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文档简介

1、冠科生物技术起草/修订者：起草/修订日期：部门：批 准日 期：审 阅（QA）：审 阅日 期：实验机构:批 准日 期：目的规范细胞冻存建库的操作与流程职责协商编写实验流程，部门员工遵守使用范围适用于本公司各种细胞的冻存和复苏内容/流程1)冻存标准及原则新入库细胞：每株细胞建库冻存总支数为 2-40 支，P2-3，20-30 支。库：P0-1，2-10 支；工作库再扩大冻存细胞：当项目所需细胞工作库库存量小于等于 10 支时，需选择质控确定的批次重新回冻建库，以确保库存总支数。子细胞库：根据特殊需要构建子细胞库用以特殊目的使用。【每管细胞具体冻存信息：细胞名称，细胞冻存液：基础培养基+5%DMSO

2、+FBS（ 30%）】冻存批次定义，细胞批次，冻存日期，冻存人。：GIBCO20%；太仓：国产2)第一次冻存标记为 P0，每冻存一次相继标记为 P1,2,3；实际传代次数以备注的形式标记。（贴壁细胞：每胰酶消化一次记为一代；悬浮细胞：每扩大培养体积一次记为一代）。例：P0(3)代表第一次冻存传代三次。质控每批冻存细胞都要进行如下检测：细菌检测，肉眼镜下检测即可冻存复苏活率检测，使用培养瓶复苏后第二天观察复苏状态（可选：台盼兰计数及计算活率，给出具体数值。）3)支原体检测特殊检测MycoAlert 试剂盒法 SOP （可选：DNA 染色法 SOP）种属交叉污染检测（COI）SOP ；种间交叉污染检测（STR）SOP4)冻存细胞使用程序降温盒放置-80 度冰箱过夜（-80 度继续保存时间范围 1-3 周），再放入液氮罐保存。液氮罐原则（表）。使用纸质版冻存信息，并在 CBIS 系统中录入（Cell-Deit Record EV）。参考文献无附件6.16.2细胞冻存表细胞复苏表： SOP-CB-005-F001： SOP-CB-005-F002版本更改

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