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文档简介

1、选择培养基和鉴别培养基选修一 专题二:微生物的培养和应用 2.2&2.3学习目标1.说出选择培养基和鉴别培养基的区别;2.设计出尿素分解菌和和纤维素分解菌的选择培养基和鉴别培养基;3.说出尿素分解菌和纤维素分解菌的应用价值。【启蒙思考】P21 DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术,此项技术要求使用耐高温(930C)的DNA聚合酶。 如果请你来寻找这种耐高温的酶,你会去哪里寻找?依据:在寻找目的菌种时,要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。启示:实验室中微生物的筛选原理 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括 等),同时 或 其它微生物生长。营养、温度、pH抑制阻

2、止选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。选择培养基的制作(金牌学案P22)(1)利用培养基的特定化学成分分离特定微生物。如以石油是唯一碳源,筛选出能利用石油的微生物生长。(2)通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时,可筛选出固氮微生物。(3)通过某些特殊环境分离微生物。如在高温环境中可分离得到耐高温的微生物。(4)依据某些微生物对某种物质的抗性,在培养基中加入此种物质,以抑制对该物质不具抗性的微生物生长,而不影响对该物质具有抗性的微生物生长。如培养基中加入青霉素,可筛选出酵母菌和霉菌。选择培养基鉴别培养基培养基加入某种化学物

3、质,以抑制不需要的微生物的生长,只生长具有特定目的的微生物。在培养基中加入某种指示剂,鉴别特定的微生物,可以存在其他微生物。含青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌含高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌无氮培养基: 分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物含四环素等抗生素的培养基: 分离导入目的基因的受体细胞 尿素的利用:尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。 尿素分解菌分解尿素的原因:土壤中的细菌能合成脲酶分解尿素。 研究背景P21CO(NH2)2脲酶 + H2O+ CO22NH3筛选出尿素分解菌的应用价值:1.研

4、究其生活习性,为提高农业生产创设条件;2.挑选与培养优良菌种,服务农业生产.【尿素分解菌的选择培养】P22该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质?碳源:葡萄糖氮源:尿素此配方能否筛选出产生脲酶的细菌?为什么?尿素是唯一氮源,原则上只有能够产生脲酶、利用尿素的细菌才能生长。提示:在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨。 1.氨会使培养基的碱性增强,pH升高,故可通过检测培养基pH的变化来判断。【尿素分解菌的鉴别】P262.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,观察颜色的变化。鉴别培养基:在培养基中加入某种指示剂,以鉴别特定的微生物。 纤维素的分布

5、:纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,大量分布在植物的根、茎、叶等中。其中,棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。植物每年产生的纤维素超过70亿吨。 纤维素的分解:某些微生物能够产生纤维素酶(复合酶),分解利用纤维素。 研究背景P27筛选出纤维素分解菌的应用价值:1.对该类微生物的研究和应用,使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精;2.用纤维素酶处理服装面料.纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶Cx酶葡萄糖苷酶【纤维素分解菌的选择培养】P291.纤维素分解菌选择培养基属于_(固体、液体)培养基,原因是_阅读资料二“选择培养基”,回答以下问题:液体没有添加琼脂2.该培养基对微生物_(具有/不具有)选择作用

6、。如果具有,其选择机制是_ 具有 以纤维素为主要碳源,能分解纤维素的微生物可以大量繁殖培养基组成纤维素粉5gNaNO31gKCl Na2HPO47H2O KH2PO4 MgSO4 7H2O 0.5g 1.2g0.9g0.5g酵母膏0.5g水解酪素0.5g溶解后,蒸馏水定容至1000mL3.你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用?提示:自变量为培养基的种类。可用普通培养基(牛肉膏蛋白胨培养基或将纤维素改为葡萄糖)和选择培养基作对比。2.原理是:刚果红可以与纤维素形成_,当纤维素被_分解后,红色复合物无法形成,出现以_为中心的_,我们可以通过_来筛选纤维素分解菌。提示:刚果红(CR)是一种染

7、料,可与纤维素形成红色复合物,但不与水解后的纤维素二糖和葡萄糖发生此反应。 【纤维素分解菌的鉴别】P291.筛选纤维素分解菌的方法是_。该方法可以通过_反应直接筛选。刚果红染色法颜色红色复合物纤维素酶纤维素分解菌 透明圈是否产生透明圈培养基组成CMC-Na 5-10g酵母膏 1gKH2PO4 0.25g土豆汁 100mL琼脂 15g上述物质溶解后,加蒸馏水定容至1000mL(水溶性羧甲基纤维素钠)【资料三】刚果红染色法(P29)方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应;方法二:在倒平板时就加入刚果红。讨论:刚果红(CR)呢?【资料三】刚果红染色法(P29)方法一:先培养微生物,再加入刚果

8、红进行颜色反应方法二:在倒平板时就加入刚果红两种方法均可出现明显的透明圈!染色法优点缺点方法一 方法二 颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐,刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便,不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈;有些微生物能降解色素,亦形成明显的透明圈有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株,请回答下列问题。(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于培养基。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株降解原油的能力。

9、在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()A.鉴别培养基 B.加富培养基C.选择培养基 D.基础培养基【基础巩固】C选择原油强请回答下列与大肠杆菌有关的问题。(2)下表是某公司研发的一种检测大肠杆菌菌群的培养基的配方。成分含量/g蛋白胨10.0乳糖5.0 蔗糖5.0 K2HPO42.0 显色剂0.2 琼脂12.0 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL(2)根据用途划分该培养基属于(填“选择”或“鉴别”)培养基。该培养基中的碳源是。 鉴别蛋白胨、乳糖、蔗糖刚果红染色时,加入刚果红可在()制备培养基时梯度稀释时倒平板时涂布时长出菌落

10、时A.B. C.D.下列关于纤维素酶的叙述,错误的是()A.纤维素酶只有一种,只能将纤维素分解为葡萄糖B.纤维素酶是一种复合酶,至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种组分C.纤维素可被纤维素酶水解成葡萄糖,为微生物提供营养物质D.分解纤维素的细菌、真菌和放线菌,都是通过产生纤维素酶来分解纤维素的CA【对点检测】在加入刚果红的培养基中会出现如右图所示的透明圈,产生的透明圈是()A.刚果红与纤维素形成的复合物B.刚果红被纤维素分解菌分解形成的C.纤维素分解后形成的葡萄糖导致的D.以纤维素分解菌为中心形成的D某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题。(1)有些细菌能分

11、解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是。但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是 (答出两点即可)。 (2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是 。 (3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出两点即可)。 脲酶分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用为细菌生长提供无机营养,

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