高二生物学案52蛋白质的提取与分离(I)人教版选修一

1、高二生物教学案（52）姓名 班级 学号 课题血红蛋白的提取和分离 主备：毛银兰 审校：仲娟预 习 完 成学习目标：本课题通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理，为今后学习运用这些技术打下基础。学习重点和难点：学习重点：凝胶色谱法的原理和方法。学习难点：色谱柱制作、填料的处理、色谱柱的装填和样品的加入与处理。预习内容凝胶色谱操作 (1)凝胶色谱柱的制作 柱底部的制作 a选择合适的橡皮塞，中间打孔。 b在橡皮塞顶部切出锅底状_，在0.5 mL的_头部切下_长的一段，插入橡皮塞孔内，上部不得超出橡

2、皮塞的凹穴底面。 c剪尼龙网小圆片覆盖在_。用_的尼龙纱将橡皮塞_包好，插到玻璃管一端。 d色谱柱下端用移液管头部作_，连接一细的_，并用_控制尼龙管的_与_，另一端放入收集_的收集器内。 柱顶部的制作：插入安装了玻璃管的橡皮塞。 (2)凝胶色谱柱的装填 填充材料：交联葡聚糖凝胶。 方法：凝胶用_充分溶胀后，配成_，在与色谱柱下端连接的尼龙管打开的情况下，一次性缓慢倒入_。 装填完后，立即连接_，在_高的操作压下，用300 mL的20 molL的磷酸缓冲液充分_平衡凝胶12 h，使凝胶装填_。 (3)样品的加入和洗脱 加样前：打开流出口，使柱内凝胶面上的_下降到与_平齐，关闭出口。 加样：用_

3、将1 mL_的样品加到色谱柱的_。 加样后：打开_，使样品渗入凝胶床内，等完全进入后，关闭下端出口。小心加入缓冲液到_，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，进行洗脱，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每_收集一管，连接收集。 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳判断_的蛋白质是否达到要求，需要进行蛋白质的鉴定。巩固练习1初步分离血红蛋白的实验中用到的缓冲溶液为 ( )AH2 CO3一NaHCO3缓冲液 BNH4OHNH4Cl缓冲液CCH3 COOHCH3 COONa缓冲液 DH3PO4缓冲液2蛋白质提取和分离分为哪几步 ( )A样品处理、凝胶色谱操作、SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳B样品处理、凝

4、胶色谱操作、纯化 C样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定3 血红蛋白因含有什么物质而呈红色 ( )AO2 BCO CCO2 D血红素4下列操作正确的是（ ）A分离红细胞时采用低速长时间离心 B红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可C分离血红蛋白溶液是低速短时间离心 D透析时要用20mmol/l的磷酸缓冲液，透析12h5使用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的迁移速度完全取决于 ( )A电荷的多少 B分子的大小 C肽链的多少 D分子形状的差异6洗涤红细胞的目的是 ( )A去除血清 B去除杂蛋白 C除去血小板 D除去水7制作凝胶色谱柱时，橡皮塞顶部凹穴

5、内插入的移液管的部位及长度是 ( )A移液管头部5 cm B移液管尾部5 cm C移液管头部3 cm D移液管尾部3 cm8下列有关凝胶色谱法中样品的加入和洗脱的叙述中，正确的是 ( ) A先加入1 mL透析后的样品 B加样前要使缓冲液缓慢下降，全部流出C如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功D洗脱时可以用缓冲液也可以用清水9装填凝胶色谱柱时，下端的尼龙管应( ) A先打开后关闭 B关闭 C先关闭后打开 D打开10血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是 ( )A磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程 B血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和C防止血红蛋白被02氧化 D让血红蛋白

6、处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能11在盛有红褐色的Fe(OH)3，胶体的U形管的两个管口，各插一个电极，通直流电后，发现 阴极附近的颜色逐渐加深，这说明 ( )AFe(OH)3胶体粒子带正电荷，向阴极移动 BFe(OH)3胶体粒子带负电荷，向阳极移动CFe(OH)3胶体粒子带正电荷，向阳极移动 DFe(OH)3胶体粒子带负电荷，向阴极移动12凝胶色谱法操作正确的是（ ）A将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴 B将橡皮塞下部切出凹穴C插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面 D将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片13样品的加入和洗脱的操作不正确的是（ ）A 加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B加样后，打开下端出口，使