天然药物质量监控技术(共7页)

1、 本科生课程(kchng)论文(lnwn)论文题目鼻渊片质量标准监控课程名称天然药物质量监控技术学生姓名 张志强所在专业制药工程所在班级1111指导教师杜建喜职称教授日期2014 年 6 月 14 日评分鼻渊片质量标准监控(jin kn)1、概述本产品中含两种主要(zhyo)成分，分别是藿香叶和猪胆汁。藿香为唇形科多年生草本植物，它不仅是一种(y zhn)中草药，还是一种天然香料植物。作为中草药，它有芳香化浊，开胃止呕，发表解暑的功效；可用于湿浊中阻，呕吐泄泻，腕痞不行，暑湿倦怠(jun di)，寒湿闭暑，发热无汗，鼻渊头痛。作为天然香料植物，可从中提取藿香浸膏和藿香油。藿香浸膏进一步加工可制

2、得藿香净油和藿香精油，二者都具有特征性药草香、壤香和木香底蕴，香气浓郁而持久，可用于调配多种日用香精和食用香精。猪胆汁是一种苦味较浓的有色液体，富含胆酸、胆盐、胆固醇等多种无机盐，具有清热通便、清热解毒、止咳平喘筹功效。首先将藿香叶粉碎，进行水蒸气蒸馏得到有效藿香叶挥发油，然后用气相色谱做定量试验；至于猪胆汁浓缩成浸膏状，用薄层色谱法定性，为完成对鼻渊片药品质量稳定可控，做出对其性状、处方、活性成分、提取工艺、控制项目等的标准检测。2、情况分析2、1药材来源 藿香为唇形科多年生草本植物，分布较广，常见栽培。 喜温旺湿润扣阳光充足环境，宜疏松肥沃和排水良好的沙壤土，中国各地广泛分布，主产于 HY

3、PERLINK /view/7627.htm t _blank 四川、 HYPERLINK /view/4141.htm t _blank 江苏、 HYPERLINK /view/4150.htm t _blank 浙江、 HYPERLINK /view/8581.htm t _blank 湖南、 HYPERLINK /view/7340.htm t _blank 广东等地。猪胆汁为猪科动物猪的胆汁。宰杀后，剖腹取出胆囊，取胆汗鲜用或将胆囊挂起晾干，或在半干时稍稍压扁，再干燥之。2、2形态特征 藿香，又名：合香、苍告、山茴香等，属 HYPERLINK /view/8614825.htm t _

4、blank 管状花目， HYPERLINK /view/132030.htm t _blank 唇形科多年生草本植物，茎直立，高0.5-1.5m，四棱形，粗达7-8mm，叶心状卵形至长圆状披针形，花冠淡紫蓝色，长约8mm，成熟小坚果卵状长圆形，长约1.8mm，宽约1.1mm，花期6-9月，果期9-11月。猪胆汁取于猪胆囊，带有腥味。2、3主要化学成分猪胆汁中主要成分为胆汁酸类、胆色素、粘蛋白、脂类及 HYPERLINK /view/42610.htm t _blank 无机物等。胆汁酸中有 HYPERLINK /view/2115485.htm t _blank 鹅脱氧胆酸(C11enodeo

5、xy- cholic acid)、3a- HYPERLINK /view/27034.htm t _blank 羟基- 6- 氧- 5-胆烷酸(3- Hydroxy-6- oxo-5 -cholanic acid)和 HYPERLINK /view/901717.htm t _blank 石胆酸(Llthocholic acid)，它们几乎完全与 HYPERLINK /view/513071.htm t _blank 甘氨酸结合而存在。另含猪 HYPERLINK /view/207720.htm t _blank 胆酸和 HYPERLINK /view/758989.htm t _blank

6、猪去氧胆酸(Hyodeoxycholic acid)。猪胆汁主要含猪去氧胆酸(hyodesoxycholic acid)，尚含去氧胆酸和多种氨基酸。 藿香(hu xin)叶挥发油中含24种成分。包括单萜1种、倍半萜及其衍生物11种、挥发性酚及醚类7种，以及长链酸、醇、酮等5种；叶油的主要成分为甲基胡椒酚、d-柠檬(nn mn)烯和丁香烯等1。2、4与产品相关成分及现代研究(ynji)情况本鼻渊片有藿香叶挥发油和猪胆汁浸膏，以下为它们的研究进展情况：首先，藿香叶挥发油采用的超临界CO2萃取，并进行气相色谱定量。其次，猪胆汁经醇处理后的得中药浸膏，特别是通过、多糖、蛋白质、氨基酸、无机盐类等亲水性

7、成分，可有效地防止吸湿。另外，高速离心法、沉降分离法、冷冻水沉法、膜分离技术、大孔吸附树脂分离技术、絮凝沉淀法以及为解决中药浸膏制剂有吸潮、软化、结块现象的包衣技术等现代研究手段都日益成熟。2、5产品形式或剂型情况 鼻用制剂品种多样，有固体制剂、半固体制剂和液体制剂等。本产品属于鼻用片剂，现代片剂是使用最广泛的剂型，以其低廉的价格，良好的稳定性，成熟的制剂工艺迅速占领市场，现在对鼻用片剂的研究也有突破性的进展。2、6质量标准控制项目的设定 根据提取鼻渊片的成分，以及其生产工艺，提出对成品以下几点的质量标准控制项目：气味、颜色、片中差异、崩解时限、有效成分含量、片剂装量差异、微生物限度、热原（细

8、菌内毒素）等项目因素。3、质量标准项目的研究方案 3、1性状与鉴定 3、1、1 性状鉴别茎直立，高0.5-1.5m，四棱形，粗达7-8mm，上部被极短的细毛，下部无毛，在上部具能育的分枝。叶心状卵形至长圆状披针形，长4.5-11cm，宽3-6.5cm，向上渐小，先端尾状长渐尖，基部心形，稀截形，边缘具粗齿，纸质，上面橄榄绿色，近无毛，下面略淡，被微柔毛及点状腺体；叶柄长1.5-3.5cm。轮伞花序多花，在主茎或侧枝上组成顶生密集的圆筒形穗状花序，穗状花序长2.5-12cm，直径1.8-2.5cm；喜高温、阳光充足环境，在荫蔽处生长欠佳，年平均气温19-26的地区较宜生长，温度高于35或低于16

9、时生长缓慢或停止。中国各地广泛分布，主产于 HYPERLINK /view/7627.htm t _blank 四川、 HYPERLINK /view/4141.htm t _blank 江苏、 HYPERLINK /view/4150.htm t _blank 浙江、 HYPERLINK /view/8581.htm t _blank 湖南、 HYPERLINK /view/7340.htm t _blank 广东等地。3、1、2 理化(lhu)鉴定（1）取藿香(hu xin)叶挥发油1滴，加氯仿(l fn)0.5ml，再加5%溴的氯仿溶液数滴，有颜色反应 （2）取藿香叶挥发油1滴，加苯0.

10、5ml，再加5%醋酸铜溶液少量，充分混合，放置分层，吸取上层苯液，点于栽玻片上，待苯挥发后，于残留物上加乙醇1-2滴，放置后，于显微镜下观察有针状结晶。3、1、3薄层色谱鉴别2方法：采用TLC法鉴别猪胆汁中猪去氧胆酸，并与易混淆品牛、羊胆汁进行鉴别；用薄层扫描法测定猪胆汁中猪去氧胆酸的含量。具体内容：取猪胆汁约0.7g，精密称定，加l0%氢氧化钠溶液5ml，120加热4h，放冷，滴加盐酸调节pH值至23 ，摇匀 ，用醋酸乙酯提取4次，15ml/次,合并提取液 ，蒸干，残渣加乙醇使溶解，转移至lOm1量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀 ，作为猪胆汁供试品溶液。另取牛、羊胆汁各0.7g，同法制成牛、羊胆汁

11、对照药材溶液。再精密称取在五氧化二磷干燥器中减压干燥24h的猪去氧胆酸对照品适量 ，加乙醇制成每1m1含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述4种溶液各2微升， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以新配制的异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水( 10：5：5：3：1 ) 的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以lO%硫酸乙醇溶液 ，在105加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯( 365nm) 下检视。猪胆汁供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点，不显与牛、羊胆汁对照药材相同的斑点。3、2 定量(dngling)控制 3、2、1鼻渊片中的藿香(hu xin)叶挥发油的

12、提取3采用(ciyng)仪器：HA221-50-02超临界萃取装置（江苏华安超临界有限公司）；GC6890气相色谱仪（安捷伦公司）。采用试剂：以乙酸苯酚酯为内标，购自上海化学试剂公司；其余试剂均为分析纯；样品：藿香，购自广州药材市场。方法：将5000g藿香叶适当破碎后，置于超临界萃取装置进行萃取。准确称取藿香叶挥发油0.1 g于100mL容量瓶中。加1ml( 0.1mg/mL)乙酸苯酚酯(内标) ，用乙醇定容，摇匀，进行定量分析，根据各香味成分和内标的峰面积及内标质量按下式计算各成分质量分数。 3、2、2 测定鼻渊片中的藿香叶的活性成分挥发油的含量4GC法色谱条件：色谱柱，Hp -5 ( 3

13、0 m0.2 5mm i.d0.2 5微升d.f ) ；分流/不分流进样温度：250；检测器温度：270；高纯氮作载气；H2流 量4 5mL/min ；空气流400mL/min ；柱头压58 .6 kPa；柱流速1.0 mL/min ；分流比：5：1 ；进样量1微升；程序升温：初始温度60，保持1min后，以6/min 升至270，保持1min。 利用毛细管GC法：（1）取6份样品，在相同条件下进行GC分析，根据测定结果计算相对标准偏差 R S D；（2）将各化合物配制成 6个不同浓度混合物的乙醇溶液，加入准确量的乙酸苯酚酯溶液（0.1mg/ml）作内标，进行线性关系考察；（3）采用加样回收法

14、，即将一定量的标样化合物加入5000g的藿香叶中，然后将加与未加标样的藿香叶平行超临界萃取与GC分析。根据各项香味成分的测定值 、添加量计算回收率。3、3检查项目3、3、1总灰分(hu fn)测定 按照(nzho)中国药典一部1995年版附录55页总灰分测定法检验猪胆汁(dnzh),应符合规定。3、3、2外观性状5 片剂表面应色泽均匀、光洁，无杂斑，无异物。3、3、3片中差异 照重量差异检查法，应符合规定。3、3、4崩解时限 照崩解时限检查法（附录 A）检查，应符合规定。3、3、5重量差异除另有规定外，鼻用固体制剂照下述方法检查，应符合规定。检查法：取供试品20个，分别称定（或称内容物），计算

15、平均重量，超过平均重量10%者不得过2，并不得有超过平均重量20%者。凡规定检查含量均匀度的鼻用制剂，一般不再进行重量差异的检查。3、3、6 微生物限度 照微生物限度检查法（附录 G）检查，应符合规定。3、3、7热原照热原检查法（附录 D）检查，猪胆汁提取液中每1ml中含细菌内毒素应小于0.5 EU内毒素。4、 总结（工作评价）通过对藿香叶、猪胆汁的来源、性质、作用等的了解，结合现代药物分析、质量监控等。用超临界流体萃取一毛细管气相色谱分析的方法定性测定藿香叶其中的有效成分甲基胡椒酚、d-柠檬烯、丁香烯等，并做定量分析；用薄层色谱定性测定猪胆汁，与牛、羊的猪胆汁区分。根据相关的制作手段与剂型特

16、点，制定一系列的质量标准控制项目。我觉得这个方案可行性很高，薄层色谱定性分析和超临界流体萃取一毛细管气相色谱定量分析的技术已经相当成熟，在区分猪胆汁与牛、羊胆汁的实验和藿香叶挥发油的定量等方面已有前人的基础。但也存在一些不足，如超临界的条件比较难控制，很容易造成误差；猪胆汁要注意保鲜；藿香叶中存在很多杂质等等。参考文献：中华人民共和国药典(yodin)二部 2010年版中华人民共和国药典(yodin)一部 1995年版1杨得坡，王发松，苏镜娱，等.藿香(hu xin)茎、叶和花挥发油成分分析J.中药材，2000,23（3），149-1512莫少红，陈晓军，谭洪盛，等.猪胆汁质量标准研究J.时珍国医国药, 2004, 15(3),146-1473刘玉平，孙宝国，石华治，等.超临界二氧化碳萃取藿香梗和藿香叶浸膏J.化工学报，2008,59（3），791-7954姚二民，张峻松，王花俊，等.用气相