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文档简介
1、实验十、醋酸纤维薄膜电泳 血清蛋白分析和 人体动脉血压的测定精选ppt一、目的和要求 、了解电泳的原理,掌握醋酸 纤维薄膜电泳的操作 、学习动脉血压的原理,测定 收缩压与舒张压精选ppt二、实验原理 (一)电泳 在外界电场的作用下,生物大分子从电极一侧向另一侧移动的现象 1、蛋白质 由氨基酸通过肽键连接而成精选ppt精选ppt2、等电点 (isoelectric point, pI) 在一定的pH条件下,当其正、负电荷数相等时,整体便失去了所有电荷,这时的pH称为等电点(pI)。 氨基酸在等电点时电泳移动速度为零 在碱性环境中,蛋白分子 负电 阳极 在酸性环境中,蛋白分子 正电 阴极精选ppt
2、3、醋酸纤维素薄膜 (Cellulose Acetate Membranes) 采用醋酸纤维素为支持物的电泳方法叫醋酸纤维薄膜电泳,具有很高的流速和热稳定性以及非常低的吸附,将其溶于丙酮等有机溶剂中,即可涂布成均一细密的微孔薄膜精选ppt精选ppt4、血清蛋白电泳 将抽取的血液置入不加抗凝剂的试管中,使血凝固后,析出的上清液就是血清。 血清中主要含白蛋白、球蛋白。精选ppt 血清蛋白电泳是一种临床化验检查项目。 由于蛋白的绝大部分均由肝脏合成,所以,各种蛋白质的质与量的变化,除与免疫性疾病等有关外,主要反映肝脏的生理、病理情况精选ppt 血清中各种蛋白质的等电点均低于pH 7.0,在pH 8.
3、6的缓冲液中带负电,向正极移动,分子小且带电荷多者,则 移动速度较快精选pptpI %球蛋白 6.867.3 1220球蛋白 5.12 6.512 2球蛋白 5.06 49 1球蛋白 5.06 25清蛋白 4.645772精选ppt(二)血压测定 1、血压 是指血管内的血液对于单位面积血管壁的侧压,目前采用千帕(KPa)为单位。以前采用 mmHg 表示。 收缩压:收缩期动脉血压的最高值 (高压) 舒张压:舒张期动脉血压的最低值 (低压) 精选ppt2、血压测定方法 此次实验采用Korotkoff氏听诊法 正常的收缩压/舒张压 (mmHg) 收缩压: 130 mmHg 舒张压: 85 mmHg精选ppt无光泽面座位号1.50.5三、实验方法(一)电泳 1、薄膜的使用 在毛(无光泽)面划线,并写上座位号(如右图) 2、浸润精选ppt3、点样 (毛细管,一根,放回)4、电泳 点样面朝下 点样端置于负极5、染色 染色10min6、漂洗 脱色各5min(、) 最后,水洗精选ppt(二)侧血压 1、血压计的构造:减压计、袖带、 气球 2、安静时收缩压/舒张压 (120/80mmHg) 3、运动后的收缩压/舒张压精选ppt精选ppt四、实验
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