软件算法验证报告

1、Trp I TM ryKI isochip -C恒温扩增微流控芯片核酸分析仪（软件算法）工艺 及 软 件 验 证 报 告验证人：审核：批准：日期：温度准确度验证：在20到80范围内设置2个目标温度点37c和65C,采样间隔1次/s,在每个目标温度点连 续30s达到恒温后开始记录恒温芯片核酸分析仪的PT100型伯电阻温度控制器的实际测量温度T, 每个温度点连续测量记录30次取平均T平均，与模块设置温度T设置比较，计算温度偏差的绝对 值|T平均-T设置|。软件计算结果：温度准确度()3765序号时间(s)通道1(C)时间(s)通道2()序号时间(s)通道1()时间(s)通道2 (C)15137.0

2、84437.07125364. 8323764. 9325236.954537. 11225464.8323864. 9635336.954637. 15325564.7723964.9345436.944737. 14425664.7424064.8955536.974837. 11525764.7524164.8665637. 134937. 13625864.8424264.8675737. 175037. 16725964.8424364.8885837.055137. 16826064.7524464.8795936.975237. 14926164.7524564.86106037

3、.095337. 121026264.7924664.87116137. 165437. 111126364.824764.92126237.075537. 171226464.8424864.92136336.965637.21326564.7924964. 89146437.055737. 161426664.7525064. 86156537. 165837. 111526764.825164. 83166637. 115937. 141626864.8325264. 86176737.096037.21726964.8325364. 92186837. 136137. 17182706

4、4. 8625464. 92196937.066237. 11927164.825564.91207036.996337. 132027264.825664.91217137.076437. 182127364. 8525764.91227237.226537. 172227464. 8525864.91237337. 146637. 122327564. 8925964.9247436.996737. 112427664. 8326064. 89257536.996837. 12527764. 7726164. 89267637. 176937. 112627864.826264.91277

5、737.257037. 132727964.8726364.91287837.077137.22828064.8326464. 92297936.967237.212928164.8426564.91308037.017337. 143028264.9126664. 92偏差0.070. 14偏差0. 190. 1实际测试计算结果:通道1:St30=llll. 95T平均=37. 065平均-丁设置|=37. 065-37=0. 0652t30=1944. 43T平均=64. 814平均-丁设置|=64. 814-65=0. 186通道2：St30=1114. 25T 平均= 37. 142平

6、均-T 设置 |=37. 142-37=0. 1422 t30=1946. 92T平均=64. 897T 平均 T 设置 1=64.897-65=0. 1Q3验证合格荧光强度检测重复性验证：设置待测机参数“预热阶段0, lOmin；扩增阶段O, Omin；灭活阶段O, Omin,（注：0 仅表示仪器不加热，不具有实际意义）。对合格的荧光检测芯片n号芯片、m号芯片、n号芯片各 检测10分钟，导出荧光信号数据，每个通道选择最后的10次连续重复记录的荧光信号测量数据 li,分别计算每个通道平均值I平均和标准差SD,计算CV二SD/I平均X100%。软件计算结果：选取稀释一倍软件测试数据：浓度：500

7、0通道号平均值SDCV127083.388. 510. 33226701. 489. 920. 34326543.691. 230. 34425876.587. 490. 3452534486. 770. 34625080.891. 750. 37724273.784. 340. 35824259.581. 690. 3492457382. 570. 341024464.284. 500. 351124239.981. 820. 34122445883. 360. 341324677.281. 640. 331424641. 591. 130. 371524550.197. 330.40162

8、4541. 191. 380. 371724701. 488. 760. 361824927.287. 290. 351924736.782. 790. 332024457.580. 890. 332125015.685. 540. 342225997.681. 830. 31232720989. 440. 332428345.864. 540. 23测试结果：合格最大值：（0. 40实际测试计算结果:反应池I平均127083. 3226701.4326543.6425876. 5525344625080. 8724273.7824259.59245731024464.21124239.912

9、244581324677.21424641. 51524550. 11624541. 11724701.41824927.21924736. 72024457.52125015.62225997. 623272092428345.8计算每个通道平均值I平均反应池标准差SD188.511205289.918729391.232548487.486189586.774292691.746995784.34328881.689453982.5738731084.4995731181.8201961283.3626621381.6384991491. 1265911597.3269981691.382

10、5291788.7646081887. 293631982.7916392080.8912162185.5429722281.8347932389.4389922464.542492计算每个通道标准差SD反应池CV10.32681120.33675730.34370840.33809150.34238660.36580670.34746880.33673290.336035100. 345401110. 337543120. 34084130. 330826140. 369809150. 396442160. 372365170. 359351180. 350194190.334692200.

11、 330742210. 341959220. 314778230.328711240.227697根据CVtSD/1平均x 100%算出0.396442选择原始数据中最后的10次连续重复记录的荧光信号测量数据反应池循环11循环12循环13循环14循环15循环16循环17循环18循环19循环20127219271952715027108271012707827035270082698226957226838268082677226739267222669126649266232659826574326684266522660726586265662653726487264622643926416

12、426017259772593725919259022584925828258022577925755525477254402541425393253682531325296252702524625223625216251912515125129251082505625028250012497624952724401243792433824310242932425324228242022417824155824379243632432724293242872421924218241932416924147924695246852464024600245942453124533245082448

13、424460102458424587245242448924497244182442224397243732435111243482435224313242482429024192242002417524151241301224566245832452324468245002442724414243902436524344132479724797247202468424723246492463724613245882456414247772477224671246632470724601245932456724542245221524698246822457524585246242450724

14、493244672444424426162468524664245862457924582244922449124467244432442217248482481324739247522473624638246572463224610245891825070250382496824986249432483324895248692484624824192486624847247892478324749246682470524678246532462920245782456124528244942446824418244192439324369243472125141251312508525047

15、250292499024971249452492024897222611826114260512603526013259572596125934259082588523273422732927265272422723727191271622713427106270822428457284202839028378283552832228301282902828028265验证合格9. 6荧光强度检测精密度验证：设置待测机参数“预热阶段0, lOmin；扩增阶段O, Omin；灭活阶段O, Omin,（注：0 仅表示仪器不加热，不具有实际意义）。对合格的荧光检测芯片n号芯片、m号芯片、n号芯片各

16、检测10分钟，导出荧光信号数据，每个通道选择最后10次连续重复记录的荧光信号测量数据Imn （m=24代表通道数，n=10代表重复测量记录次数），分别计算每种浓度24个通道的平均值I平均二 Elmn/10 和 SD,计算 CV 二 SD/I 平均xlOO%。软件计算结果：精密度浓度：5.0浓度：2.5浓度：1.25025204. 49 11347.45857. 761059. 65299. 57348. 84. 22. 645. 95测试结果：合格最大值：5.95实际测试计算结果：反应池I平均127083.3226701.4326543.6425876.5525344625080.872427

17、3.7824259.59245731024464.21124239.912244581324677.21424641.51524550. 11624541. 11724701.41824927.21924736.72024457.52125015.62225997.623272092428345.8LImn/1025279. 11根据原始数据算出 浓度：5.0的I平均二 SImn 710=25279. 11浓度：5.0001 平均二 Imn/10=25279.11浓度：2.5001 平均=X Imn/1O11347.4浓度：1.2501平均二工10/10=5857.76浓度：5.000 SD=

18、1127.35浓度：2.500 SD=299.57浓度：1.250 SD=348.8浓度：5.000 CV=4.45962浓度：2.500 CV=2.63999浓度:1.250 CV=5.95449分别计算每种浓度24个通道的平 均值I平均=EImn/10和SD, 计算CV = SD/1平均xlOO%最大值：CV=5.95449验证合格9.7荧光线性验证：设置标准机参数“预热阶段0, lOmin；扩增阶段O, Omin；灭活阶段O, Omin,(注：0 仅表示仪器不加热，不具有实际意义)。对合格的荧光检测芯片I号芯片、H号芯片、IH号芯片、 IV号芯片、V号芯片各检测10分钟，获得各浓度对应的

19、荧光信号测量值，对同一张芯片上24个 通道(m=24)的最后10次(n=10)荧光信号测量数据l(m,n)取平均值I平均=通mn/240,得到各浓 度荧光测量值I平均，计算各浓度荧光测量值I平均与稀释浓度的线性回归系数Ro软件计算结果：线性r0. 9992测试结果：合格实际测试计算结果：稀释浓度1052.51.250.625I平均54637.9425279.1111347.45857. 762586.97R=0.9992验证合格9.7仪器整机一致性测试验证：设置参数“预热阶段0, 5min；扩增阶段0, Omin；灭活阶段0, Omin,（注：0仅表 示仪器不加热，不具有实际意义）。使标准机和

20、待测机在相近环境温湿度条件下，使用B型校准芯 片，放入标准机进行检测，测试完成后，取出放入待测机检测。将待测机测试值与标准机测试值 相比对。软件计算结果：一致性通道标准机测试机偏差12133921462.60. 58224371.924354.4-0. 07325091.325095.50. 02423695.923754.80. 25522941.222748.9-0. 84623822.323314.3-2. 13724733.924039. 1-2. 81827950.127038-3. 26922795.122406.4-1. 711025387.324477-3. 591122858

21、.622189.6-2. 931226498.925458.3-3. 931324972.224311.4-2. 651424789.424125.8-2. 681524451.623941.8-2. 08162357223171.4-1. 71722423.122107.4-1. 411822292.621990.3-1. 361921495.721202.7-1. 362017268.117177.6-0. 522120860.3210440. 88221975419702. 8-0. 262320047.920215.30. 842422415.722470.50. 24测试结果：合格最

22、大偏差：-3. 93实际测试计算结果:测试机原始数据：反应池循环1循环2循环3循环4循环5循环6循环7循环8循环9循环1012140521462214662147021481214712146421468214692147022428924354243562437524391243682434224350243682435132503125113250982509925147251062506325086251252508742372723769237622377323787237492373423750237662373152269922753227602278222791227422273

23、322748227632271862323023295233182335723359233032331823336233422328572394024048240562407824079240292403524054240612401182696827064270502705527065270312703527041270522701992232222451224332244422451223802239522410224242235410244692452424487245082451624447244552446524482244171122189222372218022206222322

24、216722162221772220422142122554125526254402546525491254172541625436254622538913244042437624298243612436024259242642428224301242091424147241412409024204241992408524103241202413724032152394723951239162398823989239032393623952239612387516231262315823138231962320823133231732318723194232011722043220952209

25、622150221512207822120221382214122062182193221973219962205422031219632199622013220062193919212102120421213212342122021180211962120521202211632017173171901718417202171891716217175171781717417149212106221061210542107621048210232104121040210282100722197121971219700197271971419689197021970019697196752320

26、2682025120214202312022020193202022019920199201762422537224872246122493224852244922452224552245822428标准机原始数据:反应池循环1循环2循环3循环4循环5循环6循环7循环8循环9循环1012110021243212972133921365213962140421408214102142822428224327243532436824378243892440224407244052440832496325049250762508425097251152512625134251312513842364

27、223678236892368923703237132370523707237132372052288422922229282293922948229512295822960229622296062374623798237992381223828238452384123845238492386072465724724247122471924745247562474524751247622476882792327939279392794827955279532796027959279612796492275822777227672278222800228102280422812228182282

28、310253832538525387253832538625389253902538925390253911122845228462284722861228692286322859228642286922863122648326492264832649526499265032651026508265072650913249312495624945249742497624981249872499324989249901424736247632476324781247932479724815248172481724812152439824437244342444624455244582446924

29、475244742447016235132355023536235592357923586235942359823603236021722339223872236422410224202244522460224692246222475182226022272222462227022294222982231722323223272231919214742148521471214862150421502215042150721515215092017262172801724417263172641726517275172791727617273212082120827208072085120861

30、2086420891209002089520886221970919735197151974419754197591978019785197821977723200232003520025200492005320042200612007120069200512422410223922239422408224112241422435224352243122427反应池I平均121462.6224354.4325095.5423754.8522748.9623314.3724039. 1827038922406.410244771122189.61225458.31324311.41424125.

31、81523941.81623171.41722107.41821990.31921202.72017177.621210442219702.82320215.32422470.5测试机各通道平均值反应池I平均121339224371.9325091. 3423695.9522941.2623822.3724733.9827950. 1922795. 11025387.31122858.61226498.91324972.21424789.41524451.616235721722423.11822292.61921495. 72017268.12120860.322197542320047.

32、92422415.7标准各通道平均值反应池测试机与标准机对比值10.5792211442-0.07180400430.0167388740.2485662085-0.838229916-2.1324557247-2.8091000618-3.2633156959-1.70519102810-3.58565109311-2.92668842412-3.92695545913-2.6461425114-2.67695063215-2.08493513716-1.69947395217-1.40792307918-1.35605537319-1.3630633120-0.524087769210.8

33、8062012522-0.259188013230. 835000175240.244471509测试机与标准机实测值相比对最大偏差=3.926955459验证合格十、结论根据数据验证结果，评审小组一致认为：整机软件算法在保留小数点后两位有效 数字的情况下，软件计算结果和手动计算结果各组数据完全符合，所用的软件准确性 达到要求，由此验证软件给出计算结果能够适应RTisochip-C恒温扩增微流控芯片核 酸分析仪的生产及测试。一、验证目的对RTisochip-C恒温扩增微流控芯片核酸分析仪的应用软件算法准确性进行验 证。二、适用范围本公司RTisochip-C恒温扩增微流控芯片核酸分析仪产品的软

34、件验证。三、验证小组人员验证小组人员表姓名部门职位职责李若然技术工艺部项目负责人 技术工艺负责人负责整个验证过程总体协调工作宋驰骋技术工艺部工艺技术员负责技术资料准备及软件安装，验证整个过程追踪黄卫健质量管理部主任组织提供质检验证人员进行产品检验并对其过程实施控制彭文生产管理部主任组织提供生产验证人员进行产品装配并对其过程实施控制张亮生产管理部副主任组织研发物料采购并对物料供应信息实施控制何成运行保障部主管组织提供研发验证所需设备、环境设施并对其过程实施控制牟波生产管理部生产组长负责产品组装，测试和记录验证结果郑达质量管理部质量检验员负责产品各项指标的检测和记录验证结果四、工作条件数据如下:a

35、）电源条件：220V, 50Hz；b）环境温度：16. 8；c）相对湿度：59%；d）大气压力:90. OkPa；五、验证内容RTisochipTLe恒温扩增微流控芯片核酸分析仪的应用软件算法正确性六、验证实施时间验证实施时间为：2016年1月七、验证项目技术指标：1升温速率：从37到65,平均升温速率不小于15.0/ mino2降温速率：从65c到37,平均降温速率不小于5.0/min。3控温精度：恒温计时开始30s内到计时结束之间温度测量数据的最高值与最低值之差的一 半，不大于0. 5 o4温度准确度：恒温计时开始30s内到计时结束之间温度测量数据的平均值与模块设置温度 差值的绝对值，不大

36、于05。5荧光强度检测重复性：对同一种荧光材料进行10次连续重复检测，CV （%）不大于3%。6荧光强度检测精密度：对同一种荧光材料进行10次连续重复检测，24个通道的数据变异 系数CV （%）不大于10%o7荧光线性：对A型芯片进行检测，计算各浓度荧光测定值与稀释浓度比例的线性回归系数 R,应不低于0.990。8仪器整机一致性：用同一张B型芯片先检测标准机获得反应池的荧光信号值（或使用标准机1 周内存储的同一张芯片的荧光信号值），然后用同一张芯片检测待测仪器，获得同一张芯片反应池 在待测仪器上的荧光信号值，计算标准机和待测仪器对应反应池的荧光信号数据偏差，待测仪器 的一致性（和标准机相比）偏

37、差在-15%（含）+15%（含）之内。八、验证方法在RTisochipN-C恒温扩增微流控芯片核酸分析仪上进行软件自动测试，由软件自动给出计算 结果；将软件自动测试中生成的原始数据进行计算，与软件自动计算结果进行对比。九、验证过程9.1升温速率验证：从温度原始数据中获取37到65c的温度实时测量数据，恒温37. 00. 5范围内最后一个温 度点，温度记为TA,温度连续30s达到恒温65. 00. 5范围内的第一个温度点，温度记为TB, 从TA到达TB的时间记为tl,按照公式（TB-TA） /tl计算平均升温速率。软件计算结果：时间（S）通道1（）时间（s）通道2（）起点18237. 16182

38、37. 43数占 八、22364. 5520764. 5速率40. 0864. 97实际测试计算结果:时间（S）通道1 ()起点TA18237. 1618340. 0718444. 9118549. 7318654. 0118757. 8218861. 0718963. 9219065. 0519163. 719262. 3519362. 7719464. 0919564. 5319663. 8419763. 3719863. 719964. 2120064. 2420163. 9720263. 8920364. 0920464. 2520564. 2120664. 1820764. 2420

39、864. 3820964. 3821064. 2821164. 262 1 264. 412 1364. 5121464. 4821564. 4321664. 5221764. 5221864. 622 1964. 6422064. 5822164. 5322264. 48终点TB 一22364. 55时间（S）通道2（）起点TA 18237. 4318339. 6518442. 818545. 8718648. 6718751. 1218853. 3918955. 5119057. 5419159. 4319259. 4319361. 2619463. 0419564. 2519664. 4

40、219763. 9419863. 5619963. 632006420164. 3420264. 4320364. 3820464. 320564. 320664. 35终点TB 一少20764. 5通道1:TA=37.16TB=64.55 (TB-TA)/tl=O. 668/s=40. 08/min通道2：TA=37.43TB=64. 5(TB-TA)/tl = l. 0828/s=64. 968/min验证合格9. 2降温速率验证：从温度原始数据中获取65c到37的温度实时测量数据，恒温65.00.5范围内的最后一个温 度点，温度记为TC,温度降到37.00.5范围内的第一个温度点，温度记

41、为TD,从TC到达TD 的时间记为t2,按照公式（TC-TD）八2计算平均降温速率。软件计算结果：降温速率（/Min）时间（S）通道1（时间（s）通道2（C）起点300964. 87301164. 62”占 一、八、310037. 37311837. 38速率18. 1315. 27实际测试计算结果:时间（s）通道1（）时间（s）通道1（）起点TC 300964.87305547.02301064.47305646. 74301164.03305746.45301263.54305846. 17301363.05305945. 89301462.54306045.62301562.053061

42、45.35301661.54306245.09301761.04306344.82301860.54306444. 56301960.07306544.31302059.57306644.06302159. 11306743.81302258. 65306843.57302358.2306943.33302457. 75307043. 09302557.32307142.86302656.89307242.64302756.46307342.4302856.05307442. 19302955.64307541.95303055.24307641.74303154.83307741.52303

43、254.44307841.31303354.05307941. 1303453.67308040. 88303553.29308140.67303652.92308240.47303752.55308340.27303852. 18308440. 08303951.83308539.88304051.47308639.69304151. 13308739.49304250. 79308839.49304350.45308939.3304450. 12309039. 12304549. 78309138.93304649.46309238.75304749.46309338.57304849.

44、15309438.39304948.83309538.22305048.51309638.04305148.2309737.88305247.9309837.71305347.6309937.54305417.31终点TD310037.37时间（S）通道2（）时间（s）通道2（）起点TC 一301164. 62306646. 56301264. 24306746. 31301363. 79306846. 07301463. 34306945. 84301562. 88307045. 61301662. 43307145. 61301761. 97307245. 39301861. 543073

45、45. 16301961. 1307444. 94302060. 68307544. 72302160. 26307644. 51302259. 87307744. 28302359. 47307844. 07302459. 07307943. 85302558. 68308043. 65302658. 3308143. 46302757. 93308243. 24302857. 93308343. 04302957. 55308442. 85303057. 18308542. 65303156. 82308642. 46303256. 46308742. 26303356. 11308842

46、. 07303455. 76308941. 89303555. 42309041. 69303655. 07309141. 52303754. 75309241. 33303854. 42309341. 16303954. 09309440. 97304053. 77309540. 81304153. 44309640. 63304253. 13309740. 45304352. 81309840. 28304452. 51309940. 12304552. 21310039. 95304651. 9310139. 79304751. 61310239. 62304851. 31310339.

47、47304951. 03310439. 3305050. 73310539. 3305150. 44310639. 15305250. 17310738.99305349. 89310838. 85305449. 62310938. 69305549. 35311038. 53305649. 07311138. 38305748.81311238. 23305848. 55311338. 09305948. 28311437. 95306048. 02311537. 8306117. 77311637. 66306247. 52311737. 53306347. 27终点TD，311837. 3