鸿, 分析化学前沿一化京:利学，1991 5陈炳稳，何广平，凌莫育应用化学，199 14(6): 75 6陈炳稳，何广平，*

12、小珠化学通报，1998(10): 43 7唐英章主编. 现代食品平安检测技术.学，2004 8 江小梅等.食品分析原理与检验.：人民大学，1990 9汪东风.食品质量与平安实验技术.十一五国家规划教材.：中国轻工业，2008 9 所用试剂均为分析纯,所用水为蒸馏水或相当纯度的水。混合酸硝酸：高氯酸=4:1。甲基红指示剂0.1水溶液。乙酸水溶液乙酸：水=1:4。氨水溶液氨：水=1:4。草酸铵水溶液4。硫酸溶液1mol/L：取硫酸60 mL缓缓注入适量水中，冷却到室温，加水稀释到1000 mL，摇匀。高锰酸钾标准溶液0.02 mol/L分析天平等。6.1.3 检测方法和步骤1 试样溶液的制备：准确

13、称量3.0005.000 g于250 mL烧杯中，少量水润湿后加入25 mL混合算消化液，置于电炉上加热消化。如未消化好而酸液过少时，取下放冷后再补加几毫升混合酸消化液，继续加热消化，直至无色透明为止。加20 mL蒸馏水加热经除去多余的硝酸。待烧杯中的液体接近2-3 mL时，取下冷却。用蒸馏水洗并转移于100 mL容量瓶中，加蒸馏水定容到刻度线。取与消化样品一样量的混合消化液，按上述操作做试剂空白试验测定。2 测定：用移液管准确移取5 mL上述消化液，置于是15 mL离心管中，加1滴0.1的甲基红指示剂、1mL4草酸铵水溶液、0.5 mL乙酸水溶液，用氨水溶液调节至微黄色，再用乙酸调节至微红色

14、，静置0.5小时以上，使沉淀全部析出，小心倾去上清夜，然后加4mL1mol/L硫酸溶液于离心管中，转移到250mL三角瓶中，用50毫升水清洗离心管，溶液合并于三角瓶中，摇匀，置于电磁搅拌器上加热到700-800，是沉淀溶解，用0.02 mol/L的高锰酸钾标准溶液滴定至微红色30秒不退色为终点。记录高锰酸钾标准溶液消耗量。数据记录及计算：式中：*试样中钙含量，；V样品消耗高锰酸钾标准溶液体积，mL；Vo空白消耗高锰酸钾标准溶液体积，mL；V1用于测定样品液体积，mL；V2样品液定容总体积，mL；m试样质量，g。计算结果表示到小数点后两位。实验七、酸奶中氨基酸总量测定(G B / T 5009

15、. 5 -2010) 检测原理氨基酸具有酸性的-COOH基和碱性的-NH2基。它们相互作用而使氨基酸成为中内盐，10 当参加甲醛溶液时，-NH2与甲醛相结合，从而使其碱性消失，这样就可以使用强碱溶液来滴定-COOH基，并使用间接的方法测定氨基酸总量。检测仪器试剂1 0.0100mo;/L氢氧化钠标准溶液 250ml锥形瓶2个 100mL量筒一个 5mL、20mL移液管各一支分析天平碱式滴定装置一套2 试剂1.40%中性甲醛溶液:以百里酚酞作指示剂，使用氢氧化钠将40%甲醛中和至淡蓝色 0.1%百里酚酞乙醇溶液 0.1%中性红50%乙醇溶液检测方法和步骤准确吸取含氨基酸约20mg到30mg的样品

16、溶液2份，分别置于250mL锥形瓶中，各加50mL蒸馏水，其中一份参加3滴中性红指示剂，用0.1000mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至由红变为琥珀色为终点；另一份参加3滴百里酚酞指示剂及中性甲醛20mL，摇匀，静置1min，用0.100氢氧化钠标注溶液滴定至淡蓝色为终点。分别记录两次所消耗的碱液体积。数据记录及计算氨基酸态氮%=(V2-V1)*c*0.014/m 其中：c氢氧化钠标准溶液的浓度 V1用中性红做指示剂滴定时消耗氢氧化钠的标准溶液的体积 V2用百里酚酞作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液的体积 m测定用样品溶液相当与样品的质量 0.014-氮的豪摩尔质量实验八、乳糖的测定(直接滴定法

17、(GB 5009.7-85) 检测原理样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，费林氏液被复原析出氧化亚铜后，过量的复原糖立即将次甲基蓝复原，是蓝色褪色。根据样品消耗体积，计算复原糖量。检测试剂费林氏甲液费林氏乙液乙酸锌溶液亚铁氰化钾溶液盐酸葡萄糖标准溶液：1mg/ml 检测方法和步骤1、样品处理：吸取10g牛奶放入100ml容量瓶中，参加50ml水，摇匀并边摇边参加5ml乙酸锌溶液、5ml亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，然后混匀，静置30min过滤，弃去过滤液，滤液备用。2、标定费林氏溶液：吸取5ml费林氏乙液和5ml费林氏甲液，放入150ml锥形瓶中，11 加水10ml并加玻璃珠2粒，然后在2min内加热至沸腾，从移液管滴加葡萄糖标准溶液至溶液蓝色变为淡黄色，记录消耗的葡萄糖标准溶液总体积，平行操作3份，取其平均值。计算每10ml费林氏液相当于葡萄糖的质量mg3、样品溶液测定：吸