班级整的免疫终

1、临床免疫学检验11 检验三班（注：07，10 即考过的题，超敏反应和肿瘤标志物注意大题，一、参考！第 26 章没有整）1放射性核素：是指在自然条件下可发生自发性的转化，由一种放射性核素转变为另一种放射性核素，并同时射线，放射性核素的这一转变过程称为放射性衰变。放射化学纯度：标记物中结合在被标记物上的放射活性占该标记物总放射活性的百分比一般要求95%。可以用来反应标记物脱碘程度的指标4比放射活性：质量标记物中所含的放射性强度，也可理解为每分子被标记物平均所结合放射性原子数目，比放射活性较高可提高方法的灵敏度，但过高，将影响标记物免疫活性。免疫活性：标记物与抗原或抗体反应的能力，反映标记过程中被标

2、记物免疫活性受损情况。放射免疫分析（radioimmunoasssy RIA）：标记抗原（Ag*）和非标记抗原（Ag）与限量体 Ab）竞争性结合，Ag*和 Ag 与 Ab 具有相同的亲合力，结合的多少只取决于两者浓度的高低。多用于小分子半抗原的检测免疫放射分析（immunoradiometric assay IRMA）：以过量 125I 标记抗体与待测抗原进行非竞争性免疫结合反应, 用固相免疫吸附方法对 B 或 F 进行分离，以双位点法双抗体夹心法）最为常用，适合于大分子蛋白质的检测荧光(fluorescence):某些物质吸收激发光的能量后，电子从基态跃迁到激发态，当其回复至基态时，以发射光

3、形式出能量，称为荧光。荧光酶免疫测定：利用酶标记抗原或抗体，经抗原抗体反应后，借助酶反应荧光底物，经酶促反应生成稳定且高效的荧光物质，通过测定荧光强度确定待检抗原或抗体的含量。荧光显微镜技术:又称免疫荧光抗体技术(fluorescence antibody technique FAT)或荧光免疫组织化学技术，是以荧光显微镜为检测工具，用荧光素标记特异性抗体或抗，抗体，检测固定组织细胞上的抗原或中的抗体，常用于定性和定位检查的一门技术。11荧光荧光物质的荧光：荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间。各种不同。12时间分辨荧光免疫测定（time resolved fluoresce

4、nce immunoassay TRFIA ）：以镧系元素标记抗原或抗体，并与时间分辨测定技术相结合而建立起来的一种新型非放射性微量分析技术。荧光效率：荧光物质分子将光能转变成荧光的百分率，荧光效率= 发射荧光的光量子数（荧光强度）/吸收光的光量子数（激发光强度）。Stokes 位移：激发光谱和发射光谱的波长差，即 Stokes 位移。15荧光淬灭：荧光物质在某些理化（如紫外线照射、高温（20）、苯胺、酚、I-等）作用下，发射荧光减弱甚至消退称为荧光淬灭。16酶免疫技术：将酶高效催化反应的专一性和抗原抗体反应的特异性相结合的一种免疫标记检测技术。17酶结合物（conjugate）/酶标记物：通

5、过化学反应将酶与抗体或抗物。成的结合18(coating)：将抗原或抗体结合于固相载体上的过程。19封闭(blocking)：用 1%5%的牛白蛋白或 5%20%小牛再一次，1消除固相载体表面未结合的位点，消除非特异吸附。20钩状效应（hook effect）：双位点一步法中，当标本中的待测抗原浓度过高时，过量的抗原可分别与酶标抗体和固相抗体结合而抑制夹心复合物的形成，显色降低，使最终测定结果低于实际含量，严重时可出现假结果。均相酶免疫分析 ： 利用酶标记物与相应的抗原或抗体结合后，标记酶的活性会发生改变，不用分离结合和游离酶标记物，通过测定标记酶的活性的改变，而确定抗原或抗体的含量。酶联免疫

6、吸附试验 enzyme-linkedimmunosorbentassay （ELISA）（见问答 ）发光免疫分析:是将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。直接化学发光免疫分析：用化学发光剂（如吖啶酯）直接标记抗体(抗原)，与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成固相抗体-待测抗光剂标记抗体复合物，加入氧化剂（H2O2）和 NaOH 使成碱性环境，化学发光剂（吖啶酯）在不需要催化剂的情况下分解、发光 。2407）化学发光酶免疫分析（CLEIA）： CLEIA 是用参与催化某一化学发光反应的酶标记抗原或抗体，在与待测标本中相应的抗原(抗体

7、)发生免疫反应后，形成固相抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，经洗涤后，加入底物(发光剂)，酶催化和分解底物发光。电化学发光免疫分析（ECLIA）：是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原)，以三丙胺(TPA)为电子供体,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应，它包括电化学和化学发光两个过程。07）化学发光剂（发光底物）：在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式能量的化合物。28化学发光（chemiluminescence）：是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。某些物质(发光剂)在化学反应时，吸收了反应过程中所产生的化学能，使反应的产物分子或中间态分子中的电子跃迁到激发态，当

8、电子从激发态回复到基态时，以发射光子的形式出能量，这一现 象称为化学发光。29室内质量控制（法和步骤，连续评价本ernal Quality Control,IQC)：由工作的可靠性程度。，采取一定的方3010)质量控制（EQA）：为客观比较一的测定结果与靶值的差异，由外单位机构客观地评价的结果，发现误差并校正结果，使各的结果具有可比性。31急性时相反应蛋白：在急性炎症性疾病如手术、心梗、蛋白质浓度升高或降低，这些血浆蛋白质统称急性时相反应蛋白质3210)超敏反应:机体对某些抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时，发生的一种以机体生理功能紊乱或组织损伤为主的特异性免疫应答。变应原:引起超敏反应的

9、抗原物质型超敏反应：主要由特异性 IgE 抗体介导产生，其发生速度最快，常在第二次接触相同抗原后数分钟内即出现临床反应，其反应可发生于局部，亦可发生于全身，故又称速、等，某些血浆发型超敏反应（immediate hypersensitivity）。 35同型对照：即免疫荧光染色中的免疫球蛋白。非特异性荧光染色上又称过敏反应（anaphylaxis）。对照，选用同源性标记相同荧光素的非特异性本周蛋白：即尿中游离的免疫球轻链。固相膜免疫分析技术：是以微孔膜作为固相载体，利用液体可以流过微孔膜也可以通过毛细管作用在膜上向前移行的特性，以酶或胶体金等标记抗体（抗原），通过抗原抗体反应进行抗原或抗体检测

10、的快速检验方法。2胶体金免疫技术：是以胶体金作为示踪物的一种标记免疫学技术。该技术与膜载体配合，可形成特定的测定模式，进行定性或半定量的快速免疫检测。免疫印迹法 IBT（immunoblot test）：是一种将高分辨率凝胶电泳和固相膜免疫分析相结合的技术，具有分析容量大、敏感性高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法胶体金（colloidal gold）是金盐（HAuCl4）被还原成金原子后形成的金颗粒悬液。胶体金颗粒由一个基础金核及外层的双离子层稳定的胶体状态。，由于静电作用，颗粒之间相互排斥而呈41免疫组织化学技术（immunohistochemistry te

11、chnique）又称免疫细胞化学技术，是指用标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项免疫检测方法。42酶免疫组织化学技术:用酶标抗体与组织或细胞标本中的抗生反应，催化底物产生显色反应，通过显微镜观察标本中抗原的表达和分布位置，也可通过图像分析技术进行定量。4307）TORCH:临将 4 种引起染的病原微生物统称为 TORCH,其中）风疹，C（cytomeglalo vitus）TO 弓形虫（toxoplasma ）是弓形虫，R 是（rubella是巨细胞，H（hes）是单纯疱疹。肿瘤抗原（tumor antigen）:是指在肿

12、瘤发生、发展过程中新出现的或过度表达的抗原物质。肿瘤特异性抗原（tumor specific antigen, TSA）：是肿瘤细胞所特有的新抗原，它只表达于肿瘤细胞，而不存在于正常组织细胞。46肿瘤相关性抗原 ( tumor assoted antigen, TAA) ： 是指非肿瘤细胞所特有的，正常组织或细胞也可表达的抗原物质，但此类抗原在胞。细胞的表达水平远远超过正常细抗原提呈细胞（APC)：指能摄取、加工、处理抗原， 并提呈抗原给淋巴细胞的一类免疫细胞。肿瘤标志物（tumor marker，TM）是指在肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的，反

13、映肿瘤存在和生长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、多胺及癌产物等。肿瘤标志物可用于某些肿瘤的辅助49自身免疫耐受（autoimmune-tolerance）:正常情况下，机体免疫系统能识别“自我”，对自身组织成分不发生免疫应答反应，或仅产生微弱的免疫应答，此为自身免疫耐受。50自身抗体(autoantibody):针对自身组织、细胞及细胞内成分的抗体。5110）自身免疫(autoimmunity):是指机体免疫系统针对自身成分发生免疫应答反应，出现自身抗体或致敏淋巴细胞的现象。52自身抗体(autoantibody):针对自身组织、细胞及细胞内成分的抗体。5307）自身免疫性疾病(a

14、utoimmune disease，AID)：在内因与外因的共同作用下，机体的自身免疫应答失控，反应过度，直接或间接破坏自身组织，并引起相应症状的一类疾病病变或临床5407）类风湿因子（rheumatoid factor, RF）：为抗变性 IgG Fc 的自身抗体，主要是 IgM型55混合性结缔组织病（mixed connective tie disease， MCTD）：由超敏反应引起的自身免疫性疾病；由型超敏反应引起的自身免疫性疾病；由 T 细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病。当两种或两种以上的自身免疫病出现混合的临床表现时，称为混合3性结缔组织病（mixed connective

15、tie disease， MCTD）。56重链病（Heavy chain diseases）是突变的浆细胞不能产生轻链或所产生的重链异常不能与轻链装配,导致蛋白重链所导致的疾病。重链过剩，致使和尿中出现大量游离的无免疫功能的免疫球57轻链病（Light chain diseases）是变异的浆细胞产生大量的异常轻链，过多的轻链在肾脏和其它内脏组织的沉积58M 蛋白（monoclonal protein）： B 淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白。临种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等 。多见于多发性骨髓瘤、59冷球蛋白（cryogl

16、obulin,GC）： 在低温(0-4)下发生沉淀，加温(37)后又复溶的免疫球蛋白。60免疫缺陷病（immunodeficiency disease，IDD）:指由遗传或其他原因造成的免疫系统发育或免疫应答而导致的一种或多种免疫功能缺陷或不全所致的临床综合征。免疫系统中任何一个成分的缺失或功能不全导致免疫功能。61性免疫缺陷病（primary immunodeficiency diseasDD）：又称性免疫缺陷病, 是指由遗传或免疫系统发育不良而造成免疫功能所致的疾病 继发性免疫缺陷病（seconday immunodeficiency disease，SIDD）,又称获得性免疫缺陷病（AI

17、DD）是后天造成的、继发于某些疾病或使用药物后产生的免疫缺陷病。62移植抗原：移植抗原是指能引起移植排斥反应的细胞膜表面分子称为移植抗原或组织相容性抗原。二、问答07）1比较放射免疫分析和免疫放射分析。2在标记抗体时，作为标记物的荧光符合哪些要求？能与蛋白质形成共价键，结合后不易解离，未结合的易清除荧光效率高，且与蛋白结合后仍保持较高的荧光效率荧光色泽与背景的色泽对比度高4与蛋白结合后不影响蛋白的免疫活性标记方法简单，安全无毒标记物稳定，易于保存3荧光抗体鉴定的指标有哪些？1）荧光素与蛋白结合比率：荧光素（F）结合到抗体蛋白（P）上的量，F/P 越大，表明抗 体分子结合的荧光多，荧光抗体染色以

18、 1.5 为宜，活细胞染色以 2.4 为宜 2）抗体效价：双扩，1:163）抗体特异性：吸收试验、抑制试验4简述时间分辨荧光免疫测定的方法学评价。灵敏度高：最小检出量 10-18mol/L分析范围宽：45 个数量级标记结合物稳定：有效使用期长测量快速，易自动化无发射性污染易受污染，本底增高5简述荧光偏振免疫测定的基本原理。荧光物质经单一平面的偏振光（蓝色光，485nm）激发后，可吸收光能跃入激发态，在其恢复至基态时，能量并发射出单一平面的偏振荧光（绿色光，525nm550nm） 。偏振荧光强度与荧光物质分子在液相中转动的速度呈反比，即分子大（AgF-Ab）转动速度慢，荧光强度大，分子小（AgF

19、）转动速度快，荧光强度小荧光偏振免疫测定应用抗原抗体竞争反应的原理，若待检抗原多，则 AgF-Ab 少，AgF 多，偏振荧光弱，即待检抗原含量与偏振荧光强度成反比6简述荧光免疫测定的方法种类及临床应用。时间分辨荧光免疫测定：蛋白质、激素、药物、肿瘤标记物、病原体抗原/抗体等荧光偏振免疫测定：药物、维生素、激素等小分子抗原物质荧光酶免疫测定：抗体、细菌和毒素抗原、激素、肿瘤标志物等7简述荧光显微镜技术的临床应用。病原体检测（抗原、抗体）、自身抗体检测、免疫病理检测、细胞表面抗原和受体检测时间分辨荧光免疫测定的原理及方法类型原理：以镧系元素标记抗原或抗体，并与时间分辨测定技术相结合而建立起来的一种

20、新型非放射性微量分析技术。方法：双抗体夹心法、 固相抗体竞争法、固相抗原竞争法荧光酶免疫测定的原理及方法类型原理：利用酶标记抗原或抗体，经抗原抗体反应后，借助酶反应荧光底物，经酶促反应生成稳定且高效的荧光物质，通过测定荧光强度确定待检抗原或抗体的含量。方法：双抗体夹心法、双抗原夹心法、固相抗原竞争法8常用酶及底物1）辣根过氧化物酶 （horseradishperoxidase,HRP）包括糖蛋白（主酶）：与酶活性无关，亚铁血红素（辅基）：酶的活性基团，是 ELISA 中应用最广的标记酶。叠氮钠、 化物、5氟化物、强酸可使 HRP 灭活底物：DH2+H2O2供氢体底物：DH2 D+2H2O邻苯二

21、胺（OPD）：橙黄色棕黄色四甲基联苯胺（TMB）：蓝色黄色，492nm450nm最常用受氢体： 专一性高，过氧化物（H2O2，小分子醇过氧化物，尿素过氧化物）碱性磷酸酶（ALP）酶免疫技术中使用磷酸盐缓冲液对硝基酚（黄色） 底物：对-磷酸酯（ pNPP ） 405nm半乳糖苷酶（-Gal）血标本中缺乏，不易受内源性酶的干扰，用于均相酶免疫测定。底物：4-甲基伞形酮-D 半乳糖苷（4MUG） 4MU9均相酶免疫分析的原理、常见技术类型及应用原理：利用酶标记物与相应的抗原或抗体结合后，标记酶的活性会发生改变，不用分离结合和游离酶标记物，通过测定标记酶的活性的改变，而确定抗原或抗体的含量。方法：酶放

22、大免疫分析技术 （EMIT）、克隆酶供体免疫分析 （CEDIA）应用：主要用于小分子激素、药物等半抗原的检测10ELISA 的基本原理 、各种方法学类型的原理及应用原理：把抗原和抗体结合到某种固相载体的表面，并保留其免疫活性，即形成固相抗体或抗原；将抗原或抗体与酶连接形成酶标抗原或抗体，既保留了免疫活性又保留了酶的活性；测定时将待测样品和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体反应形成固相化抗原抗体-酶复合物；用洗涤的方法将固相载体上形成的抗原抗体-酶复合物与其他物质分离，结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定比例；加入底物后，底物被固相载体上的酶催化生成有色产物，通过

23、检测有色底物的量即可对样品中的待测物质定性和定量检测。检测抗原的方法：双抗体夹心法（测抗原最常用的方法，只适用于：二价及二价以上的大分子抗原）两步法一步法：（选择针对抗原分子上两个不同且空间距离较远的抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体）6竞争法测抗原（测小分子抗原或半抗原）用特异性抗体固相载体，然后同时加入待测抗原和酶标记的抗原，待测样品中的抗原和酶标记的抗原竞争性的结合固相载体上的特异性的抗体结合，温浴一定时间后洗涤，加入底物显色。检测抗体的方法 间接法（最常用）酶标记的抗抗体（酶标二抗）检测与固相抗原结合的受检抗体2）双抗原夹心法3）竞争法（竞争法测 HBcAb 和 HBeA

24、b 对照P85 页文字看）4）捕获法 （测 IgM 类抗体）11直接化学发光免疫分析的原理用化学发光剂（如吖啶酯）直接标记抗体(抗原)，与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫7反应后，形成固相抗体-待测抗光剂标记抗体复合物，加入氧化剂（H2O2）和 NaOH使成碱性环境，化学发光剂（吖啶酯）在不需要催化剂的情况下分解、发光 。由集光器和光电倍增管接收时间内所产生的光子能，这部分光的积分与待测抗原的量成比例，可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。化学发光免疫分析反应原理（双抗体夹心法）12 化学发光酶免疫分析的原理CLEIA 是用参与催化某一化学发光反应的酶标记抗原或抗体，在与待测标本中相应的抗原

25、(抗体)发生免疫反应后，形成固相抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，经洗涤后，加入底物(发光剂)，酶催化和分解底物发光。由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大，再把它们传送至计算机数据处理系统，计算出测定物的浓度。辣根过氧化物酶标记化学发光免疫分析示意图碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图10）13电化学发光免疫分析的原理是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原)，以三丙胺(TPA)为电子供体,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应，它包括电化学和化学发光两个过程斑点金免疫层析试验（DICA）:DICA 是将胶体金标记技术和蛋白层析技术相结合，以 NC膜为载体的快速固

26、相膜免疫分析技术(具体原理看实验)14流式细胞仪的数据参数前向散射光 FS：反映细胞的大小侧向散射光 SS：反映细胞的内部结构复杂程度荧光 FL：反映细胞被染上的荧光数量多少24化学发光的条件:1,反应必须提供足够的能量（170300KJ/mol)2,化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发，且有足够的光量子产率25流式细胞仪的数据参数前向散射光 FS：反映细胞的大小侧向散射光 SS：反映细胞的内部结构复杂程度荧光 FL：反映细胞被染上的荧光数量多少10)15流式细胞术有哪些临床应用价值？ 淋巴细胞及其亚群的分析T 淋巴细胞及其亚群分析：Th(CD3+CD4+ T); Tc(CD3+CD8

27、+ T)9B 淋巴细胞及其亚群分析:B1(CD19+CD5+):产生 IgM 型自身抗体, 参与免疫调节、与自身免疫病的发生有关B2(CD19+CD5-):受外来抗原刺激, 产生高亲和性特异性抗体NK 细胞分析:NK(CD3-CD16+CD56+) 淋巴细胞功能分析细胞介导细胞毒性试验：CTL 和靶细胞外培养，对靶细胞的作用死细胞与活细胞比例，PI 能渗透到死细胞致核染色细胞内细胞因子测定：对 CD3+CD4+T 细胞内 IFN-和 IL-4 来区分 Th1 和 Th2淋巴造血系统分化抗原及白血病免疫分型对淋巴瘤和白血病进行多色免疫分型用于选择化疗方案、判断预后及检出微小残留病变肿瘤耐药相关蛋

28、白分析MDR(+)表示对化疗药物耐药P 糖蛋白（P-gp）：跨膜分子，泵出进入胞内的多种抗癌药物。AIDS 病检测中的应用CD4+Th 细胞、CD4+/CD8+比例自身免疫病相关 HLA 抗原分析HLA-B27 可出现在 58%97%的强直性脊椎炎(As) 患者移植免疫中的应用流式细胞术的交叉配型（FCXM）群体反应性抗体（PRA）检测16细胞表面标志及亚群a) 常用于鉴定和检测淋巴细胞表面标志是簇分化抗原（Cluster of differentiation，CD）。CD3 分子是 T 细胞共同的标志性抗原。外周血中成CD3+CD4+CD8-辅助性 T 细胞（help T cell, Th）

29、T 细胞主要是 TCRT 细胞。CD3CD4CD30-为 Th1, Th1CD3CD4CD30+为 Th2，Th2IL-2，IFN- 等 Th1 细胞免IL-4，IL-5，IL-6 等 Th2 体液免疫CD3+CD4-CD8+细胞毒性 T 细胞 （cytotoxic T cell, Tc ）CD3CD8CD30-为 Tc1,CD3CD8CD30+为 Tc2调节性 T 细胞: （regulatory T cell, Tr or Treg）典型的标志为 CD4+CD25+Foxp3+（核内）活性 T 细胞表面有 CD2 因此绵羊红细胞受体17B 细胞表面标志a) SmIg、Fc 受体、补体受体、E

30、B受体和小鼠红细胞受体是 B 细胞的重要表面标志，其中以 SmIg 为 B 细胞所特有，是鉴定 B 细胞可靠的指标。B 细胞表面较特异的 CD 分子有 CD19、CD20、CD21、CD22、CD23 等CD19/CD5 分子：可将 B 细胞区分为 B1 细胞和 B2 细胞，B1 细胞为 CD19+CD5+,而 B2细胞为 CD19+CD5-。ii. B1 细胞与机体的免疫调节、自身免疫病有关；B2 细胞主要是外周成体液免疫的主要细胞。18免疫细胞功能检测： T 细胞功能检测（负责细胞免疫功能）B 细胞，执行10a) T 细胞增殖试验 ：形态学检查方法，3H-TdR 掺入法，MTT 比色法b)

31、 T 细胞功能测定T 细胞介导的细胞毒试验：形态学方法，. 51Cr体内试验：特异性抗原皮肤试验;PHA 皮肤试验法B 细胞功能检测（执行体液免疫功能） :B 细胞增殖能力的试验 ; 溶血空斑试验 ;B 细胞抗体形成功能的检测 酶联免疫斑点; 体内试验NK 细胞活性测定（非特异性免疫作用）靶细胞溶解测常用靶细胞 K562 细胞株用于测定人 NK 细胞： i. 形态法 台盼蓝染色技术 ，ii. 酶释法 离心取上清 LDH ，ii. 同位素法 CPM 放射同位素中性粒细胞功能检测驱化功能 :滤膜渗透法（Boyden 小室法） ;琼脂糖平板法吞噬和杀菌功能测定 :显微镜检查法 ；溶菌法 ;NBT (

32、硝基四氮唑蓝)还原试验19免疫浊度分析的原理免疫浊度分析属于液相沉淀反应，其基本原理是抗原、抗体在特定的电解质溶液中反应，形成小分子免疫复合物，在增浊剂的作用下，迅速形成免疫复合微粒，是反应液出现浊度。在抗体稍微过量且固定的情况下，形成的免疫复合物量随抗原量增加而增加，反应液的浊度亦随之增大，即待测抗原量与反应溶液的浊度免疫透射比浊法方法学评价。相关。优点: 灵敏度较单扩高，重复性好，操作简便，结果准确；不足: 抗体用量较大；溶液中存在的抗原抗体复合物分子应足够大；透射比浊测定在抗原抗体反应的第二阶段，检测需在抗原抗体反应达到平衡后进行，耗时较长。免疫散射比浊法方法学评价。散射比浊法是目前临床

33、应用较多的法，本法自动化程度高，具有快速、灵敏、准确、精密等优点。采用抗原过量检测方法，保证了结果的准确性。但仪器和试剂价格比较贵,对抗体的质量要求很高。20速率散射比浊分析的基本原理及其优点。速率散射比浊法是抗原抗体结合反应的动力学测定法。所谓速率是指抗原抗体反应在时间内形成免疫复合物的量（不是免疫复合物累积的量），连续测定各时间复合物形成的速率与其产生的散射光信号联系在一起，形成动态的速率散射比浊法，每项检测仅 12min 即可完成。速率散射比浊分析测定的是抗原抗体反应的第一阶段，其优点是：快速、灵敏、可检测微量样本，精密度高。质控品的基本要求。避免“基质效应”；待测物浓度尽可能接近临床决

34、定水平或 CUT-OFF 值；良好的稳定性；无传染；可单批大量获得21Westgard 多规则质控方法的主要特点。在 Levey-Jennings 质控图方法的基础上产生，具有 Levey-Jennings 质控图方法的优点，可通过相似的质控图来进行分析；假失控和假告警概率低；误差检出能力增强 。常用质控的符号及定义11符 号12S13S22S R4S定义一个质控测定值超出2s 控制限一个质控测定值超出3s 控制限两个连续的质控测定值同时超出+2s 或2s 控制限 同一批测定中，两个不同浓度质控物的测定值之间的差值超出 4s 控制限四个连续的质控测定值同时超出+1s 或1s 控制限七个连续的质

35、控测定值呈现一个向上或向下的趋势变化十个连续的质控测定值同时处于均值（X）的同一侧41S7T10X【13S 和 R4S 规则反映的是随机误差。22S、41S 和 10X 反映的是系统误差，系统误差超出一定的程度，也可从 13S 和 R4S 规则反映出来。】22质量控制的局限性所得 PT 评价结果不是PT 成绩不好不代表的正常水平；(PT: proficiency testing质量不好；能力验证)PT 结果并分析前和分析后存在的多种问题；由于获得 PT 结果的整个过程时间较长，偏倚 。不得到反馈结果而及时纠正存在的23乙型肝炎的主要指标及其临床意乙型肝炎表面抗原（HBsAg）：SPRIA（固相

36、放射免疫法）、ELISA（酶联免疫吸附试验）、RPHA（反向间接血凝试验）、化学发光法（可定量）。【临床意义：（1）的筛选和普查；（2）HBsAg不能完全排除乙型肝炎；（3）同时出现 HBsAg 和抗-HBs，可能是不同亚型重复染性较弱。】乙型肝炎表面抗体(HBsAb)；（4）如果仅表现为 HBsAg 阳性者，传【临床意义：（1）抗-HBs 阳性提示急染后的康复；（2）在接受抗-HBs 阳性血液的受血者中，可出现短暂性的抗-HBs 阳性；（3）HBV接种后，可出现抗-HBs 阳性；（4）抗-HBs 与 HBsAg 同时阳性可见于暴发性肝炎或慢性活动性肝炎患者；（5）HBsAg 含量的最终目标。

37、 】乙型肝炎 e 抗原(HBeAg)：同时伴抗-HBs 的出现，是目前临慢性乙型肝炎治疗标志乙型肝炎 e 抗体(HBeAb)：多存在于恢复期及痊愈的患者染的早期标志乙型肝炎抗原(HBcAg)：急【临床意义：（1）急性（4）暴发型乙型肝炎的】；（2）预后判断；（3）区分慢性活动性或非活动性肝炎；24TRUS螺旋体常用的免疫学检验ISE 测 TP 抗体、TPPA 测 TP 抗体、FTA-ABS、金标记免疫层析1225I 型超敏反应免疫学检测过敏原皮肤试验总 IgE 的测定：免疫比浊测定法、化学发光特异性 IgE 的测定：放射免疫吸附剂试验、免疫印迹法26I 型超敏反应发生机制（07 以青霉素引起的

38、过敏性休克为例，说明 1 型超敏反应的机制）27超敏反应发生机制(10.以新生儿溶血为例，2 性超敏反应的机制)13四种类型超敏反应发生机制的比较（257 页- 表 21-1）【型、和型超敏反应主要由抗体介导；型超敏反应是由 T 细胞介导】28（可能多选题）自身免疫性疾病的共同特征多数 AID 是自发或特发性的，、药物等外因可能有一定影响；患者中有高水平-球蛋白；中有高效价的自身抗体或出现与自身抗原反应的致敏淋巴细胞；病变损害部位有变性的 Ig 沉积，呈现一大量淋巴细胞和浆细胞浸润为主的慢性炎症；病程一般较长，发作与缓解交替出现，女性多于有遗传倾向；，老年多于青少年；应用肾上腺皮质激素等免疫抑

39、制剂有效；常有其他 AID 同时存在；可出相似的动物疾病模型。29自身免疫疾病遗传：强直性脊柱炎：HLA-B27 型； SLE:HLA-DR3；RA：HLA-DR4；桥本氏甲状腺炎：HLA-DR530常见的自身免疫性疾病（一）、由 II 型超敏反应引起的自身免疫性疾病抗血细胞表面抗原的抗体引起的自身免疫性疾病: 如自身免疫性溶血性贫血（AIHA）;免疫性血小板减少性紫癜（ ITP ）。抗细胞表面受体抗体引起的自身免疫性疾病：如:重症肌无力（MG）; Graves disease细胞外抗原的自身抗体引起的自身免疫性疾病：如：Good pasture 综合征（二）、自身抗体免疫复合物引起的自身免疫

40、性疾病统性红斑狼疮（SLE）；类风湿性关节炎（RA） ；干燥综合症；硬皮病；多发性肌炎（PM）和皮肌炎（DM）31常见的单克隆免疫球蛋白病：14多发性骨髓瘤 ；性巨球蛋白血症 ；重链病 ；轻链病 ；良性单克隆免疫球蛋白病32异常免疫球蛋的测定与分析常用的免疫学方法区带电泳 ；免疫电泳 ；免疫固定电泳 ；免疫球蛋白定量主要依靠血液学和免疫学方法，检测较多，一般应采用两种以上的检测方法互相印证。33免疫缺陷病的特点： 34常见常见反复：对各种肿瘤：易感性增加，主因；远高于正常人，100300 倍；自身免疫病：自身免疫病的发生率比正常人高 1000 倍，类风关和恶性贫血等多见；遗传倾向临床表现和病理损伤复杂多样性免疫缺陷病性 B 细胞免疫缺陷病：X 连锁无丙种球蛋白血症（络氨酸激酶缺乏）X 联高 IgM 综合征（XCD40L突变）选择性 IgA 缺陷病（常显或常隐，具有 IgA 受体的 B 细胞发育停滞）性 T 细胞缺陷病：DiGee 综合征（性胸腺发育不全）TCR 活化和功能缺陷病（CD3，ZAP-70(络氨酸激酶)突变