免疫学应用医学PPT课件

1、免疫学应用1本课要解决的一些问题体外Ag-Ab反应原理是什么？Ag-Ab反应有什么特点？现代医学免疫学检验应用有哪些？人工主动免疫与被动免疫的意义现代医学免疫治疗方法2免疫学应用免疫诊断抗原、抗体诊断技术细胞诊断技术免疫预防人工主动免疫人工被动免疫免疫治疗免疫调节增强、抑制免疫治疗3免疫诊断抗原、抗体诊断技术抗原和相应的抗体之间可以发生特异性结合，这种反应还能在体外进行（试管内或玻片上）。呈现出凝集、沉淀等可见的反应现象。抗原抗体的结合具有特异性，可以用已知抗体检测未知抗原，也可以用已知抗原检测未知抗体，来达到实验诊断或研究的目的。抗体主要存在于血清中，试验时一般都需要血清做试验材料，所以传统

2、上将体外的抗原抗体反应又称为血清学反应。4抗原、抗体诊断技术体外抗原抗体诊断技术血清学试验凝集反应：直接、间接（正向、反向、抑制）、协同沉淀反应：液相（比浊技术）、凝胶（扩散、电泳）补体参与的反应：溶血试验、补体结合试验中和反应：病毒NT、毒素NT标记技术酶免疫分析：ELISA荧光免疫分析：荧光抗体染色技术、荧光免疫测定放射免疫分析：放射免疫、免疫放射金免疫分析：斑点金免疫层析试验、斑点金免疫渗滤试验化学发光免疫分析：发光酶、化学发光、电化学发光其他：免疫印迹技术等5酶免疫分析6免疫比浊7化学发光免疫分析8流式细胞术9抗原抗体反应原理Ag决定簇和Ab分子超变区相互作用(相互吻合,具有互补性)，

3、分子表面特异的可逆的弱结合力在极短距离内才能发生。两个阶段：特异性结合阶段，这种结合是基于两种分子间的结构互补性和亲和性；快、几秒到几分。可见反应阶段：抗原抗体复合物在环境因素（电解质、温度、PH等）影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀等肉眼可见反应；慢、数分钟到数小时。物质基础：抗原表位与抗体高变区间的互补结合抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合抗原抗体之间的结合力亲水胶体转化为疏水胶体10抗原抗体反应特点特异性：抗原与抗体结合反应的专一性分子基础是抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性11抗原抗体反应特点两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血

4、清发生反应抗原抗体交叉反应示意图交叉反应（cross reactions）12抗原抗体反应特点前带(prezone)：抗体过量后带(postzone)：抗原过量等价带(equivalence zone)：抗原抗体比例合适 抗原抗体反应比例性示意图比例性（可见性）：抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系13抗原抗体反应特点阶段性第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见 第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、 沉淀和细胞溶解等现象 14抗原抗体反应特点可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性 影响因素：抗体对相应抗原的亲合力亲合力越高，结合越牢固，越

5、不易解离 环境因素对复合物的影响pH、离子强度15抗体混有SPAg抗体-SPAg抗体-SPAg分离剂一、抗原抗体结合二、分离抗体可逆性示意图抗体16抗原抗体反应类型反应类型实验技术结果判断凝集反应直接凝集试验观察凝集现象间接凝集试验同上抗球蛋白试验同上沉淀反应液相沉淀试验观察沉淀，检测浊度免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧补体参与的反应补体溶血试验观察测定溶血现象补体结合试验同上17抗原抗体反应类型反应类型实验技术结果判断中和反应病毒中和试验检测病毒感染性毒素中和试验检测外毒素毒性标记免疫反应荧光免疫技术检测荧光现象放射免疫技术检测放射性强度酶免疫技术检测酶底物显色发光免疫技术检测发光强度金免

6、疫技术检测金颗粒沉淀18抗原抗体反应类型按实际用途分为:免疫组织化学技术(immunohistochemistry technique,IHCT)免疫测定(immunoassay)按检测现象分为: 放射免疫技术 荧光免疫技术酶免疫技术 化学发光免疫技术金免疫技术按测定反应体系的物理状态分为: 均相免疫测定(homogenous immunoassay）非均相免疫测定(heterogenous immunoassay) 标记免疫技术：用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质等标记抗原或抗体，进行抗原抗体反应后，通过检测标记物对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析19凝集反应间接凝集反应载体颗粒：人

7、O型红细胞、绵羊红细胞、乳胶颗粒等20凝集反应反向间接凝集反应21凝集反应间接凝集抑制反应如：临床上乳胶凝集抑制试验妊娠早期诊断22沉淀反应单向琼脂扩散(1)抗体混于凝胶中(2)抗原加入孔内(3)抗原自由扩散标准品抗原浓度测定沉淀环直径抗原浓度(4)测定沉淀环直径(5)在标准曲线上查找相应抗原浓度23沉淀反应双向琼脂扩散(1)抗原抗体双向自由扩散(2)24小时出结果(3)呈现沉淀线或弧24免疫酶技术25免疫荧光技术26金免疫标记技术 兔抗鼠IgG鼠抗HCG单抗金标鼠抗HCG单抗尿液浸湿标志线 手持端斑点金免疫层析试验检测HCG27金免疫标记技术阳性弱阳性阴性无效质控线测试线尿样斑点金免疫层析试

8、验检测HCG28免疫细胞检测非特异性免疫细胞检测中性粒细胞运动、吞噬和杀菌功能检测巨噬细胞检测NK细胞检测特异性免疫细胞检测T细胞亚群、数量、功能检测B细胞功能检测 PHA刺激4872小时29免疫预防人工主动免疫是给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，刺激机体产生特异性免疫力。经人工主动免疫产生的免疫力出现较慢，但免疫力较持久，临床上多用于预防。死疫苗：伤寒、乙脑、百日咳、狂犬病及钩体病等疫苗活疫苗：活疫苗有卡介苗、麻疹、风疹、脊髓灰质炎等疫苗类毒素：白百破三联疫苗新型疫苗：亚单位疫苗:HBsAg、合成疫苗、基因工程疫苗。 30免疫预防人工被动免疫给机体输入抗体等效应物质，直接产生免疫作用人工被动免疫产生的免疫力出现较快，但免疫力不持久，临床上多用于临时治疗。抗血清免疫球蛋白细胞因子31免疫预防32免疫预防33免疫治疗利用免疫学原理，针对疾病发病机制，应用制剂人为调整免疫状态，达到到治疗或缓解疾病的目的。免疫调节免